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姜厚朴中和厚朴酚的提取及抑菌效果研究

黑龙江畜牧兽医 2022年第20期 115-120,128页

作者：邬佳莉朱茂银任胜杰侯明鹏申宏利常华项勋段纲云南农业大学动物医学院昆明650201

为了分离姜厚朴中的单体化合物和厚朴酚,并探究其抑菌效果,试验采用高效液相色谱筛选色谱条件,以保留时间、色谱图及标准曲线进行分离物的定性和定量分析;对提取得到的和厚朴酚运用K-B纸片法对9种微生物进行抑菌圈直径的测定,将筛选得... 详细信息

为了分离姜厚朴中的单体化合物和厚朴酚,并探究其抑菌效果,试验采用高效液相色谱筛选色谱条件,以保留时间、色谱图及标准曲线进行分离物的定性和定量分析;对提取得到的和厚朴酚运用K-B纸片法对9种微生物进行抑菌圈直径的测定,将筛选得到的对和厚朴酚敏感的菌株用微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:以60%乙醇为最佳提取溶剂,以乙酸乙酯-石油醚(5∶5,V∶V)为最佳萃取条件,甲醇-0.5%甲酸水(80∶20,V∶V)等度洗脱为最佳色谱收集条件。结合保留时间和色谱图,确定收集物为和厚朴酚单体化合物,绘制的标准曲线方程为Y=1.15×10^(7)X+5.91×10^(4),R^(2)=0.998,线性范围为0.0016~1 mg/mL,计算得到收集的和厚朴酚单体化合物纯度为85.1%。药效学评价和厚朴酚对大肠杆菌、溶血性大肠杆菌、沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯菌无抑制作用,对粪肠球菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用,抑制圈直径分别为(15.00±0.16)mm、(17.00±0.20)mm、(19.00±0.23)mm,MIC、MBC分别为375.00,93.75,187.50μg/mL和750.00,375.00,375.00μg/mL。说明本试验提取得到的单体化合物和厚朴酚对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、无乳链球菌有抑制作用。

关键词：姜厚朴高效液相色谱和厚朴酚抑菌试验萃取条件定性定量分析

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泥鳅粘孢子虫病防治的一例

重庆水产 2015年第4期 48-49页

作者：朱龙任胜杰李永菊苏华东李玲雅西南大学鱼类繁育与健康养殖研究中心重庆荣昌402460 重庆市荣昌区昌元街道办事处农业服务中心重庆荣昌402460

泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus），隶属于鲤形目（Cypriniformes）、鳅科（Cobitidae），在我国各地分布广泛，是一种小型淡水经济鱼类。因其味道鲜美，营养丰富，蛋白质含量较高且脂肪较低，素有“天上的斑鸠，地下的泥鳅”和“水... 详细信息

泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus），隶属于鲤形目（Cypriniformes）、鳅科（Cobitidae），在我国各地分布广泛，是一种小型淡水经济鱼类。因其味道鲜美，营养丰富，蛋白质含量较高且脂肪较低，素有“天上的斑鸠，地下的泥鳅”和“水中人参”之美誉。

关键词：粘孢子虫病泥鳅淡水经济鱼类防治蛋白质含量营养丰富鲤形目脂肪

饲料胆固醇水平对克氏原螯虾生长性能、消化酶活性、抗氧化能力和脂代谢相关基因表达的影响

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动物营养学报 2022年第7期34卷 4630-4641页

作者：田红艳杨成聪张春暖王爱民刘飞杨文平於叶兵任胜杰张武肖盐城工学院海洋与生物工程学院盐城224000 河南科技大学动物科技学院洛阳471023

本试验通过6周的养殖试验研究饲料胆固醇水平对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长性能、体组成、消化酶活性、抗氧化能力和脂代谢相关基因表达的影响。试验配制胆固醇添加水平分别为0(C0)、0.25%(C0.25)、0.50%(C0.50)、0.75%(C0.75)... 详细信息

本试验通过6周的养殖试验研究饲料胆固醇水平对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长性能、体组成、消化酶活性、抗氧化能力和脂代谢相关基因表达的影响。试验配制胆固醇添加水平分别为0(C0)、0.25%(C0.25)、0.50%(C0.50)、0.75%(C0.75)、1.00%(C1.00)的5种等氮试验饲料,饲料中胆固醇实测水平分别为0.06%、0.29%、0.54%、0.81%和1.05%。将225尾克氏原螯虾[初重(4.4±0.1)g]随机分为5组,每组3个重复,每个重复15尾虾。养殖6周后采样进行检测。结果表明:1)随着饲料胆固醇水平从0增加到0.50%,克氏原螯虾增重率和肝胰腺、胃及肠道的脂肪酶活性显著上升(P0.05),但饲料胆固醇水平低于0.50%时,粗脂肪含量显著下降(P<0.05)。2)与血淋巴液中丙二醛(MDA)含量相反,血淋巴液中超氧化物歧化酶(SOD)活性随着饲料胆固醇水平由0增加到0.50%而显著上升(P<0.05),但随着饲料胆固醇水平继续增加而显著下降(P<0.05)。3)与C0组相比,肝胰脏中肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA相对表达量随着饲料胆固醇水平增加而显著下降(P<0.05);肝胰脏中脂肪酸结合蛋白(FABP)与脂肪酸转运蛋白(FATP)mRNA相对表达量在胆固醇添加组显著升高(P<0.05)。由此结果得出,饲料中添加0.50%胆固醇能够促进克氏原螯虾的生长,提高消化组织的脂肪酶活性。饲料中添加胆固醇会抑制脂肪的β-氧化,增加脂肪酸转运,从而影响脂肪代谢,最终增加克氏原螯虾的脂肪沉积。此外,过低或过量的胆固醇均会降低克氏原螯虾血淋巴液的抗氧化能力。综上所述,本试验中克氏原螯虾饲料的胆固醇适宜添加水平为0.50%,此时饲料胆固醇实测水平为0.54%。

关键词：克氏原螯虾胆固醇生长脂代谢抗氧化

果胶高载引起的黄颡鱼绿肝症和肝纤维化与肠道菌群失调的关联

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水生生物学报 2022年第11期46卷 1591-1597页

作者：姚仕彬任胜杰蔡春芳曹霞敏吴萍叶元土姜光明丁惠明张铖苏州大学基础医学与生物科学学院苏州215123 江苏省水产动物营养重点实验室苏州215123 苏州市吴中区农业农村局苏州215104 苏州市阳澄湖国家现代农业示范区发展有限公司苏州215138

日粮中黏性膳食纤维果胶较高时可引起黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的绿肝症和肝纤维化,研究旨在探讨肠道菌群在上述病理过程中的潜在作用。分别配制含30%糊精和果胶的对照日粮和高果胶日粮,命名为CON和PEC日粮,再在CON和PEC日粮中添... 详细信息

日粮中黏性膳食纤维果胶较高时可引起黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的绿肝症和肝纤维化,研究旨在探讨肠道菌群在上述病理过程中的潜在作用。分别配制含30%糊精和果胶的对照日粮和高果胶日粮,命名为CON和PEC日粮,再在CON和PEC日粮中添加0.2%的抑菌剂甲硝唑,命名为CONM和PECM日粮。用4种日粮饲养初始体质量为(21.5±3.6)g/尾的黄颡鱼,分别于饲养7d和56d后采样分析。16S rRNA分析结果显示,日粮中添加甲硝唑抑制了梭杆菌门(Fusobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)的细菌,使变形菌门(Proteobacteria)成为第一优势菌,表明甲硝唑发挥了抑菌作用。饲养7d后CON组、CONM组、PEC组和PECM组的绿肝率分别为0、12%、27%和88%,饲养56d后各组鱼肝脏纤维化程度依次增强。甲硝唑显著降低了肠道内容物中胆盐水解酶活力。肝脏中参与胆汁酸合成、转运及调控的基因表达活性与绿肝率及血清中胆汁酸含量不一致。上述结果提示肠道菌群紊乱可能是引起绿肝症和肝纤维化的重要原因,胆汁酸可能介导了此病理过程。

关键词：果胶肠道菌群胆盐水解酶胆汁酸黄颡鱼

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饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响

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动物营养学报 2016年第8期28卷 2423-2430页

作者：郑宗林曾本和向枭周兴华陈建吕光俊朱成科李代金任胜杰西南大学荣昌校区水产系淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室水产科学重庆市市级重点实验室重庆402460 西藏自治区农牧科学院水产研究所拉萨850000

本试验旨在探索饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响。以360尾健康、平均体重为（12.74±0.14）g的齐口裂腹鱼幼鱼为试验对象,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组试验鱼分别投喂添加0（对照... 详细信息

本试验旨在探索饲料中胆汁酸添加水平对齐口裂腹鱼幼鱼生长性能、形体指标及体成分的影响。以360尾健康、平均体重为（12.74±0.14）g的齐口裂腹鱼幼鱼为试验对象,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾。4组试验鱼分别投喂添加0（对照组）、75、150、300 mg/kg胆汁酸的试验饲料,养殖时间为70 d。结果表明：随着胆汁酸添加水平的增加,齐口裂腹鱼幼鱼的增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、饲料蛋白质效率（PER）均呈先升高后趋于稳定的变化趋势,饲料系数（FCR）则呈先降低后趋于稳定的变化趋势。各胆汁酸添加组的WGR、SGR、PER均显著高于对照组（P〈0.05）,而FCR则显著低于对照组（P〈0.05）。当胆汁酸添加水平为150 mg/kg时,WGR、SGR均达到最大值,分别为226.63%和1.69%/d;当胆汁酸添加水平为300 mg/kg时,PER达到最大值,为1.64%;FCR则在胆汁酸添加水平为75 mg/kg时有最小值,为1.56。通过二次回归分析可知,WGR、SGR、PER和FCR最佳时的胆汁酸添加水平分别为186.83、192.86、166.67和183.33 mg/kg。随着胆汁酸添加水平的增加,齐口裂腹鱼幼鱼的肥满度（CF）呈先升高后趋于稳定的变化趋势,脏体比（VSI）、肝体比（HSI）则呈先降低后趋于稳定的变化趋势。各胆汁酸添加组的CF显著高于对照组（P〈0.05）,而VSI、HSI则显著低于对照组（P〈0.05）。随着胆汁酸添加水平的增加,齐口裂腹鱼全鱼及肌肉粗蛋白质含量呈先升高后趋于稳定的变化趋势,全鱼、肌肉及肝胰脏中粗脂肪含量则呈先降低后趋于稳定的变化趋势,但全鱼及肌肉中水分、粗灰分含量则无显著变化（P〉0.05）。由此得出,饲料中添加胆汁酸能有效地提高齐口裂腹鱼幼鱼的饲料利用率,促进其生长,改善其形体指标,减少其肌肉及肝脏中脂肪的沉积。综合考虑,齐口裂腹鱼饲料中胆汁酸适宜的添加水平为166.67~192.86mg/kg。

关键词：齐口裂腹鱼胆汁酸生长性能形体指标体成分

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泥鳅黏孢子虫病防治一例

科学养鱼 2015年第10期37卷 64-65页

作者：朱龙任胜杰苏华东李玲雅李永菊西南大学鱼类繁育与健康养殖研究中心 402460 重庆市荣昌区昌元街道办事处农业服务中心

黏孢子虫病是一直危害养殖经济鱼类的一种寄生虫病,主要寄生部位为鱼的皮肤、鳃、鳍条和体内的各器官组织。2015年3月重庆荣昌一泥鳅养殖场送来一批得病的泥鳅,经检查确诊为黏孢子虫病,笔者从该病的流行病学、发病机理以及预防治疗等方... 详细信息

黏孢子虫病是一直危害养殖经济鱼类的一种寄生虫病,主要寄生部位为鱼的皮肤、鳃、鳍条和体内的各器官组织。2015年3月重庆荣昌一泥鳅养殖场送来一批得病的泥鳅,经检查确诊为黏孢子虫病,笔者从该病的流行病学、发病机理以及预防治疗等方面进行了分析处理。

关键词：黏孢子虫病寄生部位鳍条荣昌发病机理养殖经济晶体敌百虫孢囊死亡现象瘤状

高速逆流色谱分离黄连生物碱及其抑菌活性初探

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畜牧与兽医 2022年第6期54卷 132-138页

作者：朱茂银项勋邬佳莉任胜杰申宏利侯明鹏段纲黄翠琴常华云南农业大学云南昆明650201 龙岩学院/福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室福建龙岩360012

为了研究黄连生物碱的抑菌活性,采用高速逆流色谱(HSCCC)法分离黄连生物碱,K-B法检测其抑菌活性,测其对敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示:从黄连中分离出黄连碱、掌叶防己碱、小檗碱、表小檗碱,提取率分别为44.... 详细信息

为了研究黄连生物碱的抑菌活性,采用高速逆流色谱(HSCCC)法分离黄连生物碱,K-B法检测其抑菌活性,测其对敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示:从黄连中分离出黄连碱、掌叶防己碱、小檗碱、表小檗碱,提取率分别为44.41%、36.72%、68.54%、18.33%;对金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为10.00、29.50、21.00和12.50 mm;对无乳链球菌分别为11.40、27.50、14.00和15.50 mm;对粪肠球菌、大肠杆菌O157等均无效;黄连碱、表小檗碱对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌的MIC和MBC均分别为136.36、272.73μg/mL;小檗碱对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为62.18、136.36μg/mL,对无乳链球菌的MIC和MBC分别为136.36、272.73μg/mL;掌叶防己碱对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌的MIC和MBC均分别为62.18、136.36μg/mL。结果表明:用HSCCC制备生物碱,省时、方便,4种生物碱对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌作用明显,对其余试验菌无效。

关键词：黄连生物碱高速逆流色谱抑菌活性

《发电厂电气主系统》线上线下“教学—实践—科研”综合课程设计

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中国电力教育 2022年第10期 95-96页

作者：王均张孝远郑金锋张华任胜杰秦建明河南工业大学电气工程学院

本文通过创建“教学—实践—科研”序贯式课程教学方式，形成了以学生为中心的多媒体、多工具、多途径集成式综合课程设计方案，为培养新时代电气工程领域人才提供新模式。《发电厂电气主系统》是一门理论性、实践性相辅相成的电气工程...

本文通过创建“教学—实践—科研”序贯式课程教学方式，形成了以学生为中心的多媒体、多工具、多途径集成式综合课程设计方案，为培养新时代电气工程领域人才提供新模式。《发电厂电气主系统》是一门理论性、实践性相辅相成的电气工程核心课程。传统教学模式依赖于课堂知识讲解，学生所掌握的电气设备知识和电气主接线基本原理与实际工程应用有较大差距，不利于培养学生解决实际工程问题的能力，

关键词：

红嘴鸥TLR7蛋白多克隆抗体制备及在DF-1细胞中的表达特征分析

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中国畜牧兽医 2023年第7期50卷 2865-2875页

作者：任胜杰申宏利项勋代飞燕朱茂银邬佳莉胡志辉段纲常华云南农业大学动物医学院昆明650201

【目的】制备红嘴鸥Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)蛋白多克隆抗体,分析红嘴鸥TLR7蛋白在DF-1细胞中的表达特征,为深入了解红嘴鸥TLR7蛋白功能及作用机制提供材料。【方法】设计引物扩增红嘴鸥TLR 7基因CDS区,并构建其原核表... 详细信息

【目的】制备红嘴鸥Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)蛋白多克隆抗体,分析红嘴鸥TLR7蛋白在DF-1细胞中的表达特征,为深入了解红嘴鸥TLR7蛋白功能及作用机制提供材料。【方法】设计引物扩增红嘴鸥TLR 7基因CDS区,并构建其原核表达载体与真核表达载体。将重组原核表达质粒pET32a-TLR7转化大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞进行重组蛋白体外诱导表达,并对其诱导温度、诱导时间和IPTG浓度进行优化筛选。选用新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测血清抗体价效,利用Western blotting鉴定抗体特异性。将真核表达质粒pcDNA3.1-TLR7转染至DF-1细胞中过表达,利用间接免疫荧光技术检测红嘴鸥TLR7蛋白在转染DF-1细胞后不同时间点的表达特征。【结果】红嘴鸥TLR 7基因CDS区长约1182 bp,双酶切结果显示出2组大小不同的2条片段,分别为5900、1182 bp(原核表达载体)和5428和1182 bp(真核表达载体),测序后表明原核表达载体与真核表达载体构建成功。体外诱导温度为30℃、IPTG终浓度为1.0 mmol/L时培养5 h得到以包涵体形式大量表达的重组蛋白,蛋白大小为63 ku。间接ELISA法检测抗血清效价为1∶256000以上。Western blotting检测结果表明,制备的多克隆抗体具有较好的特异性。间接免疫荧光结果显示,转染DF-1细胞2 h后即可观察到绿色荧光,随着时间增加绿色荧光密度逐渐增加,且绿色荧光大部分聚集在细胞核及周围,少部分散布在细胞质中。【结论】原核表达的红嘴鸥TLR7蛋白具有良好的免疫原性,制备的多克隆抗体具有较高的反应性和特异性,TLR7蛋白可在DF-1细胞中成功表达。

关键词：红嘴鸥 TLR7蛋白多克隆抗体 DF-1细胞表达

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