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调节性T细胞及Foxp3基因在特发性血小板减少性紫癜患儿免疫失调中的作用

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中华儿科杂志 2007年第8期45卷 631-632页

作者：薛俭成伍昌林刘仿南方医科大学附属深圳医院深圳市第二人民医院输血科518035 广东医学院免疫学教研室

特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）是一种儿童常见的出血性自身免疫病，但发病机制尚未完全明了，难以找到真正特异而有效的治疗方法。近年研究发现CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulation T cell，T... 详细信息

特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）是一种儿童常见的出血性自身免疫病，但发病机制尚未完全明了，难以找到真正特异而有效的治疗方法。近年研究发现CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulation T cell，Tr细胞）是维持机体免疫耐受的重要调控者，在自身免疫病中的作用逐渐成为研究的热点。为探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与ITP发生、发展的关系及其临床意义，我们于2005年2月-2006年7月采用流式细胞术和RT—PCR检测了ITP患儿外周血中Tr细胞的数量及相关基因Foxp3的表达。

关键词： CD4^+CD25^+调节性T细胞特发性血小板减少性紫癜 Foxp3基因 ITP患儿免疫失调自身免疫病 Tr细胞 PCR检测

急性ITP患儿外周血CD4^+ CD25^+ T细胞及相关细胞因子的研究

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临床检验杂志 2007年第2期25卷 104-106页

作者：吕学文刘仿伍昌林肖红广东医学院微生物免疫学教研室广东湛江524023 广东医学院附属医院儿科广东湛江524001

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(TR)及相关细胞因子的变化,探讨它们在ITP发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测外周血TR细胞的数量,ELISA法检测血浆中相关细胞因子的含量。结果ITP患儿外周... 详细信息

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(TR)及相关细胞因子的变化,探讨它们在ITP发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测外周血TR细胞的数量,ELISA法检测血浆中相关细胞因子的含量。结果ITP患儿外周血TR细胞的百分率显著低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];ITP患儿血清中IL-10、TGF-β1的含量也显著低于正常对照组[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml;TGF-β1:(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。ITP患儿外周血TR细胞在CD4+细胞中所占比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量均呈正相关(r1=0.54,r2=0.66,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中TR细胞数量的减少及相关细胞因子含量的降低可能与急性ITP患儿的细胞免疫失调有关。

关键词：急性特发性血小板减少性紫癜调节性T细胞 IL-10 TGF-β1

急性特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞蛋白激酶C活性的分析

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中华儿科杂志 2006年第3期44卷 224-227页

作者：刘仿伍昌林肖红陈群广东医学院微生物学免疫学教研室湛江524023

目的探讨急性特发性血小板减少性紫癜(acuteidiopathicthrombocytopenicpurpura,AITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。方法无菌采集35例急性ITP患儿及30例正常儿... 详细信息

目的探讨急性特发性血小板减少性紫癜(acuteidiopathicthrombocytopenicpurpura,AITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。方法无菌采集35例急性ITP患儿及30例正常儿童外周抗凝血,用T淋巴细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,分别用非同位素标记法检测T细胞PKC的活性变化,用流式细胞仪检测T细胞活化标志FasL蛋白的表达,血细胞计数仪计数血小板。结果急性ITP患儿T细胞PKC的总活性与正常儿童相比明显增强[(0.97±0.21)nmol/(***)、(0.55±0.13)nmol/(***),P<0.01],T细胞活化标志FasL蛋白表达与正常儿童比较显著升高[ThFasL:(32.7±3.4)%、(14.7±4.2)%;TcFasL:(17.3±9.7)%、(11.6±8.5)%,P<0.01],并且T细胞PKC的活性变化与ThFasL、TcFasL的表达均呈显著正相关(r1=0.68,r2=0.53,P<0.05),与血小板计数呈显著负相关(r=-0.75,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血PKC活性增强可引起患儿T细胞的活化,活性T细胞增多可导致患儿血小板大量损伤,并引起临床症状,提示PKC信号传导在急性ITP的免疫病理机制中发挥重要作用。

关键词：紫癜,血小板减少性特发性 T淋巴细胞蛋白激酶C 膜糖蛋白类

特发性血小板减少性紫癜患者外周血CD1d^((hi))CD5^+CD19^+调节性B细胞的变化及意义

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临床检验杂志 2013年第3期31卷 181-183页

作者：伍昌林朱奕王前郑磊南方医科大学研究生学院广州510515 深圳市第二人民医院输血科广东深圳518035 南方医科大学附属南方医院广州510515

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)亚群和相关细胞因子的变化及其相关性,探讨Breg在ITP发病机制中的作用。方法选择30例ITP患者,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测... 详细信息

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)亚群和相关细胞因子的变化及其相关性,探讨Breg在ITP发病机制中的作用。方法选择30例ITP患者,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测CD19+B、CD5+CD19+B、CD1d(hi)CD5+CD19+B细胞亚群的比例变化;用ELISA法测定PBMC培养液上清中白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,与同期选择的健康人对照组比较。结果与对照组相比,ITP患者外周血中CD19+B、CD5+CD19+B细胞亚群的比例均升高,而CD1d(hi)CD5+CD19+Breg的比例降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 CD1d(hi)CD5+CD19+Breg及相关细胞因子IL-10的下调可能参与ITP的免疫调节紊乱机制。

关键词：特发性血小板减少性紫癜调节性B细胞白细胞介素-10 转化生长因子

特发性血小板减少性紫癜患儿Th1/Th2、Tc1/Tc2亚群漂移的研究

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中国免疫学杂志 2005年第1期21卷 76-79页

作者：杨小猛刘仿陈群赵丹伍昌林蔡康荣肖红广东医学院微生物学及免疫学教研室湛江524023

目的 :探讨特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿外周血Th/Tc、Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞的平衡状态。方法 :收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血 ,分离纯化得T细胞 ,以PE标记的抗CRTH2单抗和Cy5标记的抗CD4、CD8单抗作双色流式细胞术 ,分析IT... 详细信息

目的 :探讨特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿外周血Th/Tc、Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞的平衡状态。方法 :收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血 ,分离纯化得T细胞 ,以PE标记的抗CRTH2单抗和Cy5标记的抗CD4、CD8单抗作双色流式细胞术 ,分析ITP患儿Th/Tc、Th1/Th2、Tc1/Tc2比例的变化。结果 :ITP患儿外周血T细胞与健康儿童相比 ,Th细胞百分率及Th/Tc比例明显下降 (P 0 0 5 ) ;Th1及Th2细胞百分率明显下降 (P 0 0 5 ) ,Th1/Th2及Tc1/Tc2比例明显升高 (P <0 0 5 )。结论 :ITP患儿外周血存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移 ,Th1及Tc1细胞比例升高 ,呈明显Th1类细胞优势。

关键词：特发性血小板减少性紫癜 Th1/Th2 Tc1/Tc2 CRTH2

Foxp3基因表达与CD4^+CD_(25)^+调节性T细胞在急性特发性血小板减少性紫癜发病中的作用

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实用儿科临床杂志 2007年第3期22卷 188-190页

作者：吕学文刘仿伍昌林广东医学院微生物免疫学教研室广东湛江524023

目的研究Foxp3基因与CD4+CD25+调节性T细胞(Tr细胞)在急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患儿中的表达变化,探讨其在AITP发病机制中的作用。方法流式细胞仪分别检测AITP患儿和正常健康儿童外周血Tr细胞的数量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测... 详细信息

目的研究Foxp3基因与CD4+CD25+调节性T细胞(Tr细胞)在急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患儿中的表达变化,探讨其在AITP发病机制中的作用。方法流式细胞仪分别检测AITP患儿和正常健康儿童外周血Tr细胞的数量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其外周血IL-10、TGF-β水平,RT-PCR检测外周血单个核细胞中转录因子Foxp3 mRNA的表达。结果AITP患儿外周血Tr细胞的数量明显低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05]。相关细胞因子中IL-10、TGF-β水平也明显低于正常对照,[IL-10(29.48±13.69)vs(43.10±14.95)ng/L;TGF-β1(170.04±91.58)vs(254.75±130.41)ng/L,Pa<0.05]。与对照组比较,AITP患儿外周血单个核细胞中转录因子Foxp3 mRNA水平明显降低[(0.74±0.14)%vs(0.34±0.12)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论AITP患儿中Tr细胞数量的减少,相关细胞因子水平减低,Foxp3 mRNA表达降低,可能在AITP发病中起重要作用。

关键词： Foxp3 调节性T细胞紫癜,血小板减少性,特发性,急性

特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞PKC活性检测及临床意义

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临床检验杂志 2006年第1期24卷 26-28页

作者：刘仿伍昌林肖红陈群杨小猛广东医学院微生物免疫学教研室广东湛江524023

目的检测ITP患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化,探讨其与T细胞活化和血小板损伤之间的关系。方法取35例ITP患儿及30例正常儿童外周血,用T细胞富集柱法分离纯化T细胞,分别用非同位素标记法检测T细胞PKC活性,用流式细胞仪检测T细... 详细信息

目的检测ITP患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化,探讨其与T细胞活化和血小板损伤之间的关系。方法取35例ITP患儿及30例正常儿童外周血,用T细胞富集柱法分离纯化T细胞,分别用非同位素标记法检测T细胞PKC活性,用流式细胞仪检测T细胞活化标志FasL的表达,血液分析仪计数血小板。结果ITP患儿T细胞PKC的总活性较正常儿童明显增强(0.97±0.21nmol/min·ml-1vs0.60±0.13nmol/min·ml-1,P<0.05),FasL表达较正常儿童显著升高[(CD4+TFasL:(32.7±3.4)%vs(14.7±4.2)%;CD8+TFasL:(17.3±9.7)%vs(11.6±8.5)%,P<0.05],T细胞PKC的活性变化与FasL的表达呈正相关(r1=0.48,r2=0.33,P<0.05),与血小板计数呈负相关(r=-0.55,P<0.05)。结论ITP患儿外周血T细胞PKC活性增强,T细胞活化,并伴有血小板数量减少,提示PKC信号传导在ITP的发病机制中可能起作用。

关键词：特发性血小板减少性紫癜 T淋巴细胞蛋白激酶C FasL

急性特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞蛋白激酶C活性检测及意义

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检验医学 2006年第5期21卷 481-484页

作者：刘仿伍昌林肖红陈群广东医学院微生物学免疫学教研室广东湛江524023 广东医学院附属医院儿科广东湛江524001

目的研究急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。方法无菌采集40例急性ITP患儿及35名健康儿童外周血,T细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,用非同位素标记法... 详细信息

目的研究急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。方法无菌采集40例急性ITP患儿及35名健康儿童外周血,T细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,用非同位素标记法检测T细胞PKC的活性变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平,血液分析仪计数血小板。结果ITP患儿T细胞PKC的活性为(0.98±0.22)nmol.m in-1.m l-1,与正常健康儿童[(0.53±0.13)nmol.m in-1.m l-1]相比明显增强(P<0.05),T细胞活化标志sIL-2R的表达[(528±124)U/m l]与正常儿童[(296±57)U/m l]比较显著升高(P<0.05),T细胞PKC的活性变化与sIL-2R的表达呈显著正相关(r=0.872 50,P<0.05),与血小板计数呈显著负相关(r=-0.810 67,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血PKC活性增强可能导致T细胞活化,活性T细胞增多可能引起患儿血小板的损伤,提示PKC信号传导在ITP的免疫病理机制中发挥重要作用。

关键词：蛋白激酶C T淋巴细胞可溶性白细胞介素-2受体特发性血小板减少性紫癜

PKC信号传导对ITP患儿T细胞核因子-κB活化的调控研究

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临床儿科杂志 2006年第11期24卷 912-915页

作者：肖红伍昌林刘仿陈群广东医学院附属医院儿科教研室广东湛江524023 广东医学院微生物免疫学教研室

目的探讨蛋白激酶C(PKC)对ITP患儿T细胞核因子-кB(NF-кB)活化的调控作用。方法分别从35例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿及30例健康儿童的外周血中分离出T细胞并分成3组培养,即空白对照组,加入PKC的激活剂PMA的PMA组,同时加入PKC激... 详细信息

目的探讨蛋白激酶C(PKC)对ITP患儿T细胞核因子-кB(NF-кB)活化的调控作用。方法分别从35例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿及30例健康儿童的外周血中分离出T细胞并分成3组培养,即空白对照组,加入PKC的激活剂PMA的PMA组,同时加入PKC激活剂PMA与抑制剂H-7的PMA+H-7组,分别用免疫组化法和Westernblot检测NF-кB和抑制蛋白кB(I-кB)。结果ITP患儿的PMA组NF-кB活化的细胞百分比显著高于空白对照组和正常儿童的PMA组(P<0.05),且I-кB水平显著低于上述两组(P<0.05),而ITP的PMA+H-7组NF-кB活化的细胞百分比显著低于ITP的PMA组,且I-кB水平显著高于该组(P<0.05)。结论ITP患儿T细胞NF-кB的活化可能受PKC信号传导的调控,T淋巴细胞PKC-NF-кB信号传导途径的激活可能是ITP的发病机制之一。

关键词：特发性血小板减少性紫癜蛋白激酶C 核因子-κB