检索结果-南通市图书馆

作者：何长婷中国科学技术大学

学位级别：硕士

随着深度学习的提出,人脸识别取得了突破性的发展,并得到了广泛的应用。将人脸识别应用于课堂签到系统中,解决传统点名签到耗时久的缺点,具有重要的实际应用价值。本文重点研究签到系统中的人脸识别问题,其难点在于运行环境为硬件资源... 详细信息

随着深度学习的提出,人脸识别取得了突破性的发展,并得到了广泛的应用。将人脸识别应用于课堂签到系统中,解决传统点名签到耗时久的缺点,具有重要的实际应用价值。本文重点研究签到系统中的人脸识别问题,其难点在于运行环境为硬件资源有限的移动端,以及如何解决光照等因素对采集到的人脸图像的影响。针对上述问题,本文主要研究工作如下:1.针对手机采集人脸图像的过程中由于光线等因素导致图像出现模糊、姿态不正等质量问题,提出一种基于深度学习的移动端人脸图像无参考质量快速评估算法。目前存在的优异的图像质量评估算法,大多是基于统计学习的方法,同时研究对象也非人脸图像,而是一般图像。因此在对人脸图像进行评估时,评估结果与实际情况往往存在较大误差,且难以满足实时性的要求。本文通过对不同质量的图像,在进行预处理操作后,通过迁移学习构建基于MobileNet模型的图像质量分类器。实验结果表明,当将人脸图像质量简单的分为合格与不合格两类时,能取得97.4%的准确率,在手机端每帧的处理时间大约为0.23s。当将人脸图像根据失真类型细分为模糊、昏暗、遮挡、姿态不正、合格等五类时,能取得97.2%的准确率,每帧的处理时间能达到0.25s,满足实时性的要求。2.针对手机端进行人脸识别对硬件条件要求较高的问题,本文提出一种基于FaceNet改进的人脸识别算法。目前提出了很多优异的基于深度学习的人脸识别模型,例如DeepFace、Deepld、FaceNet等模型。然而此类算法多运行于计算能力强的服务器端,移植到硬件条件有限的移动端则无法取得理想的效果。本文采用轻量级网络SqueezeNet,MobileNet作为FaceNet的基础网络,利用centerloss和softmax综合loss进行训练。这两种轻量级网络利用点卷积、深度可分离卷积等操作进行加速运算,能够在保持较高准确率的同时,大大降低计算量。实验结果表明,基于SqueezeNet的模型最高能达到98.5%的准确率,基于MobileNet的模型最高能达到96.4%的识别率。3.利用上述研究成果,设计并实现基于人脸识别的课堂签到系统,对本文的研究方法进行应用验证。

关键词：移动端课堂签到人脸图像质量评估人脸识别 MobileNet SqueezeNet

电子元件分销市场及电子元件独立分销商模式研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

电子元件分销市场及电子元件独立分销商模式研究

作者：何长省西南交通大学

学位级别：硕士

电子元件作为我国3C产业的基础性行业，其发展对于整个国民经济都有非常重要的影响，而电子元件分销行业作为电子元件价值链传递的重要环节，其运作效率对整个电子产业也有非常重要的影响。电子元件分销行业作为电子元件的中间性行业，... 详细信息

电子元件作为我国3C产业的基础性行业，其发展对于整个国民经济都有非常重要的影响，而电子元件分销行业作为电子元件价值链传递的重要环节，其运作效率对整个电子产业也有非常重要的影响。电子元件分销行业作为电子元件的中间性行业，其不但担负着电子元件的物流和销售作用，同时还会为其客户（电子产品生产商）提供产品开发等技术支持、财务支持、和售后服务支持，同时为其供应商（电子元件生产商）收集市场信息，为其新产品开发提供信息服务。因此电子元件分销行业的表现会直接影响其上游供应商和下游客户的业绩和发展。当前的电子元件分销行业，授权分销商占有主导地位，但是由于其市场的复杂性和环境的快速变化，授权分销商不可能完全满足其客户的需求，因此一种新的分销商模式——独立分销商模式开始出现并且快速发展，独立分销商公司在市场中地位正日益重要。独立分销商作为一种全新的电子元件销售模式，是伴随着英特网的发展和应用、电子元件产业的全球化分工和OEM及EMS的产业模式的发展而成长起来的新的业务模式，其有效利用了最新的信息技术和顺应电子产业的全球化趋势。电子元件分销商模式在重视传统营销因素外，更加重视信息技术和企业关系（包括供应商、客户和员工的关系）。本论文通过对不同类型的独立电子元件分销商的研究和对比，提出了一种新的模型。在此模式中，强调了客户的核心地位，公司通过整合其内部和外部资源形成了财务和价格支持、物流及品质保障三种能力来为客户提供服务和支持，以此来和其客户建立长期的合作关系。论文通过对三种不同类型的独立分销商作为案例来分析和对比，讨论其公司内部结构和资源，分析其上述三种能力的高低，以及从其财务、客户、内部流程和学习成长等多个维度对案例公司的业绩进行评估。以此证明其模型的有效性和合理性，也为初创独立分销商提出一个合理、有效的模式，同时，还为独立分销商提供一个企业内部诊断工具。

关键词：电子元件电子元件分销独立分销商模式

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

互联网非公开股权融资平台监管问题研究

互联网非公开股权融资平台监管问题研究

作者：何长雨西南政法大学

学位级别：硕士

互联网非公开股权融资是股权众筹融资在中国现行法律框架之下具体实践的产物,是一种新型的互联网金融业态,曾一度被冠以“私募股权众筹”之名,随着众筹融资在我国的深入实践与不断发展,才逐渐明确了互联网非公开股权融资与股权众筹融资... 详细信息

互联网非公开股权融资是股权众筹融资在中国现行法律框架之下具体实践的产物,是一种新型的互联网金融业态,曾一度被冠以“私募股权众筹”之名,随着众筹融资在我国的深入实践与不断发展,才逐渐明确了互联网非公开股权融资与股权众筹融资分类施策、区别监管的发展与治理之路。由于我国互联网非公开股权融资起步晚、发展快,监管落后,缺乏统一的规范体系,导致行业发展尚未显露出应有的生机。而在整个投融资关系中,平台处于中心地位,理应成为监管的重点。因此,本文以互联网非公开股权融资平台监管为主题,通过对相关法律规范以及监管部门规范性文件的梳理,总结目前平台监管的立法现状,归纳在平台准入、平台合规和平台退出等环节存在的监管漏洞和问题。最后在借鉴美国众筹平台监管经验的基础上,提出完善我国互联网非公开股权融资平台监管的建议,以期为我国互联网非公开股权融资的发展与监管提供一些思路。除引言和结语外,本文分为五个部分:第一部分是对互联网非公开股权融资平台相关基本理论问题的梳理。首先,界定互联网非公开股权融资的概念,并将互联网非公开股权融资与股权众筹、私募股权基金进行比较;其次,明确平台作为更高义务要求的特殊居间人的法律性质,并对平台承担更高义务的原因进行分析;最后,通过对目前行业中具有代表性的平台的观察与体验总结出平台一般的运作模式。第二部分是对互联网非公开股权融资平台监管的必要性及现状审视。由于平台在整个投融资活动中处于中心地位,为了控制平台运行过程中存在的法律风险,有效维护投融资双方的权益,本文认为对于互联网非公开股权融资的监管应当以平台为中心,监管的重心应向平台倾斜。另外,通过对与互联网非公开股权融资活动相关的法律法规以及监管文件的梳理,总结目前平台监管的立法现状以及监管实施情况。第三部分是对互联网非公开股权融资平台监管存在的问题进行分析。第一个问题是对平台的准入监管工作不足。具体体现在对于平台性质和地位的界定不清,现行的平台准入条件不适当。第二个问题是对平台的合规监管缺乏力度。由于缺少监管法规及细则,平台存在着非法公开发行证券、非法集资、损害投资者权益等违法风险。第三个问题是对平台的退出监管存在空白。因缺少平台退出的相应制度,对于平台退出市场的监管基本处于真空状态。第四部分是对美国相关监管经验的介绍以及从中得出的对我国的启示。本部分主要剖析了美国众筹融资立法以及众筹平台监管的经验,并从中分析得出对我国互联网非公开股权融资平台监管可供借鉴的经验和启示。第五部分是对完善我国互联网非公开股权融资平台监管制度的建议。本部分内容主要是针对目前平台从设立到下线全过程中可能存在的问题和法律风险提出规制的建议和措施。包括加快出台专门的监管法规及细则以明确平台合法地位;加强对平台准入阶段的监管力度,以满足行业健康发展的需要;强化对平台违法风险的管控,防止平台出现违法违规操作;建立与平台退出市场相关的监管制度,弥补监管空白等。

关键词：互联网非公开股权融资融资平台监管股权众筹

长江泰州高港段“三无”船舶监管困境与对策研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

长江泰州高港段“三无”船舶监管困境与对策研究

作者：何长飞南京理工大学

学位级别：硕士

近年来,随着长江经济带国家战略的深入实施,泰州立足自身区位优势,把握重要战略机遇期,加快推进“港口名城”建设。高港港作为泰州港的核心港区,借助黄金水道建设、航运业复苏等良好的外部发展环境,港口的大型化、专业化、规模化水平不... 详细信息

近年来,随着长江经济带国家战略的深入实施,泰州立足自身区位优势,把握重要战略机遇期,加快推进“港口名城”建设。高港港作为泰州港的核心港区,借助黄金水道建设、航运业复苏等良好的外部发展环境,港口的大型化、专业化、规模化水平不断提升。与此同时,长江泰州高港段因历史、市场等原因而长期存在的“三无”船舶,成为制约港口经济发展、影响港口对外形象、威胁水上交通安全的“顽疾”,加强对“三无”船舶的整治势在必行。为此,当地海事部门从未放松对“三无”船舶的监管,采取了联合执法、专项行动等一系列整治措施,打击“三无”船舶成为了一场长期而艰巨的持久战。本文旨在分析实践所得成效和梳理前人研究成果的基础上,以公共管理理论为支撑,从界定“三无”船舶的概念入手,通过文献研究、比较分析、问卷调查、基层调研、深度访谈等方法对长江泰州高港段“三无”船舶的现状进行探讨,分析其存在的根源,研究整治过程中出现的难点以及成因,并参考国内外相关研究和其他地区、行业治理经验提出解决问题的对策。本文的研究成果可以在理论和实践上为相关研究提供补充,并在一定程度上为今后打击包含“三无”船舶在内的非法船舶及非法行为提供借鉴。

关键词：长江三无船舶海事整治

《麦田里的守望者》中反主流文化英雄霍尔顿·考菲尔德

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

《麦田里的守望者》中反主流文化英雄霍尔顿·考菲尔德

作者：何长喜山东师范大学

学位级别：硕士

J.D.塞林格的长篇小说《麦田里的守望者》在出版了30多年后,已被美国文学界公认为当代美国文学中两部“现代经典”之一。小说通过霍尔顿·考尔菲德（Holden Caulfield）离开潘西中学后在纽约的游荡经历,深刻地揭示了现代社会中的疏离感... 详细信息

J.D.塞林格的长篇小说《麦田里的守望者》在出版了30多年后,已被美国文学界公认为当代美国文学中两部“现代经典”之一。小说通过霍尔顿·考尔菲德（Holden Caulfield）离开潘西中学后在纽约的游荡经历,深刻地揭示了现代社会中的疏离感和孤独感。霍尔顿厌倦同学间的冷漠、欺诈和虚假。他只身到纽约游逛,进而发现社会更加平庸、鄙俗和腐败。他十分失意,最后只因为妹妹菲苾（Phoebe ）的关爱,才走出绝望的深渊。霍尔顿似乎代表了所有的年轻人,他们觉得自己被来自四面八方的各种压力所包围,他们要成长,并要按照准则去生活,要断绝有意义的人际接触,要抑制自己的个性,并顺应一个索然无味的文化标准。他是一个纯真的面对文化压迫而不受羁绊的人物。本文试图从文化的宏观角度来分析霍尔顿这一反英雄人物形象。本文结合当时的社会、政治和经济背景阐释了主流文化及其核心表现形式—美国梦.当时美国处于麦卡锡政府高压时期,国内政治环境紧张,对外和苏联冷战,政府严格控制人民的思想并制定相应的道德法制制度要人们遵守。当时社会对人们思想产生深刻影响。美国梦在美国人的生活中起着重要作用,美国梦意味着对幸福、自由的追求。然而在50年代的美国,美国梦已被异化,人们过分关注于对物质的追求。生活在这样一个时代,主人公霍尔顿愤怒地发起了对当时主流文化的反叛。主人公抵制潘西中学所体现的拉帮结派、排斥异己的团体精神;主人公坚决反对已被异化的美国梦,彻底揭露美国梦的欺骗性和腐败性;主人公的语言同时也体现出二战后美国反文化运动语言的特点。霍尔顿不愿随波逐流过平庸的生活,他不仅是一个痛苦的反叛者,而且是一个坚定的追寻者。他逃避现代文明,逃避一个卑劣的世界,逃避一个冷漠疏远的社会。他追寻自身的存在追寻有意义的交流,追寻人类间的真爱,追寻儿童般的纯洁。在一定程度上,孩子们天真质朴的天性给予他温暖和力量,但他最后明白了童年的天真无邪是短暂而易逝的,企图阻止孩子们长大成人是徒劳无益的。他意识到堕落“悬崖”的必然性,最后凭着他对世人的挚爱与同情,他接受了现实,并与虚假的社会取得和解。与霍尔顿一样,许多青少年甚至成年人,都面临着走向成熟和适应社会的问题。霍尔顿的反叛和追寻可以启示我们,我们必须相信一切美德,如真爱、纯洁

关键词：霍尔顿主流文化反叛追寻

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

石黑一雄作品中的战争记忆困境

石黑一雄作品中的战争记忆困境

作者：何长静湖南师范大学

学位级别：硕士

日裔英籍作家石黑一雄,以其小说特有的强大情感力量,及对人与世界关系中幻觉特征的暴露摘得了2017年诺贝尔文学奖的桂冠。而记忆,或可说有关战争的回忆,是石黑一雄用以表现此种情感和幻觉的巨幅幕布,贯穿其大部分作品的始终。本文主要... 详细信息

日裔英籍作家石黑一雄,以其小说特有的强大情感力量,及对人与世界关系中幻觉特征的暴露摘得了2017年诺贝尔文学奖的桂冠。而记忆,或可说有关战争的回忆,是石黑一雄用以表现此种情感和幻觉的巨幅幕布,贯穿其大部分作品的始终。本文主要以他的3部作品——《浮世画家》《长日留痕》《被掩埋的巨人》为研究对象,探究其中战争记忆造成的困境。本文由绪论、正文和结语三部分组成。绪论部分主要介绍石黑一雄记忆写作的三大特点,并着重概述其作品中与“记忆”紧密相关的国内外研究现状,最后陈述本选题的创新之处。正文部分分为四章。第一章界定“记忆”与“回忆”的概念,同时,阐明它们的建构性特征,并进一步分析石黑一雄作品中的个体和集体在对战争进行回忆时利用这种建构性所使用的策略。第二章在论述记忆与身份认同的关系的基础上,从个体和集体角度对石黑一雄作品中的战争记忆对个体自我和集体合法性造成的危机进行解读。其中,个体的自我困境源自社会变革带来的新的评价标准对以往荣誉自我的玷污,令个体无法从对战争的回忆中获得具有连续性和相似性的自我认同;集体的合法性困境则是从身体、地点和仪式等方面分析刻写者和反刻写者对战争记忆刻写权力的争夺所导致的对现有政权合法性的质疑,以及由此而来的对记忆和遗忘进行取舍的两难。第三章仍然从个体和集体两个角度,针对第二章两大记忆主体陷入的战争记忆困境,通过对石黑一雄小说文本的分析,找出作者本人借创作在小说中提出的纾解建议。其中个体主要是建立起持续性思辨能力,以抵御令个人陷入困境的无思状态;集体则强调从以大部分人记忆为标准的共同记忆向视角不断融合的共享记忆转化,以最大化还原真相;最后阐述经由宽恕达成和解的必要性。第四章从作者本人的成长经历与创作理念出发,探究他书写战争记忆困境的缘起。其中成长经历主要关注的是石黑一雄在青年时代对理想主义的寻求,以及他对自己作为历史记忆传承者身份的认识。对他创作理念的讨论,则着眼于他对写作“国际化小说”的倡导,并希求借助寓言性的写作方式,启发人们对历史遗留的战争记忆问题的思考。结语简要提及石黑一雄以他独特的记忆写作对西方20世纪以来的记忆研究的丰富,并指出作者希望人们以记忆战争承负起应尽之责任的深切期望。

关键词：石黑一雄战争记忆困境纾解缘起

我国商业银行中间业务与效率分析 ——基于DEA理论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

我国商业银行中间业务与效率分析 ——基于DEA理论

作者：何长旭合肥工业大学

学位级别：硕士

我国已于2001年10月正式加入了世界贸易组织,敞开了对世界金融市场开放的大门。随着国内银行业的对外开放,国内商业银行面临的竞争压力越来越大。根据世界上先进银行业务发展趋势,研究商业银行的中间业务对银行整体经营效率的影响,并找... 详细信息

我国已于2001年10月正式加入了世界贸易组织,敞开了对世界金融市场开放的大门。随着国内银行业的对外开放,国内商业银行面临的竞争压力越来越大。根据世界上先进银行业务发展趋势,研究商业银行的中间业务对银行整体经营效率的影响,并找出改进方向,就成为迫切需要了解的问题。本文以国内12家商业银行为研究对象,以中间业务收入为产出变量,采用分析效率前沿面的数据包络方法,评价国内商业银行的经营效率。研究中使用了投入导向的数据包络分析法DEA方法,采用了其中的CCR模型和BCC模型,不仅分析了我国商业银行的技术效率、纯技术效率、规模效率,同时考虑银行规模报酬的变化,利用松弛变量分析,对各投入变量的增减作出计算,作为对银行建议的来源。通过对2005-2007这三年间的银行效率变化进行了分析得出结果,总体来说国有商业银行的平均效率与股份制商业银行的平均效率相近,但国有商业银行普遍存在规模效率递减的情况。从各个年份单独来看,每年效率最优的都是股份制银行,这也一定程度上说明国有商业银行还有需要改进之处。本文最后对如何提高商业银行经营效率也提出了几点建议。

关键词：商业银行 DEA 中间业务效率分析

社会工作视角下城市低收入家庭儿童的社会融入研究 ——以南京市A社区为例

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

社会工作视角下城市低收入家庭儿童的社会融入研究 ——以南京市A...

作者：何长菊南京大学

学位级别：硕士

一直以来,贫困问题是全球社会关注的焦点问题。对于正在快速城市化的中国,城市中的贫富分化问题越来越突出,城市中贫富分化的存在,必然导致城市低收入家庭的出现。城市低收入家庭的存在不仅影响城市化的进程,更重要的是影响生活在这些... 详细信息

一直以来,贫困问题是全球社会关注的焦点问题。对于正在快速城市化的中国,城市中的贫富分化问题越来越突出,城市中贫富分化的存在,必然导致城市低收入家庭的出现。城市低收入家庭的存在不仅影响城市化的进程,更重要的是影响生活在这些家庭中的儿童。这些城市低收入家庭中的儿童面临着许多问题：家庭经济贫乏、营养不良、教育机会少等,影响着他们的身心健康、认知交往能力、学习能力等,阻碍他们的健康成长。城市低收入家庭儿童问题引起了政府和社会各界的广泛关注,政府对这些贫困家庭实施社会救助,并出台了一些社会救助制度和儿童福利制度,社会各界也对城市低收入家庭儿童伸出了援助之手。然而,政府和社会各界对城市低收入家庭儿童更多的是给予物质上的救助,这种物质上的救助,在相当程度上解决了城市低收入家庭儿童的生活问题,但是单一的物质救助并不能解决儿童的许多潜在问题,如贫困儿童的朋辈群体关系、家庭成员关系以及社区关系等问题,这些将直接影响儿童的社会化进程,影响儿童的社会融入。因此,儿童的社会融入问题值得关注和重视。为了帮助城市低收入家庭儿童更好的实现社会融入,基于研究者暑期专业实习所收集的材料,本文试图从社会工作视角出发,依据生态系统理论和增权理论,运用社会工作专业方法进行介入,促进城市低收入家庭儿童的社会融入,使其健康的成长,更好的适应社会生活。通过对相关研究进行梳理,并参考和借鉴当前国内外对于社会融入的研究,特别是对于社会融入的维度划分对本文具有参考价值。研究者借鉴相关学者对社会融入维度的划分,尝试将城市低收入家庭儿童的社会融入划分为四个维度即朋辈群体融入、家庭融入、教育融入和社区融入。并对南京市A社区的15户低收入家庭进行入户访谈,在访谈的基础上对儿童社会融入的需求进行了分析。在对城市低收入家庭儿童的需求进行评估的基础上,从不同的角度采用不同的社会工作方法分别对儿童的社会融入进行介入。在人际关联与角色的理论角度上,采用小组工作介入儿童的朋辈群体融入,提高儿童的人际交往能力;从能力胜任与调适角度下,采用个案工作介入儿童的家庭融入,改善儿童与家庭成员之间的关系;在挖掘和激发潜能的理论角度上,采用一系列活动介入儿童的教育融入,提高儿童的学习成绩：从地位与栖息地角度下,采用社区工作介入儿童的社区融入,促进儿童融入社区。并对介入的效果进行评估,各介入方法都取得了一定的效果。本文对社会工作专业方法的综合运用以及针对不同融入维度采用不同的方法进行介入具有可操作性和可行性,取得了不错的效果,但是本文仍然存在不足之处：由于研究者缺乏实践经验,在小组介入中难免出现处理不当之处;个案介入缺乏全面性;介入教育融入的持续性不足以及缺乏社区的介入。

关键词：城市低收入家庭儿童社会融入社会工作介入

凉山彝族婚姻变迁研究（1956-2016年） ——以西昌市甘洛村为例

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

凉山彝族婚姻变迁研究（1956-2016年） ——以西昌市甘洛村为例

作者：何长学西南民族大学

学位级别：硕士

凉山彝族传统婚姻制度千百年来一直制约着彝族人民的婚姻,制度内实行的族内婚、等级内婚、姑舅表婚等原则要求各个等级严格遵守。彝族人民的婚姻观念在漫长的婚姻历程中随之形成,到解放前已经有一套固定的传统婚姻思维模式。在新中国成... 详细信息

凉山彝族传统婚姻制度千百年来一直制约着彝族人民的婚姻,制度内实行的族内婚、等级内婚、姑舅表婚等原则要求各个等级严格遵守。彝族人民的婚姻观念在漫长的婚姻历程中随之形成,到解放前已经有一套固定的传统婚姻思维模式。在新中国成立后接连经历了民主改革、婚姻改革、改革开放等一系列历史事件。这些历史事件对凉山彝族的生产、生活以及婚姻产生了巨大的影响。传统婚姻观念在改革初期还存在余温,不过随着改革的不断推进,凉山彝族婚姻也处在不断的变迁之中。本文以民主改革为分界点,以西昌市甘洛村为个案,从族内婚、等级内婚、姑舅表婚、家支外婚、一夫一妻、一夫多妻、转房制度以及礼金、订婚、婚礼、婚后不落夫家等方面来分析其具体的变迁情况,并且对变迁的原因进行了分析,交通便利、经济发展、教育普及等方面的改变对甘洛村彝族的思想产生了直接的影响,外部条件的开放使得甘洛村彝族对外界进一步了解,同时与外面的世界加强了联系,甘洛村彝族的世界观、价值观与婚育观都发生了变化,由此,传统与现代化发生了碰撞。而在向现代化发展的过程中,也出现了如礼金高涨、离婚率不断上升、传统文化遭破坏等问题,本文给以分析外来文化对甘洛村彝族婚姻的积极与消极方面的影响,并提出对策,以期建设相对完美的新型婚姻模式。

关键词：彝族婚姻甘洛村变迁

miR-130b-3p/5p通过靶向KLF3调控山羊肌内脂肪细胞分化

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-130b-3p/5p通过靶向KLF3调控山羊肌内脂肪细胞分化

作者：何长晟西南民族大学

学位级别：硕士

肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量主要取决于肌内脂肪细胞的脂肪形成和成熟脂肪细胞脂质的积累。脂肪沉积主要由脂肪细胞增殖和分化的程度决定,而miRNA(micro RNA)是真核生物中发现的一类通过与特异的靶基因结合进而在基因转录后调... 详细信息

肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量主要取决于肌内脂肪细胞的脂肪形成和成熟脂肪细胞脂质的积累。脂肪沉积主要由脂肪细胞增殖和分化的程度决定,而miRNA(micro RNA)是真核生物中发现的一类通过与特异的靶基因结合进而在基因转录后调控细胞分化的内源性非编码RNA。近年来,山羊肉以其高蛋白、低脂肪、低胆固醇的特点逐渐受到消费者的欢迎,但在miRNAs调控山羊肌内脂肪分化的分子机制上研究较少。因此本研究以实验前期利用RNA-Seq筛选得到的调控山羊肌内脂肪细胞分化的差异miR-130b-3p和miR-130b-5p为研究对象,通过RT-PCR、实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)、载体构建、细胞培养、过表达、RNA干扰、双荧光素酶报告检测系统等分子及细胞生物学手段,在明确miR-130b-3p和miR-130b-5p表达特性的基础上,阐明对山羊肌内脂肪细胞分化的调控作用及可能的作用机制。(1)miR-130b-3p和miR-130b-5p对山羊肌内脂肪细胞分化的影响miR-130b-3p和miR-130b-5p在山羊肌内脂肪细胞分化0～36 h相对表达水平平稳,分化36～60 h相对表达水平逐渐升高,最后在60～96 h其表达水平逐渐降低。模拟miR-130b-3p表达后山羊肌内脂肪细胞中脂滴积聚减弱,甘油三酯合成量减少,CEBPα、PPARγ、SREBP1、ACC、FASN、LPL、ATGL、HSL、DGAT1、DGAT2、AGPAT6、GPAM和ADRP的表达极显著下调(P0.05)。(3)靶标基因KLF3对山羊肌内脂肪细胞分化的影响克隆得到长度为1038 bp的山羊KLF3 CDS区序列,编码了345个氨基酸;KLF3在山羊各组织中广泛表达,且在脂肪组织中的表达最高。干扰KLF3后山羊肌内脂肪细胞内的脂滴积聚减少,a P2、CEBPα、CEBPβ、PPARγ、LPL、ATGL、TIP47、GPAM、ADRP、KLF2、KLF4、KLF5、KLF6、KLF8和KLF13的表达水平极显著降低(P<0.01),HSL、KLF1、KLF7和KLF16的m RNA水平极显著升高(P<0.01),KLF12表达显著升高(P<0.05);过表达KLF3后山羊肌内脂肪细胞中脂滴积聚增多,CEBPβ、PPARγ、SREBP1、ACC、FASN、LPL、ATGL、DGAT1、DGAT2、AGPAT6、TIP47、GPAM、ADRP、KLF2、KLF4、KLF5、KLF6、KLF7、KLF8、KLF9、KLF10、KLF11、KLF12、KLF13、KLF14、KLF16和KLF17的表达水平显著升高(P<0.01),KLF1的相对表达水平极显著下调(P<0.01)。以上结果表明,m

关键词：山羊 miR-130b-3p miR-130b-5p KLF3 肌内脂肪细胞分化