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作者：任泂第三军医大学

学位级别：硕士

本单位以往研究发现:严重创伤后糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)功能受到严重抑制,使糖皮质激素(glucocorticoid,GC)的抗炎作用受限;而核因子κB(NF-κB)功能显著活化,促进炎性细胞因子产生,因而产生了GR受抑制、NF-κB活... 详细信息

本单位以往研究发现:严重创伤后糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)功能受到严重抑制,使糖皮质激素(glucocorticoid,GC)的抗炎作用受限;而核因子κB(NF-κB)功能显著活化,促进炎性细胞因子产生,因而产生了GR受抑制、NF-κB活化、炎性细胞因子释放增加的级联式放大效应,这与全身性炎症反应综合征(SIRS)的发生发展密切相关,进一步发展可能导致多器官功能不全综合症(MODS)发生。在此过程中,炎性因子释放增加对创伤后继发全身性损害的发生、发展起到了重要作用,如果能够有效控制炎性因子的产生,将会对机体的恢复产生积极作用。已有资料表明,GR和NF-κB都是多种炎性细胞因子的上游核转录因子,它们对炎性因子的产生起着相反的调控作用:GR具有显著的抗炎作用,能够抑制多种炎性因子(如IL-6、TNF-α等)的产生;而NF-κB具有明显的致炎作用,通过抑制NF-κB的活化,能显著抑制炎性因子的表达和释放。JAB1又名c-Jun结合蛋白(c-Jun-activation-domain binding protein 1),是38kD左右的可溶性核蛋白,是COP9信号体(COP9 signalosome regulatory complex)的第5个亚单位。JAB1能与多种蛋白相互作用,是多种蛋白的辅活化子,是一种重要的信号转导分子。国外有文献报道,JAB1是NF-κB的辅活化子,可上调其核转录功能。而本单位新近的研究中,通过酵母双杂交法筛选到多个与GR结合的分子,JAB1便是其中之一。随后又运用体外转录激活报告质粒分析系统对GR的转录激活能力进行了分析,证实JAB1能增强GR的转录激活活性,随着实验中JAB1表达的增强,GR的转录激活活性会显著增加。由此看来,JAB1有可能既是NF-κB的辅活化子,又是GR的辅活化子,但是它在炎症反应中究竟起到何种作用,目前尚未见明确报道。为此,本课题在海外青年学者合作研究项目的资助下,重点观察巨噬细胞低表达JAB1条件下对炎性细胞因子生成的影响,从而阐明JAB1在炎症反应中的作用。 RNA干扰作为抑制特异基因表达的重要手段,可以简单、有效、特异的下调细胞中靶基因的表达,目前已经被广泛用于基因功能的实验研究中。为了探讨细胞受细菌内毒素(LPS)刺激后JAB1的主要功能,本课题以小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7为研究对象,通过RNA干扰抑制JAB1的表达,旨在观察在低表达JAB1条件下,细胞在LPS刺激时炎性细胞因子生成的变化。研究取得了如下结果: 1成功构建重组质粒pPUR/U6-siJAB1 选择小鼠JAB1基因(AF065386),根据siRNA序列选择的一般原则,结合网络信息,选定RNAi作用的靶序列。以靶序列为基础,设计并合成能在细胞内转录形成shRNA的寡核苷酸序列,并在两端引入ApaⅠ和EcoRⅠ酶切位点,寡核苷酸退火形成双链后与ApaⅠ和EcoRⅠ酶切的线性化质粒pPUR/U6定向连接,转化大肠杆菌DH5α。筛选后挑取阳性克隆,抽提的质粒经过酶切和测序鉴定,最终得到正确的重组质粒pPUR/U6-siJAB1。 2低表达JAB1细胞克隆的筛选鉴定通过镜下直接观察和MTT法分析不同浓度嘌呤霉素对正常RAW264.7细胞的影响,最终确定用于转染后筛选的嘌呤霉素浓度为4ug/ml。转染试剂采用脂质体DOTAP,按常规方法操作,分别转染pPUR/U6质粒和pPUR/U6-siJAB1质粒,转染后24h开始加入嘌呤霉素对细胞进行筛选。约4周后得到稳定转染的细胞克隆,在维持嘌呤霉素筛选浓度不变的情况下逐步扩大培养,得到足量的细胞用于后续实验。收集各组细胞,提取总蛋白,用Western blot检测各组细胞的JAB1表达情况,结果显示:对照组与正常组相比,JAB1的表达差异并不显著,而干扰组的JAB1表达明显低于对照组与正常组,其JAB1表达量为正常组的29%,说明构建的JAB1基因干扰质粒在RAW264.7细胞中能够有效的抑制JAB1基因的表达,使JAB1蛋白的表达量显著下降,达到了预期的效果。 3 JAB1低表达细胞在LPS刺激下生长速度和炎性因子的浓度变化用细胞计数的方法观察JAB1低表达细胞和正常细胞的生长情况,我们发现:在常规培养条件下,细胞的生长速度没有明显变化,细胞接种后约24h开始进入对数生长期;使用LPS刺激细胞后,在实验中的24h、48h和72h三个时相点均观察到JAB1低表达细胞的数量明显高于正常细胞数量,JAB1低表达细胞在24h后开始进入对数生长期,而正常细胞在此时的生长仍然受到明显的抑制,在48h后才进入对数生长期。说明JAB1低表达细胞对LPS刺激的耐受性较正常细胞高。 ELISA检测LPS刺激后不同细胞培养上清中炎性因子TN

关键词： JAB1 RNA干扰巨噬细胞炎性因子 TNF-α IL-6

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预缺氧的保护作用

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中华临床医药杂志（北京） 2003年第3期4卷 47-50页

作者：任泂第三军医大学全军复合伤研究所 400038

缺氧预处理(hypoxic preconditioning,HPC)是随着1986年Murry等根据犬的心肌缺血-再灌注实验提出的缺血预处理(ischemia preconditioning,IPC)现象[1]后在研究中发现的,它是近年来人们研究较多的问题之,也称为预缺氧.

关键词：预缺氧保护作用缺氧预处理心肌缺血再灌注损伤

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CBL结合TBL在防原医学教学中的应用

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重庆医学 2015年第32期44卷 4599-4601页

作者：郝玉徽任泂黄嘉伟刘晶李蓉第三军医大学军事预防医学院复合伤研究所重庆400038

当今社会核威胁依然存在,并且核事故可能就在身边。作为专门研究核辐射所致伤害及其防护的学科,防原医学逐渐受到人们的重视。防原医学所涉及的核武器损伤的医学防护能力及平时核事件的医学处置技术,对于即将从事国防卫生事业的军校学员... 详细信息

当今社会核威胁依然存在,并且核事故可能就在身边。作为专门研究核辐射所致伤害及其防护的学科,防原医学逐渐受到人们的重视。防原医学所涉及的核武器损伤的医学防护能力及平时核事件的医学处置技术,对于即将从事国防卫生事业的军校学员,显得尤为重要。防原医学是在学员学习了基础医学和临床医学课程之后,专门为大四学员开设的课程。该学科理论性强,教学内容庞杂,知识更新速度快,同时又与许多学科之间有着广泛的交叉,

关键词：防原医学 CBL TBL 军校学员教学效果核武器损伤临床医学课程处置技术知识的理解核事故

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便携式γ能谱仪快速鉴定低放射性活度贫铀

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中华放射医学与防护杂志 2015年第3期35卷 217-221页

作者：俞涛刘晶任泂郝玉徽李蓉第三军医大学军事预防医学院复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市纳米医药工程技术研究中心重庆400038

目的探索便携式γ能谱仪快速鉴定低放射性活度贫铀可行性和所需的基本条件.方法取5 g贫铀样品,使用高纯锗γ能谱仪进行分析,鉴定核素种类,计算核素百分含量.运用便携式γ能谱仪,对同一批次样品鉴定,样品质量为1 g,模拟战、现场条件,... 详细信息

目的探索便携式γ能谱仪快速鉴定低放射性活度贫铀可行性和所需的基本条件.方法取5 g贫铀样品,使用高纯锗γ能谱仪进行分析,鉴定核素种类,计算核素百分含量.运用便携式γ能谱仪,对同一批次样品鉴定,样品质量为1 g,模拟战、现场条件,按不同比例加入0～5g普通泥土,密封,测量距离为1 ～5 cm,能谱采集时间为1～ 10 min,结果以样品中238U、235U核素活度表示,将其换算成比活度,计算235U在铀同位素中的百分含量,若小于0.718％,则确定为贫铀.结果便携式γ能谱仪检测出238U的条件是样品质量≥0.5g,测量距离0.5 ～5 cm;但检测出235U的条件必须是质量≥1 g,测量距离≤1 cm.在可同时检测出238U与235U时,经计算235U百分含量均小于0.718％,判定为贫铀样品.结论便携式γ能谱仪可快速对低放射性活度贫铀获得能谱,鉴定核素种类,结论与高纯锗能谱仪、α谱仪和ICP-MS一致.

关键词：便携式γ能谱贫铀鉴定

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预缺氧对急性放射小鼠存活和染色体损伤的影响

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高原医学杂志 2002年第4期12卷 1-3页

作者：任泂高京生第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所 400038

目的 :观察间歇性预缺氧对急性放射小鼠的存活和染色体损伤的影响 ;方法 :实验动物随机分为 5组 ,按不同时间进行间歇性预缺氧后予以 6Gy的60 COγ射线照射 ,照后 2 1小时取部分小鼠的股骨骨髓观察其染色体畸变率和微核细胞形成率 ,并... 详细信息

目的 :观察间歇性预缺氧对急性放射小鼠的存活和染色体损伤的影响 ;方法 :实验动物随机分为 5组 ,按不同时间进行间歇性预缺氧后予以 6Gy的60 COγ射线照射 ,照后 2 1小时取部分小鼠的股骨骨髓观察其染色体畸变率和微核细胞形成率 ,并观察其余小鼠 2 0天的存活率 ,计算平均存活时间 ;结果 :经预缺氧 5天后照射的小鼠与单纯照射小鼠相比 ,平均存活时间延长 ,染色体畸变率和微核细胞形成率均降低 ;结论

关键词：预缺氧急性放射损伤染色体损伤动物实验

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浅谈多媒体幻灯在防原医学教学中的运用

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西北医学教育 2006年第4期14卷 406-407页

作者：任泂徐辉李蓉粟永萍第三军医大学防原医学教研室、创伤烧伤复合伤国家重点实验室

结合作者和其他教师在防原医学教学中的经历,分别从各个不同的元素（包括文字、图片、动画、视频、声音等）出发,对多媒体幻灯片制作中的注意事项做了简述.同时对多媒体课堂教学中需要注意的几个方面做了分析,提出了一些可行的方法.

关键词：多媒体幻灯课堂教学 Power point

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植入贫铀片大鼠血液和肝肾功能的变化

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第四军医大学学报 2004年第2期25卷 182-185页

作者：李蓉艾国平徐辉任泂楼淑芬程天民粟永萍第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038

目的 :弄清嵌入 (植入 )贫铀弹片是否会引起机体血液、肝肾功能的变化 ,为救治提供依据 .方法 :手术植入贫铀片 ,临床生化自动检测仪测定各指标 .结果 :在植片后 5mo大鼠白细胞数显著增高后又回降 ,淋巴细胞的变化趋势与白细胞相同 ,红... 详细信息

目的 :弄清嵌入 (植入 )贫铀弹片是否会引起机体血液、肝肾功能的变化 ,为救治提供依据 .方法 :手术植入贫铀片 ,临床生化自动检测仪测定各指标 .结果 :在植片后 5mo大鼠白细胞数显著增高后又回降 ,淋巴细胞的变化趋势与白细胞相同 ,红细胞和血红蛋白变化不大 ,血小板显著下降后又显著增高 .ALT和AST先升高后下降 ;T BIL一直下降 ,后虽回升 ,但仍显著低于正常组 ;AL/AS 比值一直升高 ,后下降至 0 .3左右 .植片后初期肾功能出现一定损伤 ,2 0d左右逐渐好转 ,1 2 0 1 5 0d时 ,各指标基本恢复正常 ,但尿蛋白、亚硝酸盐异常及肌酐呈上升趋势 .结论 :贫铀片可引起动物血液、肝肾功能异常 ,后逐渐恢复。

关键词：贫铀血液生理学肝功能实验肾功能实验

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PP2A抑制剂对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2017年第3期46卷 303-307页

作者：方银花李晓琴任泂唐才智冉新泽粟永萍程红缨第三军医大学护理学院重庆400038 第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所(创伤烧伤与复合伤国家重点实验室) 重庆400038

目的探索蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂LB-100对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响。方法 Ca ski(宫颈癌细胞株)及CCD 841CoN(正常小肠上皮细胞株)给予不同浓度梯度(0~100μmol/L)LB-100处理24h后,以CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物作用... 详细信息

目的探索蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂LB-100对宫颈癌细胞Ca ski辐射敏感性的影响。方法 Ca ski(宫颈癌细胞株)及CCD 841CoN(正常小肠上皮细胞株)给予不同浓度梯度(0~100μmol/L)LB-100处理24h后,以CCK-8法检测细胞活性,筛选最佳药物作用浓度。在此药物浓度下,以对照(PBS)、单纯LB-100、单纯辐照及LB-100联合辐照等方式处理细胞(辐照剂量为0、2、4、6Gy),通过平板克隆实验分别观察LB-100对Ca ski和CCD 841CoN辐射敏感性的影响;再以相同的方式处理(细胞辐照剂量为6Gy),通过流式细胞术检测凋亡及细胞周期,初探LB-100增强Ca ski辐射敏感性的机制。结果 LB-100对Ca ski及CCD 841CoN的抑制作用呈药物剂量依赖性;2.5μmol/L LB-100增强Ca ski细胞辐射敏感性,但对CCD 841CoN的辐射敏感性无显著影响;LB-100联合辐照处理促进Ca ski细胞凋亡,LB-100联合辐照组细胞凋亡率与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(8.76±1.02)%vs.(4.65±0.72)%,P<0.01];LB-100可下调Ca ski细胞G0/G1期所占比例,LB-100联合辐照组与单纯辐照组比较差异有统计学意义[(19.87±2.54)%vs.(30.73±1.18)%,P<0.05]。结论 PP2A抑制剂LB-100通过促进凋亡、影响细胞周期,增强了人宫颈癌细胞株Ca ski的辐射敏感性,同时,其对正常肠上皮细胞CCD 841CoN无辐射增敏作用,有望成为临床上增强宫颈癌放射治疗疗效的辅助药物。

关键词：蛋白磷酸酶2A(PP2A) 宫颈癌辐射敏感性细胞周期

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防原医学教学中激发学员学习动机的途径探索

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检验医学与临床 2015年第8期12卷 1168-1169页

作者：郝玉徽任泂李蓉第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室重庆400038

学员的学习动机是直接影响防原医学教学质量的重要因素。在防原医学教学过程中,教员可通过以下几种途径培养和激发学员的学习动机:引导学员将学习目标和防原医学研究内容有机结合,激发学习兴趣;理论教学联系实际案例,便于学员学以致用;... 详细信息

学员的学习动机是直接影响防原医学教学质量的重要因素。在防原医学教学过程中,教员可通过以下几种途径培养和激发学员的学习动机:引导学员将学习目标和防原医学研究内容有机结合,激发学习兴趣;理论教学联系实际案例,便于学员学以致用;丰富教学手段,吸引学员的注意力;理论教学与实验教学相结合,培养学员自主学习能力;教学与科研紧密结合,科研成果进入课堂;优化成绩评价体系,有效评价学员表现。教员应当在教学实践中不断学习,认真总结教学经验,积极探寻能够充分激发学员学习动机的有效途径,提高教学质量,为部队培养出更多高素质的军事医学人才。

关键词：防原医学教学方法学习动机

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增强型RACE技术克隆辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1

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中华放射医学与防护杂志 2003年第5期23卷 324-326页

作者：王锋超王军平粟永萍高京生楼淑芬刘晓宏任泂章波第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038

目的　在获得了辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1EST序列的基础上获得全长cDNA。方法　RT PCR方法对RS1基因进行表达谱分析 ,找到表达丰度较高的组织提取总RNA作为模板 ,应用增强RACE技术即结合生物素探针富集靶cDNA的方法克隆RS1的cDNA末... 详细信息

目的　在获得了辐射诱导小鼠肠上皮新基因RS1EST序列的基础上获得全长cDNA。方法　RT PCR方法对RS1基因进行表达谱分析 ,找到表达丰度较高的组织提取总RNA作为模板 ,应用增强RACE技术即结合生物素探针富集靶cDNA的方法克隆RS1的cDNA末端。结果　克隆到RS1片段 3′端约 2kb的序列。该序列 5′端包含已知的RS1片段 ,3′端具有明显的polyA加尾信号 ,有编码区的终止密码子。明确了RS1的正、负链及其蛋白编码方向 ,为RS15′端的克隆提供了必要信息。结论　结果与本实验的设计完全一致 ,说明这一方法对从表达丰度低 ,难以设计最佳基因特异性引物的EST序列克隆其对应的全长cDNA是可行的 ,同时为下一步研究RS1在小鼠肠上皮辐射应激反应中的作用和被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础。

关键词：增强型RACE技术克隆辐射诱导小鼠肠上皮基因 RS1

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