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基于靶向代谢组学探讨葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻大鼠粪便短链脂肪酸的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 189-196页

作者：苏钢杨光勇韩雪唐秋梅田维毅王文佳王平涂小华何光志贵州中医药大学基础医学院贵阳550025 清镇市第一人民医院贵州清镇551400

目的:通过靶向代谢组学探究葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻(AAD)粪便短链脂肪酸(SCFAs)代谢的影响。方法:将240只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·kg^(-1... 详细信息

目的:通过靶向代谢组学探究葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻(AAD)粪便短链脂肪酸(SCFAs)代谢的影响。方法:将240只SD大鼠随机分为空白组、模型组、丽珠肠乐组(0.15 g·kg^(-1))、葛根芩连汤高、中、低剂量组(10.08、5.04、2.52 g·kg^(-1)),每组40只(雌雄各半),除空白组外,其余各组每日均给予克林霉素(250 mg·kg^(-1))灌胃造模,连续7 d。造模成功后,各给药组按相应剂量灌胃药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续治疗14 d。分别在药物干预后0、3、7、14 d,从各组中随机抽取8只大鼠,气相色谱-飞行时间质谱法(GC-TOF-MS)对大鼠粪便中SCFAs进行靶向代谢组学分析,运用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)比较不同治疗时间组间代谢轮廓差异,并对大鼠粪便中SCFAs的组间含量变化进行比较。结果:PLS-DA结果显示,空白组与模型组可明显区分,在葛根芩连汤治疗7 d后逐渐趋近于空白组。进一步分析SCFAs组成后发现,与空白组比较,模型组中乙酸的占比增加,丁酸、戊酸、己酸和异戊酸的占比降低;葛根芩连汤治疗后,丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸占比增加,乙酸、丙酸和己酸占比降低。经差异分析显示,葛根芩连汤可明显改善丁酸含量,对戊酸、己酸含量具有一定回调作用。结论:葛根芩连汤中剂量组治疗7 d后可改善AAD粪便短链脂肪酸含量,这可能与改善SCFAs的组成比例及丁酸、戊酸、己酸等含量有关。

关键词：葛根芩连汤抗生素相关性腹泻代谢组学短链脂肪酸丁酸戊酸气相色谱-飞行时间质谱法(GC-TOF-MS)

基于网络药理学和分子对接探讨黄连解毒汤治疗2型糖尿病的作用机制

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华北理工大学学报（医学版） 2024年第3期26卷 169-177页

作者：韩雪唐秋梅苏钢杨光勇田维毅何光志贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025

目的通过网络药理学和分子对接探讨黄连解毒汤治疗2型糖尿病的作用机制。方法首先,根据口服生物利用度和类药性为筛选条件,在TCMSP数据库获取黄连解毒汤的活性成分及对应靶点,运用Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测,合并两... 详细信息

目的通过网络药理学和分子对接探讨黄连解毒汤治疗2型糖尿病的作用机制。方法首先,根据口服生物利用度和类药性为筛选条件,在TCMSP数据库获取黄连解毒汤的活性成分及对应靶点,运用Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测,合并两个数据库所获得的靶点信息,通过UniProt数据库查找对应基因名;其次,在GeneCards、TTD、DrugBank三大数据库中以“type 2 diabetes mellitus”为关键词进行检索,得到疾病靶点;取黄连解毒汤和2型糖尿病的交集靶点、黄连解毒汤的有效成分,利用Cytoscape 3.7.2软件构建成分-靶点网络,并借助STRING数据库对交集靶点进行蛋白相互作用网络分析;然后使用David数据库对交集靶点进行GO富集及KEGG富集分析,最后进行分子对接验证。结果黄连解毒汤有84个有效成分及859个靶点,疾病靶点1 181个,得到310个防治2型糖尿病的潜在作用靶点,72个活性成分,排名前3的有效成分依次为槲皮素、黄芩苷、巴马汀。通过KEGG富集分析筛选出糖尿病并发症中的AGE/RAGE信号通路,分子对接结果显示槲皮素、黄芩苷、巴马汀与核心蛋白受体RAGE对接良好。结论黄连解毒汤可能通过槲皮素、黄芩苷、巴马汀等关键成分调控AGE/RAGE信号通路,从而发挥治疗2型糖尿病的作用。

关键词：黄连解毒汤 2型糖尿病网络药理学分子对接

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基于非靶向液-质联用探究杜仲啤酒的有效成分

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中国食品 2024年第6期 158-161页

作者：王雷唐秋梅黄宝纯刘宇凡杨光勇何光志贵州中医药大学

自啤酒进入我国后,其市场份额呈现爆发式增长,在促进经济增长的同时,也被大多数人接受和喜爱。然而,随着生活节奏日益加快和工作压力持续增长,人们的饮酒率持续上涨,由于过度饮酒导致的消化道疾病、心血管疾病等也日益增加,因此可利用... 详细信息

自啤酒进入我国后,其市场份额呈现爆发式增长,在促进经济增长的同时,也被大多数人接受和喜爱。然而,随着生活节奏日益加快和工作压力持续增长,人们的饮酒率持续上涨,由于过度饮酒导致的消化道疾病、心血管疾病等也日益增加,因此可利用一些具有保健功能的药材,研发出保健型啤酒以替代普通啤酒。中药杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)具有补肝肾、强筋骨、安胎的功效,临床多用于肝肾不足、腰膝酸痛、筋骨无力、头晕目眩等症状。本研究结合中药杜仲的优势和啤酒的特点,利用杜仲研制出保健型啤酒,再利非靶向液-质(LC-MC)联用对杜仲啤酒进行成分鉴定与分析,以期为杜仲啤酒的开发提供一定的实验依据。

关键词：过度饮酒腰膝酸痛消化道疾病心血管疾病饮酒率持续增长靶向肝肾不足

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保和丸对溃疡性结肠炎小鼠肠道内***菌的调节作用

光明中医 2024年第2期39卷 237-240页

作者：游丰锋杨光勇涂小华何亚敏喻良锦李雨彤何光志贵州中医药大学第一临床医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二临床医学院贵州贵阳550025

目的采用实时荧光定量PCR技术检测保和丸对溃疡性结肠炎模型小鼠肠道内Akkermansia muciniphila菌属的调节作用。方法适应性喂养1周后,将小鼠随机分为正常组,模型组,5-氨基水杨酸组,保和丸组。除正常组外,其他组小鼠均以3%葡聚糖硫酸... 详细信息

目的采用实时荧光定量PCR技术检测保和丸对溃疡性结肠炎模型小鼠肠道内Akkermansia muciniphila菌属的调节作用。方法适应性喂养1周后,将小鼠随机分为正常组,模型组,5-氨基水杨酸组,保和丸组。除正常组外,其他组小鼠均以3%葡聚糖硫酸钠溶液灌胃7 d,制备小鼠溃疡性结肠炎模型,造模成功后连续7 d给予药物治疗,收集粪便样本,提取粪便总DNA,用荧光定量PCR方法检测并计算其拷贝数以反映各组***菌变化。结果与正常组比较,保和丸组的***菌拷贝数显著升高,模型组拷贝数较之约升高1倍,5-氨基水杨酸组拷贝数略有降低。结论保和丸明显升高溃疡性结肠炎小鼠肠道中***菌含量,***菌在模型组小鼠肠道中有一定增殖情况,5-氨基水杨酸对***菌基本无作用,或许会抑制其增殖。

关键词：久痢溃疡性结肠炎保和丸中成药疗法

基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响

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河南中医 2024年第4期44卷 549-555页

作者：陈吕张庚鑫韩雪唐秋梅苏钢杨光勇陈瑞何光志贵州中医药大学贵州贵阳550025 德江县人民医院贵州德江565200

目的:基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响。方法:从36只SD大鼠中随机选取6只作为对照组,其余大鼠给予高脂饲料联合1%链脲佐菌素(30 mg·kg^(-1))建立糖尿病... 详细信息

目的:基于ERIC-PCR技术分析黄连解毒汤对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)大鼠肠道菌群结构及DNA同源性的影响。方法:从36只SD大鼠中随机选取6只作为对照组,其余大鼠给予高脂饲料联合1%链脲佐菌素(30 mg·kg^(-1))建立糖尿病模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量组(6.25 g·kg^(-1))、黄连解毒汤中剂量组(3.13 g·kg^(-1))、黄连解毒汤低剂量组(1.56 g·kg^(-1))及二甲双胍组(100 mg·kg^(-1)),每组各6只。各药物组按照相应剂量灌胃给药,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续21 d。第7天、第14天及第21天灌胃后,收集大鼠粪便,提取肠道菌群DNA。利用ERIC-PCR技术和Sanger测序检测大鼠肠道菌群结构与DNA同源性。结果:灌胃第7天,对照组条带较多集中在100~750 bp;与对照组比较,模型组条带在1 000~2 000 bp的亮度增强,在300~750 bp的亮度减弱;与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在750 bp的亮度增强。灌胃第14天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在1 000 bp以上的亮度减弱。灌胃第21天,与模型组比较,黄连解毒汤各剂量组和二甲双胍组条带在300~750 bp的亮度增强。DNA测序结果显示,灌胃第21天,对照组500 bp条带的优势菌群为拟杆菌属、杜氏邓氏菌和金黄杆菌属;模型组400 bp和1 000 bp条带的优势菌群为梭菌目细菌、普拉梭菌、铜绿假单胞菌和杆菌属。灌胃第7天,黄连解毒汤高剂量组750 bp条带的优势菌群为布劳特菌和拟杆菌属;黄连解毒汤中剂量组200 bp条带的优势菌群为脆弱拟杆菌和拟杆菌属;黄连解毒汤低剂量组1 200 bp条带的优势菌群为双发酵副梭菌;二甲双胍组1 000 bp条带的优势菌群为大肠埃希杆菌。灌胃第14天,黄连解毒汤高剂量组700 bp条带的优势菌群为拟杆菌目细菌和假单胞菌;黄连解毒汤中剂量组550 bp条带的优势菌群为假锁杆菌属和链霉菌属;黄连解毒汤低剂量组350 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、杜氏邓氏菌和杆菌科细菌;二甲双胍组290 bp条带的优势菌群为弗格森埃希菌和大肠埃希杆菌。灌胃第21天,黄连解毒汤高剂量组1 000 bp条带的优势菌群为普雷沃氏菌属;黄连解毒汤中剂量组600 bp条带的优势菌群为Muribaculum gordoncarteri、杜氏邓氏菌和拟杆菌属;二甲双胍组400 bp条带的优势菌属为Muribaculum gordoncarteri、肠杆菌、普雷沃氏菌属、杆菌科细菌和杆菌属。结论:黄连解毒汤对T2DM大鼠的肠道菌群结构具有调节作用,菌群调节效果受药物剂量和治疗时间的影响。

关键词：黄连解毒汤 2型糖尿病肠道菌群结构 ERIC-PCR DNA同源性大鼠

基于肠道微生物—免疫途径探讨葛根芩连汤治疗肠道免疫疾病的研究现状

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齐齐哈尔医学院学报 2024年第12期45卷 1183-1187页

作者：唐秋梅韩雪杨光勇陈瑞王文佳涂小华田维毅何光志贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 德江县人民医院贵州德江565200

成年人肠道微生物占自身微生物的90%,肠道也是人体最大的免疫器官,掌管着人体70%的免疫力,目前,肠道微生物—免疫途径已成为治疗肠道免疫疾病的热点。本文基于以上两个途径综述了葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎、抗生素相关性腹泻、肠道易... 详细信息

成年人肠道微生物占自身微生物的90%,肠道也是人体最大的免疫器官,掌管着人体70%的免疫力,目前,肠道微生物—免疫途径已成为治疗肠道免疫疾病的热点。本文基于以上两个途径综述了葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎、抗生素相关性腹泻、肠道易激综合征、放射性直肠炎作用机制,以冀为葛根芩连汤治疗肠道疾病提供更多理论依据。

关键词：葛根芩连汤肠道微生物肠道免疫肠道疾病

小半夏加茯苓汤及其组分对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾脏caspase-3基因表达的影响

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中华中医药杂志 2014年第3期29卷 868-871页

作者：杨林森何光志何前松冯泳贵阳中医学院贵阳550002

目的:探讨小半夏加茯苓汤(简称XBPF)及其组分对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾脏组织caspase-3基因表达的影响。方法:通过给昆明小鼠接种H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,将60只小鼠分为空白对照组、模型组、多糖组、姜辣素组、XBPF组和顺铂组... 详细信息

目的:探讨小半夏加茯苓汤(简称XBPF)及其组分对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾脏组织caspase-3基因表达的影响。方法:通过给昆明小鼠接种H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,将60只小鼠分为空白对照组、模型组、多糖组、姜辣素组、XBPF组和顺铂组,干预15d后,观察抑瘤率,运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测小鼠脾脏细胞中caspase-3基因的表达情况。结果:与模型组比较,XBPF组具有显著抑瘤作用(P<0.01),而且XBPF组的抑瘤作用强于多糖组和姜辣素组(P<0.05)。与模型组对比,XBPF组小鼠脾脏caspase-3基因的表达明显增多(P<0.01);XBPF组caspase-3基因的表达比多糖组和姜辣素组增多(P<0.05)。结论:XBPF对H22荷瘤小鼠肿瘤生长具有明显抑制作用,其机制可能与增强凋亡基因caspase-3表达有关。

关键词：小半夏加茯苓汤肝癌细胞H22 荷瘤小鼠 caspase-3

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单链抗体的研究进展及其应用

黑龙江畜牧兽医 2015年第7期 76-79页

作者：郭海涛杨光勇何光志贵阳中医学院贵阳550002

单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展。... 详细信息

单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展。相信不久的将来,ScFv将凭借自身的优势,在医学、食品卫生和农业等领域发挥巨大作用。文章综述了Sc Fv的研究进展及其应用。

关键词：单链抗体(Sc Fv) 基因工程抗体单链抗体库展示系统表达应用

八种中药多糖对小鼠巨噬细胞释放细胞因子的影响

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现代免疫学 2011年第6期31卷 495-498页

作者：韩洁岳文鹏何光志田维毅贵阳中医学院微生物与免疫教研室贵阳550002 贵阳中医学院贵阳550002

常规提取黄芪、枸杞、当归、香菇、地黄、蒲公英、板蓝根、柴胡等8味中药的多糖组份,体外与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子的含量,并与巨噬细胞对照组比较,借以观察黄芪等中药的多... 详细信息

常规提取黄芪、枸杞、当归、香菇、地黄、蒲公英、板蓝根、柴胡等8味中药的多糖组份,体外与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子的含量,并与巨噬细胞对照组比较,借以观察黄芪等中药的多糖对巨噬细胞释放细胞因子的影响,探索巨噬细胞甘露糖受体在中药多糖免疫干预效应中的作用。结果表明,黄芪、枸杞、当归、香菇和蒲公英等5味中药多糖组份一定浓度组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8中一个或多个细胞因子水平明显升高(P<0.05或P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01)。提示黄芪等5味中药多糖组分刺激巨噬细胞释放细胞因子是他们干预机体免疫功能的部分机制。

关键词：中药多糖细胞因子巨噬细胞