检索结果-南通市图书馆

重组耻垢分枝杆菌联合抗痨药物对鼠结核病治疗作用的探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重庆医科大学学报 2009年第5期34卷 516-520页

作者：杨晓燕杨春何永林徐蕾重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:探讨携带编码人天然颗粒溶素(Granulysin,GLS)和小鼠IL-12基因的重组耻垢分枝杆菌(***,MS)与抗痨药物对结核分枝杆菌感染的协同治疗效果。方法:将结核分枝杆菌H37Rv感染的Balb/c小鼠40只随机分成4组。感染4周后分别用生理盐水、重... 详细信息

目的:探讨携带编码人天然颗粒溶素(Granulysin,GLS)和小鼠IL-12基因的重组耻垢分枝杆菌(***,MS)与抗痨药物对结核分枝杆菌感染的协同治疗效果。方法:将结核分枝杆菌H37Rv感染的Balb/c小鼠40只随机分成4组。感染4周后分别用生理盐水、重组MS、INH+PZA和重组MS联合INH+PZA治疗,于第一次治疗后3个月,处死小鼠,检测器官荷菌量、脾淋巴细胞IFN-γ和TNF-α的分泌水平、血清IL-12和IFN-γ和肺、脾组织中GLS表达,同时观察小鼠肺、脾组织病理改变情况。结果:重组MS联合INH+PZA治疗组肺、脾组织荷菌量(lgCFU/g)比重组MS和INH+PZA治疗组显著降低;重组MS和INH+PZA治疗组肺、脾组织荷菌量比生理盐水组显著降低。重组MS组经PPD刺激后IFN-γ和TNF-α分泌水平明显高于其它组。重组MS联合INH+PZA治疗组和重组MS组血清IL-12和IFN-γ水平明显高于生理盐水组。重组MS和INH+PZA组病变轻且局限,生理盐水组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛。重组MS联合INH+PZA治疗组肺组织病变最轻。结论:GLS/IL-12重组MS对小鼠结核病有一定免疫治疗作用;重组MS联合临床常用的抗痨药可增强抗结核病的疗效。

关键词：颗粒溶素 IL-12 重组MS 结核病抗痨药

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

锌依赖的金属蛋白酶1促进巨噬细胞凋亡

细胞与分子免疫学杂志 2015年第12期31卷 1585-1587,1592页

作者：李鹏何永林张继明方陈城重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW2... 详细信息

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW264.7细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测zmp1 mRNA的水平;藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测Zmp1蛋白对细胞凋亡影响。结果扩增出zmp1基因;真核表达质粒经过XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切及基因测序鉴定构建成功;转染细胞24 h后,经荧光倒置显微镜观察到绿色荧光;qRT-PCR结果显示转染p EGFP-N1-zmp1的RAW264.7细胞zmp1 mRNA的表达显著升高;转染后48 h,细胞早期凋亡率有所增加。结论在RAW264.7细胞中成功表达了Zmp1并能促进巨噬细胞凋亡。

关键词：卡介苗锌依赖的金属蛋白酶1(Zmp1) 真核表达 RAW264.7细胞细胞凋亡

腹腔镜左半肝切除术治疗有腹部手术史的肝胆管结石患者疗效的倾向性评分匹配分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国普通外科杂志 2022年第2期31卷 168-175页

作者：刘林何永林周禄科谢辉四川省德阳市人民医院肝胆胰外科四川德阳618000

背景与目的:肝切除术是治疗肝胆管结石的重要方法,近年来腹腔镜肝脏切除的应用取得了长足进步。腹腔镜手术较开腹手术具有创伤小、恢复快及住院时间短等优点,但腹腔镜左半肝切除术在有腹部手术史的肝胆管结石患者中应用的临床研究较少... 详细信息

背景与目的:肝切除术是治疗肝胆管结石的重要方法,近年来腹腔镜肝脏切除的应用取得了长足进步。腹腔镜手术较开腹手术具有创伤小、恢复快及住院时间短等优点,但腹腔镜左半肝切除术在有腹部手术史的肝胆管结石患者中应用的临床研究较少。本研究通过回顾性分析,探讨腹腔镜左半肝切除术在有腹部手术史的肝胆管结石患者中的临床应用价值。方法:回顾性分析2017年1月—2020年12月四川省德阳市人民医院行腹腔镜左半肝切除术治疗的172例肝胆管结石患者的临床资料,使用倾向性评分匹配法(PSM)对有腹部手术史患者(观察组)和无腹部手术史患者(对照组)进行1∶1匹配。比较两组患者的相关临床指标以及随访情况。结果:匹配后,两组各43例,基线资料均衡可比。与对照组比较,观察组手术时间明显延长(225 min vs.252 min,P0.05);两组术后第1天肝功能指标及C反应蛋白水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。随访中位时间为21 (3~48)个月,两组的结石清除与复发情况差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:腹腔镜左半肝切除术在有腹部手术史的肝胆管结石患者中的应用是安全、可行、有效的,虽然由于术中粘连分解的手术步骤而致手术时间延长,但并不增加其他方面的不良影响。

关键词：胆石症肝切除术腹腔镜倾向性评分

维普期刊数据库博看期刊

结核分枝杆菌PPE68蛋白的表达、鉴定及抗血清的制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2011年第9期27卷 803-806页

作者：佘茜徐蕾何永林靳志栋张丹杨春重庆医科大学病原生物学教研室神经科学研究中心重庆神经生物学重点实验室 400016

目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,鉴定并纯化重组rPPE68蛋白后免疫新西兰大白兔,制备兔抗PPE68多克隆抗体。方法将已经过鉴定的重组原核表达质粒pET32a(+)-PPE68转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导大量表达PPE68蛋白。对表达蛋... 详细信息

目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,鉴定并纯化重组rPPE68蛋白后免疫新西兰大白兔,制备兔抗PPE68多克隆抗体。方法将已经过鉴定的重组原核表达质粒pET32a(+)-PPE68转化至大肠杆菌BL21中,IPTG诱导大量表达PPE68蛋白。对表达蛋白进行鉴定后利用亲和层析法进行纯化。以纯化后重组rPPE68为免疫抗原,与弗氏不完全佐剂等体积混合,采用皮下多点注射法免疫新西兰大白兔,于第3次免疫后的第7天采血。用凝集实验与Western-blot检测抗血清的特异性,并用双向免疫扩散法测定抗血清效价。结果在大肠杆菌中表达的目的产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量57 000处可见特异性条带,免疫印迹分析证实表达的目的蛋白可与结核分枝杆菌H37Rv株感染小鼠的血清发生反应。纯化的rPPE68蛋白免疫新西兰大白兔后,凝集反应与Western-blot证实了抗血清的特异性,双向免疫扩散法测得血清效价为1∶16。结论已成功表达结核分枝杆菌PPE68蛋白,制备了特异性兔抗PPE68多克隆抗体,对结核病的早期诊断提供了一种新的思路。

关键词：结核分枝杆菌 PPE68 原核表达抗血清

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人颗粒溶素活性肽重组卡介苗的构建与表达

重庆医学 2010年第15期39卷 1965-1967页

作者：张黎杨春何永林李娜徐蕾帖儒修重庆医科大学附属第一医院眼科 400016 重庆医科大学神经科学研究中心 400016

目的构建携带人颗粒溶素(GLS)活性肽的重组卡介苗(BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法以分子生物学方法构建携带GLS活性肽基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBMS,以电转化方式将pBMS质粒转入BCG构建重组B... 详细信息

目的构建携带人颗粒溶素(GLS)活性肽的重组卡介苗(BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法以分子生物学方法构建携带GLS活性肽基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBMS,以电转化方式将pBMS质粒转入BCG构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定重组菌;将重组菌感染巨噬细胞,通过RT-PCR了解重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。结果采用电转化方式可将pBMS导入BCG,抽提质粒鉴定出与GLS基因相符的目的条带。以该重组BCG感染小鼠巨噬细胞,96h后用RT-PCR法可扩增出相应的基因条带。结论成功构建含pBMS的重组BCG。该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带基因。

关键词：颗粒溶素重组卡介苗真核表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

10K单级脉管制冷机性能研究

稀有金属材料与工程 2008年第A4期37卷 408-411页

作者：甘智华董文庆邱利民孙贺何永林浙江大学浙江杭州310027

20K温区大功率低温制冷机在超导体冷却、液氢无损贮存和低温泵等方面有着广阔的应用前景。为了探索单级脉管制冷机的极限制冷温度同时提高脉管制冷机在20K温区的制冷量,本文开展了计算模拟和实验研究。回热器模拟软件REGEN3.2的模拟结... 详细信息

20K温区大功率低温制冷机在超导体冷却、液氢无损贮存和低温泵等方面有着广阔的应用前景。为了探索单级脉管制冷机的极限制冷温度同时提高脉管制冷机在20K温区的制冷量,本文开展了计算模拟和实验研究。回热器模拟软件REGEN3.2的模拟结果显示,在不同的冷端质量流量下,单级脉管制冷机所能达到的最低制冷温度均为9.5K。在此基础上,本文设计了一台单级脉管制冷机,对回热器冷端10～80K温区的回热材料作了进一步优化。采用由不锈钢丝网、铅丸和稀土磁性蓄冷材料Er3Ni构成的复合式回热器,该单级脉管制冷机获得了10.9K的最低制冷温度,这是目前公开报道的单级脉管制冷机最低制冷温度。该制冷机在20.9K可获得20W的制冷量或在29.9K可获得40W的制冷量,输入功率为7.5kW。

关键词：脉管制冷机回热器 REGEN3.2

结核分枝杆菌Zmp1基因原核表达载体的构建及表达鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2014年第6期30卷 573-575,580页

作者：张继明杨春何永林穆柳青张春燕樊宇徐蕾重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建结核分枝杆菌锌离子依赖的金属蛋白酶1(Zmp1)基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增Zmp1基因;定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒pET... 详细信息

目的构建结核分枝杆菌锌离子依赖的金属蛋白酶1(Zmp1)基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增Zmp1基因;定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-Zmp1;转化入大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot法鉴定。结果PCR法扩增出Zmp1基因;重组表达质粒经双酶切及基因测序鉴定构建正确;表达的重组Zmp1融合蛋白相对分子质量(Mr)约为94 000,大小与预期融合蛋白一致;重组Zmp1融合蛋白可与His标签单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了Zmp1基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得重组Zmp1融合蛋白表达。

关键词：结核分枝杆菌 Zmp1 原核表达

重组耻垢分枝杆菌与微卡在鼠结核病免疫治疗作用中的比较

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2009年第6期25卷 685-688页

作者：杨春何永林徐蕾张黎伊正君李娜王渝伟朱道银重庆医科大学病原生物学教研室重庆医科大学神经科学研究中心重庆医科大学免疫学教研室

目的比较颗粒溶素/白介素-12重组耻垢分枝杆菌(rMS)和微卡作为免疫治疗佐剂在鼠结核病治疗中的效果及机制。方法结核分枝杆菌H37Rv感染Balb/c小鼠4周后,分别用生理盐水、耻垢分枝杆菌(MS)、rMS、INH+PZA,rMS+INH+PZA、微卡+INH+PZA治疗6... 详细信息

目的比较颗粒溶素/白介素-12重组耻垢分枝杆菌(rMS)和微卡作为免疫治疗佐剂在鼠结核病治疗中的效果及机制。方法结核分枝杆菌H37Rv感染Balb/c小鼠4周后,分别用生理盐水、耻垢分枝杆菌(MS)、rMS、INH+PZA,rMS+INH+PZA、微卡+INH+PZA治疗6次,于第1次治疗后3个月处死小鼠,检测器官荷菌量、血清IL-12和IFN-γ分泌水平和肺、脾组织中颗粒溶素表达及观察小鼠肺、脾组织病理改变情况。结果rMS+INH+PZA器官荷菌量明显低于微卡+INH+PZA、rMS和INH+PZA药物组;血清IL-12水平rMS+INH+PZA和单纯rMS组明显高于微卡+INH+PZA和INH+PZA组;IFN-γ分泌水平rMS+INH+PZA、单纯rMS组和微卡+INH+PZA明显高于单纯的药物组;用免疫组化检测到单纯rMS组和rMS+INH+PZA组在肺脾组织中颗粒溶素的表达;rMS+INH+PZA、微卡+INH+PZA、单纯rMS组和INH+PZA组肺组织病变轻且局限,生理盐水组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛,正常肺泡结构被破坏。结论rMS和微卡对小鼠结核病有一定免疫治疗作用,rMS通过增强宿主Th1型免疫应答和GLS的抗菌活性有关,而微卡主要通过调节免疫应答发挥作用;rMS对临床常用的抗结核药协同作用优于微卡,为结核病的综合治疗打下实验基础。

关键词：耻垢分枝杆菌微卡免疫治疗结核病

小鼠巨噬细胞Ipr1基因真核表达载体的构建及表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2008年第3期24卷 216-219页

作者：李娜朱道银何永林张黎重庆医科大学免疫学教研室重庆400016

目的构建小鼠Ipr1(intracellular pathogen resistance 1)基因真核表达载体。方法从C57BL/6J小鼠胸腺组织提取总RNA,以RT-PCR法调取Ipr1基因编码序列,克隆至pMD19-Tsimple载体中,转化大肠杆菌JM109,筛选的阳性克隆作PCR及酶切鉴定后测... 详细信息

目的构建小鼠Ipr1(intracellular pathogen resistance 1)基因真核表达载体。方法从C57BL/6J小鼠胸腺组织提取总RNA,以RT-PCR法调取Ipr1基因编码序列,克隆至pMD19-Tsimple载体中,转化大肠杆菌JM109,筛选的阳性克隆作PCR及酶切鉴定后测序分析。其中的突变碱基经点突变修复后将Ipr1基因亚克隆于原核真核双系统表达质粒pQE-TriSystem中得到pQE-TriSystem-Ipr1,用脂质体瞬时转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,RT-PCR鉴定Ipr1基因的表达。结果从C57BL/6J小鼠胸腺组织内扩增出大小为1338bp片段。阳性克隆测序鉴定发现一个点突变,经点突变修复后与GenBank报道的Ipr1基因序列一致。亚克隆获得重组质粒pQE-TriSystem-Ipr1,转染RAW264.7细胞经RT-PCR扩增出Ipr1基因相应大小的DNA片段。结论成功调取小鼠Ipr1基因并成功构建含Ipr1基因的真核表达载体,为进一步研究Ipr1基因的功能奠定基础。

关键词： Ipr1 结核病真核表达载体 pQE-TriSystem