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长耳珠母贝核rRNA基因ITS-2序列分析

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热带海洋学报 2004年第5期23卷 81-84页

作者：何毛贤黄良民中国科学院南海海洋研究所广东广州510301

以相应引物聚合酶链式反应(PCR)扩增长耳珠母贝(Pinctadachemnitzi)核核糖体RNA基因第2转录间隔区(ITS 2),PCR产物大小约500bp,经克隆、测序,所得序列包含5.8S和28SrRNA基因部分序列和ITS 2全序列,4种碱基含量分别为27.11%(A)、24.95%(G... 详细信息

以相应引物聚合酶链式反应(PCR)扩增长耳珠母贝(Pinctadachemnitzi)核核糖体RNA基因第2转录间隔区(ITS 2),PCR产物大小约500bp,经克隆、测序,所得序列包含5.8S和28SrRNA基因部分序列和ITS 2全序列,4种碱基含量分别为27.11%(A)、24.95%(G)、21.26%(T)和26.68%(C)。5个克隆的DNA序列差异为0.0%—0.4%,不存在个体内变异。对其潜在应用进行了讨论。

关键词：长耳珠母贝 ITS-2 序列分析

马氏珠母贝IGF2BP1基因的鉴定及对矿化相关基因表达的影响

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水产学报 2022年第12期46卷 2265-2273页

作者：熊盼盼张华何毛贤中国科学院南海海洋研究所中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室广东省应用海洋生物学重点实验室南方海洋科学与工程广东省实验室中国科学院大学

为了研究胰岛素样生长因子2结合蛋白(IGF2BPs)基因是否参与珍珠贝的生物矿化，本实验鉴定了一个马氏珠母贝IGF2BP1基因，命名为PfIGF2BP1-1，该基因cDNA全长为7 348 bp,ORF长1 818 bp，编码605个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明，... 详细信息

为了研究胰岛素样生长因子2结合蛋白(IGF2BPs)基因是否参与珍珠贝的生物矿化，本实验鉴定了一个马氏珠母贝IGF2BP1基因，命名为PfIGF2BP1-1，该基因cDNA全长为7 348 bp,ORF长1 818 bp，编码605个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明，PfIGF2BP1-1有2个RRM结构域和4个KH结构域，与其他物种来源的IGF2BPs同源。实时荧光定量PCR结果显示，PfIGF2BP1-1在马氏珠母贝的8个组织中均有表达，在闭壳肌组织中表达量最高，其次为足和外套膜组织。利用pET-32a原核表达载体构建了含有PfIGF2BP1-1成熟多肽区的重组质粒并成功表达蛋白。在IPTG浓度为0.5 mmol/L,37℃培养8 h的条件下诱导表达PfIGF2BP1-1蛋白最佳。PfIGF2BP1-1蛋白刺激马氏珠母贝外套膜原代细胞，引起壳基质蛋白基因Accbp、MSI7、Nacrein的表达水平显著上升，表明PfIGF2BP1-1蛋白可诱导壳矿化相关基因的表达，参与马氏珠母贝的生物矿化过程。

关键词：马氏珠母贝胰岛素样生长因子2结合蛋白1 蛋白表达壳矿化相关基因

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鱼类免疫促进剂研究进展

海洋科学 2006年第7期30卷 86-90页

作者：姜因萍吴后波何毛贤中国科学院南海海洋研究所LED实验室广东广州510301

免疫促进剂主要是促进鱼的机体免疫应答反应，它包括非特异性和特异性免疫二种，但免疫促进剂更多地增强非特异性免疫机制，它主要通过活化鱼自身的免疫机能从而达到防御效果，具有作用广泛、安全性高等特点。免疫促进剂可激活鱼的嗜中... 详细信息

免疫促进剂主要是促进鱼的机体免疫应答反应，它包括非特异性和特异性免疫二种，但免疫促进剂更多地增强非特异性免疫机制，它主要通过活化鱼自身的免疫机能从而达到防御效果，具有作用广泛、安全性高等特点。免疫促进剂可激活鱼的嗜中性粒细胞及吞噬细胞的吞噬作用、杀伤作用、趋化作用，激活淋巴细胞并使其分泌淋巴因子以协调体液免疫和细胞免疫，并刺激抗体产生和补体生成等。巨噬细胞的主要功能包括分解各种异物并与之相互作用、刺激和增进淋巴细胞的免疫活性，作为免疫应答的调节者，在各种刺激的作用下，巨噬细胞的形态、生化和功能上发生一系列较大的改变，从而使其吞噬能力、粘附能力、扩散能力及抗微生物和细胞毒等能力都有明显的增强。[第一段]

关键词：免疫促进剂鱼类免疫应答反应扩散能力嗜中性粒细胞非特异性吞噬作用淋巴细胞巨噬细胞特异性免疫

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马氏珠母贝选育系遗传变异的AFLP分析

高技术通讯 2006年第5期16卷 534-538页

作者：史兼华何毛贤黄良民袁涛中国科学院南海海洋研究所广东省/中国科学院应用海洋生物学重点实验室广州510301

利用AFLP技术对马氏珠母贝两个选育系DDS-G1和JCS-G1及大亚湾养殖群体（DDC）进行了遗传变异分析.5对选择性扩增引物共扩增谱带265条,DDC的多态位点比率为79.25%,DDS-G1为73.58%,JCS-G1为75.85%.两个选育系的单态位点明显增加,而Shannon... 详细信息

利用AFLP技术对马氏珠母贝两个选育系DDS-G1和JCS-G1及大亚湾养殖群体（DDC）进行了遗传变异分析.5对选择性扩增引物共扩增谱带265条,DDC的多态位点比率为79.25%,DDS-G1为73.58%,JCS-G1为75.85%.两个选育系的单态位点明显增加,而Shannon＇s遗传多样性指数和Nei＇s基因多样性有所下降.三个组间的遗传距离为0.1615～0.2744,两个选育系间的遗传距离较大.研究结果表明,经过一代的选择,马氏珠母贝选育系的遗传结构和遗传多样性已发生改变,AFLP标记能够有效地监测选育系的遗传变异.

关键词：马氏珠母贝 AFLP 遗传变异选择

合浦珠母贝实时定量PCR内参基因的稳定性比较

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南方水产科学 2013年第6期9卷 33-40页

作者：王琦何毛贤中国科学院大学北京100039 中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室广东广州510301

以合浦珠母贝(Pinctada fucata)为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术检测了甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、β-肌动蛋白(β-actin)和18S核糖体rRNA(18S rRNA)3个管家基因在合浦珠母贝不同组织、性腺发育时期、胚胎发育时期mRNA水平的表达... 详细信息

以合浦珠母贝(Pinctada fucata)为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术检测了甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、β-肌动蛋白(β-actin)和18S核糖体rRNA(18S rRNA)3个管家基因在合浦珠母贝不同组织、性腺发育时期、胚胎发育时期mRNA水平的表达情况。同时比较了BestKeeper、geNorm和NormFinde软件对试验数据处理的差异,从中选出合适的内参基因。结果表明β-actin在不同组织和胚胎发育不同阶段表达最稳定,18S rRNA在性腺发育不同时期表达最稳定。

关键词：合浦珠母贝 qPCR 内参基因稳定性分析

生长激素与胰岛素样生长因子-Ⅰ对马氏珠母贝壳生长形成相关基因表达的影响

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热带海洋学报 2012年第2期31卷 96-101页

作者：张立娟何毛贤中国科学院南海海洋研究所中国科学院海洋生物资源可持续利用重点实验室广东广州510301 中国科学院研究生院北京100049

研究了外源生长激素与胰岛素样生长因子-Ⅰ处理对马氏珠母贝Pinctada fucata Gould胰岛素相关多肽受体基因(irr)和5种壳基质蛋白基因(nacrein、efcbp、n19、aspein及accbp)表达水平的影响。结果表明,激素处理显著提高了irr基因的表达水... 详细信息

研究了外源生长激素与胰岛素样生长因子-Ⅰ处理对马氏珠母贝Pinctada fucata Gould胰岛素相关多肽受体基因(irr)和5种壳基质蛋白基因(nacrein、efcbp、n19、aspein及accbp)表达水平的影响。结果表明,激素处理显著提高了irr基因的表达水平(P0.05)。

关键词：生长激素胰岛素样生长因子-Ⅰ 胰岛素相关多肽受体壳基质蛋白基因表达马氏珠母贝

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海产经济贝类壳色多态性的研究进展

海洋通报 2009年第1期28卷 108-114页

作者：管云雁何毛贤中国科学院南海海洋研究所 LMBLAMB广东广州510301 中国科学院研究生院北京100039

海产贝类的贝壳颜色是一个对生产、育种有重要意义的可遗传性状。滨螺、海湾扇贝、皱纹盘鲍、牡蛎、蛤类及珍珠贝等贝类的壳色多态性的遗传研究及壳色选择育种的角度综述了目前海产贝类壳色性状遗传机制的研究进展及壳色多态性在育种中... 详细信息

海产贝类的贝壳颜色是一个对生产、育种有重要意义的可遗传性状。滨螺、海湾扇贝、皱纹盘鲍、牡蛎、蛤类及珍珠贝等贝类的壳色多态性的遗传研究及壳色选择育种的角度综述了目前海产贝类壳色性状遗传机制的研究进展及壳色多态性在育种中的应用,为进一步开展壳色遗传机制和选择育种研究提供理论基础。

关键词：海产贝类壳色多态性壳色变异选育

双壳纲动物核糖体RNA 185-ITS1序列及其在分子系统发育研究中的应用

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遗传 2004年第3期26卷 319-324页

作者：丁小雷何毛贤邓凤姣张锡元武汉大学生命科学学院动物发育与遗传实验室武汉430072 中国科学院南海海洋研究所广州510301

测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明,该序列在种间存在很高的多态性,长度从558bp到784bp不等,碱基差异百分比在10.7％～61.7％之间,ITS1序列同源性很低,有片段的插入与缺失。种间18S部分序... 详细信息

测定了双壳纲不同科、属、种及种内共11个个体的核糖体RNA 18S-ITS1序列。结果表明,该序列在种间存在很高的多态性,长度从558bp到784bp不等,碱基差异百分比在10.7％～61.7％之间,ITS1序列同源性很低,有片段的插入与缺失。种间18S部分序列碱基差异百分比在0.9％～23.7％之间,变化主要是碱基的转换。用邻接法(NJ)构建了8个种的18S部分序列(约240bp)的系统发育树,与传统形态学分类结果相符。马氏珠母贝(Pinctada martensi)4个不同地域个体间的序列差异百分比在0.6％～1.9％之间。分析指出:18S基因可以作为双壳纲动物高阶元系统发育的分子标记;ITS1序列种间变化很大,可以应用于该纲物种的分类及鉴别,在亲缘关系相近种及种内变异相对较小,但核苷酸变异位点信息量丰富,可用于属内种间、亚种和群体间的遗传多样性研究。

关键词： ITS1 18S RNA 遗传多样性双壳纲

SRAP标记在马氏珠母贝家系F1代中的分离

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海洋通报 2009年第2期28卷 50-56页

作者：张红玉何毛贤中国科学院南海海洋研究所 LMBLAMB广东广州510301 中国科学院研究生院北京100039

用SRAP(sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)标记首次对马氏珠母贝(Pinctada martensii)红壳家系的亲本及其子一代(F1)进行了遗传分析。7对引物共扩增出63个位点,多态位点比例为68.25%,其中正常位点59个(93.65%),异常位点4个(6.35%)。59个正常位点中,20个位点在F1不分离,39个位点分离。卡方检验表明,39个分离位点中符合孟德尔分离规律的位点28个,占分离位点数的71.79%;偏孟德尔分离规律的位点11个,占分离位点数的28.21%。符合孟德尔分离规律的位点中按1:1分离的位点占25%,3:1分离的位点占75%,1:1分离位点所占比例较小,因此要利用马氏珠母贝家系F1进行SRAP遗传图谱的绘制应适当增加引物数量或改用杂交家系。

关键词：分离方式 SRAP标记马氏珠母贝 F1