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杧果野生居群遗传多样性ISSR分析

果树学报 2007年第3期24卷 329-333页

作者：余贤美艾呈祥中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南儋州571737 山东省果树研究所山东省果树生物技术育种重点实验室山东泰安271000

采用ISSR标记技术对海南、云南、广西3省的12个杧果野生居群共265个个体的遗传多样性水平及居群遗传结构进行研究。9个引物共检测到102个位点,其中89个位点为多态位点,占87.25%。POPGENE分析结果表明:杧果具有丰富的遗传变异(在物种水平... 详细信息

采用ISSR标记技术对海南、云南、广西3省的12个杧果野生居群共265个个体的遗传多样性水平及居群遗传结构进行研究。9个引物共检测到102个位点,其中89个位点为多态位点,占87.25%。POPGENE分析结果表明:杧果具有丰富的遗传变异(在物种水平上,He=0.2541,H0=0.3940;在居群水平上,PPL=66.81,He=0.1968,H0=0.3099)。Nei’s遗传多样性分析和AMOVA分析表明,各居群间产生了一定程度的遗传分化(GST=0.2337,FST=0.2192),可能是由于生境破坏和基因流的障碍(Nm=0.8905)引起。UPGMA聚类分析表明,广西的3个居群(那坡、邕宁、平南)优先与云南的文山居群聚为一支;而云南的永德和版纳居群各自聚为一支。

关键词：杧果野生资源居群遗传结构 ISSR

代谢组学-转录组学联合分析不同品种柿叶矿物质含量差异

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生物工程学报 2023年第7期39卷 2986-3002页

作者：余贤美王洁高瑞龚榜初艾呈祥山东省果树研究所山东泰安271000 中国林业科学院亚热带林业研究所浙江富阳311400

柿叶含有丰富的钙、铁、锰、锌等人体必需的矿质元素,不同柿树品种,其柿叶中矿质元素的组成和含量有着明显差异。本研究以‘君迁子’(Diospyros Lotus Linn,DL)为对照,采用代谢组学-转录组学联合分析,研究了‘黑柿’(Diospyros ***,HS)... 详细信息

柿叶含有丰富的钙、铁、锰、锌等人体必需的矿质元素,不同柿树品种,其柿叶中矿质元素的组成和含量有着明显差异。本研究以‘君迁子’(Diospyros Lotus Linn,DL)为对照,采用代谢组学-转录组学联合分析,研究了‘黑柿’(Diospyros ***,HS)、‘西村早生’(Diospyros kaki ***,NM)、‘泰富’(Diospyros kaki ***,TF)鲜嫩柿叶中矿质元素的含量差异。代谢组学分析显示,从DL ***、DL ***和DL ***中分别获得了382、391和368个差异代谢产物(differentially accumulated metabolites,DAMs),其中229个为共同DAMs。经RNA测序,获得了182008个单基因(unigenes),平均长度为652 bp,从DL ***、DL ***和DL ***中分别获得了2598、3503和3333个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。经基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,分别从DL ***、DL ***和DL ***中获得了9、12和12个与矿物质吸收相关的DEGs,其中6个为共同DEGs,每百万碱基测序的转录本序列每千碱基序列片段数(fragments per kilobase of transcript sequence per millions base pairs sequenced,FPKM)值差异倍数为1.34–6.15,经实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证,其表达趋势均与RNA测序结果一致,相对表达水平差异倍数为0.26–10.21。转录组学数据分析和qRT-PCR验证结果表明,‘黑柿’鲜嫩柿叶中含有较高含量的矿物质,‘西村早生’和‘泰富’次之。联合分析显示,6个DEGs与其代谢产物呈正相关。本研究结果说明,3个柿树品种中,‘黑柿’的鲜嫩柿叶可推荐用于富含矿质元素柿叶茶的制作。

关键词：柿叶矿物质吸收转录组学分析代谢组学分析联合分析

嗜铁细菌CAS17的分离鉴定及其对毒死蜱的降解特性研究

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环境科学学报 2014年第1期34卷 136-142页

作者：于婷董庆龙刘嘉芬安淼王海荣余贤美山东省果树研究所泰安271000 山东农业大学泰安271018

采用改良定向培育法，从获得的几株嗜铁细菌菌株中经过驯化筛选，获得1株对毒死蜱有较高降解作用的细菌CAS17.结合其生理生化特性及16S rRNA 序列分析，将其鉴定为耐盐短杆菌（Brevibacterium halotolerans）.生长特性和毒死蜱降解试验... 详细信息

采用改良定向培育法，从获得的几株嗜铁细菌菌株中经过驯化筛选，获得1株对毒死蜱有较高降解作用的细菌CAS17.结合其生理生化特性及16S rRNA 序列分析，将其鉴定为耐盐短杆菌（Brevibacterium halotolerans）.生长特性和毒死蜱降解试验结果表明，该菌株对毒死蜱有较高的耐受性，在毒死蜱浓度达到800 mg·L^-1时仍可生长.最适毒死蜱降解浓度为≤100 mg·L^-1，降解率可达67%左右，浓度继续升高时降解效果明显降低；最适降解温度为30 ℃，对高温敏感；对pH值有着较强的适应范围，pH值在5-9之间的降解率波动不大；最适降解时间为48 h，振荡速率为150 r·min^-1，接种量为4%；适合其降解的最佳外加碳源为葡萄糖，最佳氮源为酵母粉，最佳无机盐为CaCl2.

关键词：毒死蜱生物降解鉴定降解特性

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一株热带土壤解磷细菌的筛选鉴定及拮抗初探

安徽农业科学 2009年第18期37卷 8347-8349,8405页

作者：王义余贤美贺春萍郑服丛海南大学环境与植物保护学院海南儋州571737 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南儋州571737 农业部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室海南儋州571737 海南省热带农业有害生物监测监控重点实验室海南儋州571737

[目的]研究热带土壤解磷微生物种群结构,筛选鉴定高效解磷菌株,为热带土壤解磷细菌的筛选和菌肥制备奠定基础。[方法]以有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板法从海南、广东、云南等地热带土壤中筛选出解磷效果较好的一... 详细信息

[目的]研究热带土壤解磷微生物种群结构,筛选鉴定高效解磷菌株,为热带土壤解磷细菌的筛选和菌肥制备奠定基础。[方法]以有机磷液体培养基进行生物富集,无机磷固体培养基平板法从海南、广东、云南等地热带土壤中筛选出解磷效果较好的一株解磷细菌PSB13。[结果]通过细菌16 S rRNA通用引物PCR扩增该菌株的16 S rDNA序列,测得序列长度为1 088 bp,经B lastn搜索进行序列比对,结果表明,该菌株属于Burkholderiasp。进一步的室内平板对峙培养试验表明,PSB13对Fusarium oxysporum piperis等11个供试病原菌中的9个具有不同程度的拮抗作用。[结论]PSB13是一株高效的具有开发前景的热带土壤解磷菌株。

关键词：热带土壤解磷细菌 16 S rDNA 分子鉴定拮抗

枯草芽孢杆菌Bs-15产嗜铁素条件及其对甜椒的防病促生效应

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农药学学报 2010年第2期12卷 135-141页

作者：余贤美周广芳辛力山东省果树研究所山东泰安271000

研究了不同培养条件对枯草芽孢杆菌Bs-15嗜铁素产量的影响。结果表明,以改良MM培养基为基础培养基,以葡萄糖为碳源,以色氨酸为外源氨基酸,在pH7.2、装液量100mL/250mL、37℃、200r/min下培养,可获得较高产量的嗜铁素。盆钵试验结果表明... 详细信息

研究了不同培养条件对枯草芽孢杆菌Bs-15嗜铁素产量的影响。结果表明,以改良MM培养基为基础培养基,以葡萄糖为碳源,以色氨酸为外源氨基酸,在pH7.2、装液量100mL/250mL、37℃、200r/min下培养,可获得较高产量的嗜铁素。盆钵试验结果表明:若同时接种Bs-15和枯萎病菌,Bs对枯萎病菌的防效为44.44%;若施用Bs-152d后再接种枯萎病菌,防效可达56.94%。说明Bs-15可能通过产生系统诱导抗性增强了对枯萎病的防效。研究结果还表明,Fe离子可大大降低Bs-15对枯萎病的防治效果,防效仅为12.50%和23.43%。另外,经Bs-15浸种处理播种后第14,21,28和40d的甜椒苗比对照增高27.24%～54.53%;与对照相比,处理组中有50%的甜椒开花时间提前了17.26d,平均单果重和单株产量分别提高36.92%和49.68%。表明枯草芽孢杆菌Bs-15在甜椒枯萎病防治及生长促进作用方面具有较好的效果。

关键词：枯草芽孢杆菌甜椒镰刀菌枯萎病生物防治植物促生作用

果园风送式喷雾机在现代矮砧苹果园的喷施效果评价

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果树学报 2024年第9期41卷 1821-1828页

作者：朱力争王涛王丹余贤美翟浩山东省费县果茶服务中心山东费县273400 山东省果树研究所山东泰安271000

【目的】探究风送式塔型喷雾机在矮砧宽行密植苹果园中的施药效果,优化施药参数,为现代矮砧苹果园农药施用“减量增效”提供理论参考。【方法】以5年生烟富3苹果为试验材料,采用水敏纸雾滴测试卡测定3WF-1000风送式塔型喷雾机雾滴粒径... 详细信息

【目的】探究风送式塔型喷雾机在矮砧宽行密植苹果园中的施药效果,优化施药参数,为现代矮砧苹果园农药施用“减量增效”提供理论参考。【方法】以5年生烟富3苹果为试验材料,采用水敏纸雾滴测试卡测定3WF-1000风送式塔型喷雾机雾滴粒径、雾滴密度与覆盖率,并利用示踪剂诱惑红测定喷雾机的药液沉积量及地面沉积量。【结果】在5年生现代矮砧宽行密植苹果园中,喷雾机在不同牵引速度下的雾滴特性差异显著,与牵引速度为1.16 m·s^(-1)(4.18 km·h^(-1))时相比,牵引速度为1.77 m·s-(16.37 km·h^(-1))时的雾滴覆盖率和雾滴粒径由62.19%和142.67μm下降到57.03%和131.67μm,而雾滴密度由141.72点·cm^(-2)增加到179.86点·cm^(-2);牵引速度为1.77 m·s^(-1)时的叶面平均沉积量、地面沉积量和农药利用率分别为0.24μg·cm^(-2)、0.55μg·cm^(-2)和47.1%,均高于1.16 m·s^(-1)时(分别为0.22μg·cm^(-2)、0.43μg·cm^(-2)和43.7%)。【结论】3WF-1000型风送式喷雾机两个牵引速度(1.16 m·s^(-1)和1.77 m·s^(-1))的雾滴特性均能满足矮砧宽行密植苹果园病虫害的防治要求,喷雾机在牵引速度1.77 m·s^(-1)时农药利用率更高,但易导致土壤流失率增高。

关键词：果园风送式喷雾机雾滴密度雾滴覆盖率雾滴粒径利用率流失率

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柿树带化病相关植原体的形态及分子鉴定

植物生理学报 2017年第2期53卷 219-226页

作者：王洁高瑞余贤美安淼艾呈祥山东省果树研究所山东泰安271000 山东省农业科学院植物保护研究所济南250100

柿树为我国重要的经济林果树,柿果、柿叶和柿霜等包含丰富的生物活性成分,具有重要的医学价值。从山东省邹城市采集到表现带化并伴随节间缩短和叶片变小的柿树枝条样品,利用透射电子显微镜进行植原体细胞检测,结果显示染病的柿枝条韧皮... 详细信息

柿树为我国重要的经济林果树,柿果、柿叶和柿霜等包含丰富的生物活性成分,具有重要的医学价值。从山东省邹城市采集到表现带化并伴随节间缩短和叶片变小的柿树枝条样品,利用透射电子显微镜进行植原体细胞检测,结果显示染病的柿枝条韧皮部筛管细胞内存在直径为200~600 nm的圆形或者椭圆形植原体粒子。提取染病柿树枝条和健康枝条的韧皮部总DNA,利用植原体16S rRNA基因及延伸因子tuf基因通用引物进行PCR扩增,从染病组织DNA中得到了长度分别约为1.2和0.8 kb的片段,健康柿树枝条没有扩增条带。序列一致率分析表明,柿树带化植原体16S rRNA基因和tuf基因与枣疯植原体相应基因的核苷酸一致率分别高达99.8%和99.9%;i Phy Classifi er在线分析表明,柿树带化植原体与16Sr V-B亚组代表株系的16S rRNA基因具有相同的酶切图谱,相似系数为1.0;基于两个基因构建的系统进化树均表明,柿树带化植原体与16Sr V-B亚组成员聚为一簇。生物学和分子生物学鉴定结果表明,柿树带化病存在植原体,且该植原体属于榆树黄化组(16Sr V)B亚组,与候选种‘Candidatus Phytoplasma ziziphi’相关。

关键词：植原体柿树柿树带化病榆树黄化组

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水稻CO39几丁质酶基因的克隆

热带作物学报 2008年第1期29卷 64-67页

作者：余贤美艾呈祥郑服丛中国热带农业科学院环境与植物保护研究所热带农业有害生物检测监控中心海南儋州571737 山东省果树研究所山东省果树生物技术育种重点实验室山东泰安271000

以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料,提取水稻基因组DNA,通过PCR扩增获得水稻几丁质酶基因OsRCchi1,经序列测定得知该基因大小为1065bp,序列比对结果显示,OsRCchi1与已知的水稻几丁质酶基因Oryza sativa(japonica cultivar-group)classⅢch... 详细信息

以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料,提取水稻基因组DNA,通过PCR扩增获得水稻几丁质酶基因OsRCchi1,经序列测定得知该基因大小为1065bp,序列比对结果显示,OsRCchi1与已知的水稻几丁质酶基因Oryza sativa(japonica cultivar-group)classⅢchitinase RCB4(Rcb4)mRNA(AF350426)、Oryza sativa chitinase mRNA(AF330230)及Oryza sativa ***Ⅲchitinase(chib1)gene(AF296279)的相似性分别为85.9%、76.2%和75.0%。因此,可以认为OsRCchi1基因是classⅢ几丁质酶基因家族的一个成员。

关键词：水稻几丁质酶基因基因克隆

水稻CO39β-l,3-葡聚糖酶基因的克隆

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热带作物学报 2006年第2期27卷 68-73页

作者：余贤美李锐郑服丛中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南儋州571737

以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料,提取水稻基因组DNA,通过PCR扩增获得水稻β-l,3-葡聚糖酶基因(CO39-β-l,3-Glu),经序列测定得知该基因大小为489bp,通过Blastn搜索确定该片段位于水稻10号染色体。序列比对结果表明,CO39-β-l,3-Glu与... 详细信息

以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料,提取水稻基因组DNA,通过PCR扩增获得水稻β-l,3-葡聚糖酶基因(CO39-β-l,3-Glu),经序列测定得知该基因大小为489bp,通过Blastn搜索确定该片段位于水稻10号染色体。序列比对结果表明,CO39-β-l,3-Glu与已知的水稻Gns7和大豆GlycinesojacloneGs522194aendo-β-1,3-glucanasegene,GlycinesojacloneGs464889_Bendo-β-1,3-glucanasegene三个基因的相似性分别为51.5%,47.2%和49.1%。CO39-β-l,3-Glu基因是β-l,3-葡聚糖酶基因家族的一个成员。

关键词：水稻β-1,3-葡聚糖酶基因基因克隆