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稳定生产高甘露糖基化重组蛋白细胞株的构建

稳定生产高甘露糖基化重组蛋白细胞株的构建

作者：任伟伟江南大学

学位级别：硕士

生物医药是一类20世纪80年代开始出现的新型药物,与化学法合成的传统小分子药物相比,其具有更高的特异性,更低的毒副作用和更长的体内半衰期。生物医药为许多传统药物难以治愈的疾病(如癌症,自身免疫疾病等)提供了新的疗法,是现代医药... 详细信息

生物医药是一类20世纪80年代开始出现的新型药物,与化学法合成的传统小分子药物相比,其具有更高的特异性,更低的毒副作用和更长的体内半衰期。生物医药为许多传统药物难以治愈的疾病(如癌症,自身免疫疾病等)提供了新的疗法,是现代医药工业的一个极其重要的分支。表达系统在医药蛋白的生产过程中起着至关重要的作用,不同表达系统所具有的不同蛋白翻译后修饰过程使得具有相同氨基酸序列的蛋白可能呈现不完全相同的药代动力学和药理学性质。人胚胎肾细胞293(HEK293)是一种科学研究和工业生产中均较为常用的重组蛋白表达系统,与目前工业上应用最为广泛的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞相比,它不产生能引起人体免疫排斥的糖链结构(如半乳糖-α1,3-半乳糖或N-羟乙酰神经氨酸),具有更加优异的人体亲和性,但HEK293细胞株仍具有极为复杂的蛋白N糖基化修饰途径,这一途径使得其表达的医药蛋白具有不均一性,进而影响药物质量的稳定性。为生产具有稳定性质的高甘露糖基化的医药蛋白,本实验室已在野生型HEK293细胞株中敲除α1,2-甘露糖苷酶编码基因MAN1A1,MAN1B1得到了一株T-KO细胞株,此细胞株能够生产主要含高甘露糖型N糖的糖基化蛋白,但仍有少量复杂型N糖在此细胞株中合成,为除去此部分复杂型糖链,本研究在T-KO细胞株中敲除了另一α1,2-甘露糖苷酶编码基因MANIC1和β1,2-N乙酰葡糖胺转移酶编码基因MGAT1得到了 QD-KO和QT-KO两株细胞株。为鉴定这两株细胞株所合成N糖糖型,作者进行了凝集素染色,外切糖苷酶处理以及质谱分析,结果均表明QD-KO和QT-KO细胞株中只合成高甘露糖型N糖。为增强QD-KO和QT-KO细胞株的增殖能力,研究中向这两株细胞株中引入了原癌基因MYC和MYCN,对转入MYC/MYCN后的细胞株进行生长曲线测定表明其生长能力的确得到回补,并且对此细胞株中所表达重组蛋白的N糖进行的鉴定表明,MYC和MYCN的引入不影响细胞株表达重组蛋白的糖链结构。所有实验结果均表明,本研究成功在HEK293细胞株的基础上构建了适于生产均一性高甘露糖基化医药蛋白的细胞株。

关键词： α1,2-甘露糖苷酶 HEK293 基因编辑均一化N糖医药蛋白

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浸没边界法在充气过程中的分析与应用

浸没边界法在充气过程中的分析与应用

作者：任伟伟南京航空航天大学

学位级别：硕士

浸没边界法是一类在直角坐标系中处理运动曲线边界的新兴计算方法,十分适合模拟多运动或变形物体的复杂相互作用,而且程序简单,易于实现。于是自从1972年被Peskin提出作为模拟人体心血管系统中流体-弹性体耦合的模型后,就被广泛应用于... 详细信息

浸没边界法是一类在直角坐标系中处理运动曲线边界的新兴计算方法,十分适合模拟多运动或变形物体的复杂相互作用,而且程序简单,易于实现。于是自从1972年被Peskin提出作为模拟人体心血管系统中流体-弹性体耦合的模型后,就被广泛应用于多种流固耦合和生物流体力学问题。本文首先在详细介绍基于标准投影法的浸没边界法的基础上,分析（验证）了浸没边界法在大变形流固耦合问题,多介质流问题中的模拟能力,对方腔内圆状薄膜的变形运动,剪切流中液滴的变形以及浮力作用下水下气泡的上浮运动进行了模拟和分析,并与已有文献所得到的计算数据与前人的数值结果以及实验结果相符合,验证了自主程序能够正确模拟大变形流固耦合和大密度比多介质流问题。同时,建立了与周围流场相互作用的气囊的二维简化充气模型,首次应用浸没边界法对其进行探索性模拟,获得了气囊充气过程中气囊形状,体积,气囊上拉应力的时间变化及气囊上部分特征拉格朗日点对流场作用力的时间变化。模拟结果表明:气囊充气过程中最大拉力主要集中在气囊靠近进气口的两侧,为工程设计提供了一种较为可靠的辅助手段。

关键词：流固耦合大变形浸没边界法气囊充气

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复合材料挤油辊的性能及试验研究

复合材料挤油辊的性能及试验研究

作者：任伟伟太原理工大学

学位级别：硕士

在冷轧板带材生产线湿平整环节中,橡胶挤油辊由于其表面容易出现老化裂纹、去除油液能力较弱以及容易粘附铁屑残渣划伤板带材等缺陷近年来已经逐渐被美国研制的新型复合材料挤油辊取代。复合材料挤油辊的辊套基体材料为非织造布,因其独... 详细信息

在冷轧板带材生产线湿平整环节中,橡胶挤油辊由于其表面容易出现老化裂纹、去除油液能力较弱以及容易粘附铁屑残渣划伤板带材等缺陷近年来已经逐渐被美国研制的新型复合材料挤油辊取代。复合材料挤油辊的辊套基体材料为非织造布,因其独特的多孔结构而具有较好的油液吸收能力并能将细小杂物吸纳入孔隙中从而避免对板带材表面的划伤,同时非织造布还具有较高的摩擦系数以及自愈性,可以保证挤油辊有较长的使用寿命。复合材料挤油辊的除油效果主要受其设定的工况参数的影响,因此研究复合材料挤油辊在实际工作环境下受力压缩变形和温度场,并根据辊套基体非织造布的磨损情况预测复合材料挤油辊的使用寿命有着重要的意义。在课题组前期研究基础上,结合弹性力学以及传热学理论对复合材料挤油辊受力压缩变形和温度场进行分析;然后使用ABAQUS对试验和实际两种不同尺寸复合材料挤油辊模拟实际工作状态仿真分析,确定其辊套压缩变形量与所受压力关系曲线、弹性变形恢复时间以及初始工作阶段挤油辊温度变化和分布;最后利用除油试验装置搭建试验平台对试验尺寸挤油辊进行受力压缩变形以及除油试验修正关系曲线,得到修正系数为1.2。研究表明使用复合材料挤油辊除油后带钢表面油膜厚度最小值为0.91g/m,带钢表面质量有所提高;实际工况下,复合材料挤油辊承受压力约为16800N时(换算成线载荷为8N/mm),即可达到最佳除油效果,此时挤油辊辊套部分弹性变形恢复时间约为0.142s,挤油辊转动周期应大于0.852s,对应板带材进给速度应不高于1.050m/s;同时结合非织造布的构造和冷轧湿平整环节的工作环境对复合材料挤油辊辊套的磨损失效进行理论分析,利用LEICA DFC295光学显微镜对辊套表面不同磨削阶段进行观察对比,预估磨损单层纤维需要的除油工作次数约为648000次,复合材料挤油辊的使用寿命约为897.44天。

关键词：复合材料挤油辊弹性变形温度场磨损失效使用寿命

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奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染的效果研究

中国实用医药 2022年第19期17卷 148-150页

作者：任伟伟管琴李守宏湖北医药学院附属口腔医院儿童口腔及预防保健科 442000 湖北医药学院附属口腔医院口腔颌面外科 442000

目的研究奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染的临床效果。方法98例口腔厌氧菌感染患者,随机分为常态组和探析组,各49例。常态组采用替硝唑治疗,探析组采用奥硝唑治疗。比较两组治疗效果、厌氧菌清除情况、不良反应发生情况及治疗前后免疫学功能... 详细信息

目的研究奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染的临床效果。方法98例口腔厌氧菌感染患者,随机分为常态组和探析组,各49例。常态组采用替硝唑治疗,探析组采用奥硝唑治疗。比较两组治疗效果、厌氧菌清除情况、不良反应发生情况及治疗前后免疫学功能指标、炎症因子。结果探析组患者治疗总有效率95.92%、厌氧菌清除率89.80%均高于常态组的79.59%、65.31%,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,探析组患者CD4+/CD8+(1.79±0.44)高于常态组的(1.17±0.45),白细胞介素-6(45.38±14.47)pg/ml及C反应蛋白(3.34±1.64)mg/L低于常态组的(56.79±16.54)pg/ml、(5.52±2.68)mg/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。探析组不良反应发生率4.08%低于常态组的16.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染相比替硝唑的临床效果及细菌清除率更佳,可有效改善炎症反应,提高机体免疫能力,且用药安全性高,值得推广应用。

关键词：口腔感染厌氧菌奥硝唑替硝唑疗效不良反应

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澳门科技大学人才培养模式述评及其启示

现代教育科学（高教研究） 2010年第1期 135-138页

作者：任伟伟郭峰临沂师范学院教科院

年轻的澳门科技大学坚持专业教育与通识教育并重,更加突出因材施教,更加重视全面培养,更加强调教书育人。其成功之路为我国的高等教育提供了可资借鉴的参照系:确立培养"全人"的目标、强化德育养成教育、加强通识教育和实施国际化办学模式。

关键词：澳门科技大学人才培养模式启示

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原油荧光光谱特性及分析技术研究

原油荧光光谱特性及分析技术研究

作者：任伟伟中国海洋大学

学位级别：硕士

20世纪80年代中后期以来,随着油藏地球化学这一新兴的学科的产生,油气地球化学家们开始把地球化学技术成功地应用于解决油气藏形成机理、油藏评’价和开发等领域。芳烃是原油和生油岩中重要的组成部分,一般占总烃的10%-45%。因为芳烃性... 详细信息

20世纪80年代中后期以来,随着油藏地球化学这一新兴的学科的产生,油气地球化学家们开始把地球化学技术成功地应用于解决油气藏形成机理、油藏评’价和开发等领域。芳烃是原油和生油岩中重要的组成部分,一般占总烃的10%-45%。因为芳烃性质相对稳定,具有丰富的地球化学信息,而且能够反映成油母质的生源和沉积环境的变化,因此可以用来进行油源对比、估计生油岩和原油的成熟度,进而确定沉积环境以及研究石油的初次运移等。同时因为不同类型原油的芳烃分布和组成有明显差别,而且芳烃物质大都具有荧光发射的结构特点,采用荧光分析的方法,检测原油中的芳烃和化合物具有灵敏度高、分析速度快、重复性好的优势。作者在大量实验工作的基础上,通过对原油样品中芳烃的荧光光谱分析,讨论了原油样品含油气性的辨识问题。论文首‘先从荧光光谱和发光的原理开始,从光谱探测技术,以及荧光技术在石油勘探中的应用等方面介绍了本论文的依据和实验方法,并对具体研究的实验样品,采用原油样品荧光分析的方法,分析不同井区、不同层段原油样品荧光特性的变化和产生这种变化的原因,并结合研究区的地质背景和沉积环境,推断油气的运移方向。作者的主要工作包括：①在对原油样品进行荧光光谱测量的同时,建立了原油荧光光谱色度反演的方法,确定原油成熟度,并与地质背景、地球化学资料相结合,阐述了原油成熟度不同的原因,进一步证实了结论的正确性。依据色度学原理,编制由荧光光谱反演色度的程序,依据色品坐标可以读出原油荧光的颜色。这样可以避免人眼判断包裹体荧光颜色的主观性,使颜色的判断更加客观。依据色坐标可以判断原油的轻重,油气的成熟度,进一步推测母源的性质。②结合主成分分析法对原油样品进行鉴别,进而对所选样品的成熟度作进一步的划分。通过分析,全面地反映出不同环数的芳烃组分在原油中的比率,实现了准确区分不同油源原油样品,特别是能够很好识别出相近油源及油种的原油样品。本论文通过实验的尝试和探索,认为色度坐标反演方法,和原油样品主成分分析方法,可以用来判断原油成熟度的而不同,进而区分不同的油源。结合研究区的测井和录井资料,可以对原油成熟度做出定量判断和对比,确定沉积环境以及研究原油的初次转运等,指导油气地球化学勘探工作的进行。

关键词：原油荧光光谱成熟度色度反演主成分分析油藏勘探

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模具磨损对楔横轧中心疏松的影响

模具磨损对楔横轧中心疏松的影响

作者：任伟伟机械科学研究总院

学位级别：硕士

楔横轧工艺在应用中的主要问题体现在中心材料容易出现疏松,现有的理论分析对中心材料的损伤规律有了一定的认识,在模具设计时,根据变形量的大小,选用合理的工艺参数,材料中心的损伤可以得到有效控制,轧件质量能够保证。但在实际生产中... 详细信息

楔横轧工艺在应用中的主要问题体现在中心材料容易出现疏松,现有的理论分析对中心材料的损伤规律有了一定的认识,在模具设计时,根据变形量的大小,选用合理的工艺参数,材料中心的损伤可以得到有效控制,轧件质量能够保证。但在实际生产中发现,模具磨损后,轧件中心出现疏松或孔洞的几率明显提高,从而影响产品质量,严重时无法进行正常生产。目前的理论和模拟及实验研究对此问题缺乏深入的分析和认识,在生产实际中产品质量难以定量控制。本论文结合上述问题,采用Archard模具磨损公式,首次建立了楔横轧模具磨损的计算模型,利用有限元模拟软件,模拟了不同工艺参数对模具磨损深度的影响,结果表明成形角、展宽角、断面缩减率的增大会增加模具的磨损,而轧制温度和模具硬度的提高会减小模具的磨损。磨损严重的区域在楔入段和展宽段开始的一段,此段成形角和展宽角略有变化,而展宽开始段楔顶磨损最为严重,楔顶高度降低明显。通过将新模具尾端垫高一定高度得到和模具磨损较为一致的模具外形,通过有限元模拟,得到轧件内部在模具垫高后的应力应变场,损伤量的分布,从而得到模具磨损后轧件的应力应变状态。结果表明,在模具磨损后,轧件内部等效应力,轴向应力和切向应力都不同程度增加,压下方向应力变化小;等效应变,轴向应变和切向应变增加,压下方向应变变化小;轧件中心区域损伤量急剧增加。根据模具磨损的模拟结果,进行了相应实验。实验结果表明,随着模具垫高高度增加,中心出现空洞的几率增加。模拟计算结果和试验结果一致性较好,模具磨损后展宽角、成形角均有较小变化,对中心损伤量的影响较小。随着磨损量的增加,轧件中心损伤量急剧增加。因此,对于模具磨损后,在展宽开始段磨损后楔顶高度降低,造成轧件在整个轧制过程中,中心部位一直处于横轧状态是中心出现孔洞的主要原因。本论文对模具磨损规律和磨损对轧件质量影响规律的研究,深化对楔横轧工艺理论的认识,揭示模具磨损后各参数的改变中影响中心材料疏松的主导因素,具有重要的理论和实用价值。

关键词：楔横轧模具磨损中心疏松

南京国民政府社会调查研究（1927-1937）

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南京国民政府社会调查研究（1927-1937）

作者：任伟伟山东师范大学

学位级别：硕士

近代中国政府社会调查始于清末新政时期,中经北京政府时期,至南京国民政府时期形成规模,并对中国近代化进程起到了重要作用。本文即运用政治学、社会学、统计学的相关理论和知识,对南京国民政府在1927年至1937年所主持的社会调查做详细... 详细信息

近代中国政府社会调查始于清末新政时期,中经北京政府时期,至南京国民政府时期形成规模,并对中国近代化进程起到了重要作用。本文即运用政治学、社会学、统计学的相关理论和知识,对南京国民政府在1927年至1937年所主持的社会调查做详细的分析,以期对其历史作用做出客观的评价。南京国民政府成立后,出于建国的需要,对社会调查的重要性有着较为清醒的认知,由此促进了政府社会调查的大规模开展。这又是与清末新政以及北京政府时期着手社会调查是一脉相承的,且与20世纪20-30年代民间社会调查的热兴也有着密切关系。为了更好的开展社会调查,南京国民政府建立了各级社会调查与统计机构,制订了各项调查统计制度、统计方法以及相关的统计人员培训计划和方法。特别是1931年主计处统计局成立之后,各项机构和制度进行了改革和完善,从中央到地方形成了完善的统计机构,保证了调查结果的科学性和准确性,使得南京国民政府调查统计事业逐渐步入正轨,真正成为制定国策的智囊团。南京国民政府开展的社会调查内容极其广泛,包括人口、农业、教育、物价、交通、工业、卫生、少数民族等各个方面,并取得了相当可观的成果。本文以工业、农业、人口三个方面调查为例,具体分析了南京国民政府的调查统计工作在各个行业中的展开,综合分析了南京国民政府社会调查的具体操作,并指出其成就与不足。论文还通过对1928年南京国民政府举办的人口调查以及1933年国防设计委员会举办的句容县人口农业总调查作个案分析,探讨了政府在社会调查过程中的具体运作方式,其中所凸显的机构以及制度的作用,并分析其优缺点,从而为真实地了解南京国民政府社会调查提供范本。为了更好的把握南京国民政府社会调查的历史地位及特点,文章将其与晚清政府、北京政府的社会调查以及同时期的民间社会调查、中国共产党进行的社会调查进行比较分析,既凸显出了南京国民政府社会调查的特征,也指出南京国民政府社会调查的成就以及缺憾。从总体上看,南京国民政府主持的社会调查,是中国近代历史上规模最大,体系完备、影响深远的政府调查活动。它为南京国民政府制订相关的政策提供了依据,促进了社会学的本土化进程,同时也为我们今天了解民国社会,进行科学研究提供了宝贵的资料。当然,受历史条件的制约,南京国民政府社会调查活动及结果不可避免也存在种种缺陷,然而这并不能抹杀其体现出的科学执政的现代理念。

关键词：南京国民政府社会调查主计处社会学本土化

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中国志愿服务组织与政府关系探讨

中国志愿服务组织与政府关系探讨

作者：任伟伟中国青年政治学院

学位级别：硕士

志愿服务是一种高尚的行为和一项重要的社会事业,志愿服务组织在提供公共服务、完善社会保障、维护社会安定、救助弱势群体、构建市民道德等方面发挥了积极的作用。然而,同任何事物一样,志愿服务的发展也绝非一帆风顺的。中国的志愿服... 详细信息

志愿服务是一种高尚的行为和一项重要的社会事业,志愿服务组织在提供公共服务、完善社会保障、维护社会安定、救助弱势群体、构建市民道德等方面发挥了积极的作用。然而,同任何事物一样,志愿服务的发展也绝非一帆风顺的。中国的志愿服务出现比西方晚,发展相对落后,尤其在我国社会变革的大环境下,更是面临重重困境,出现了许多问题,严重地制约了我国志愿服务组织的发展。实践前进的每一步都需要理论的指导,在当下对志愿服务组织的研究更显得尤为紧迫和重要。随着志愿服务的迅速发展,对于志愿服务组织的研究日益受到学术界的重视。西方的志愿服务研究已经不再将志愿服务组织看作对政府功能的补充,而是将其作为一个独立的部门加以对待,开始探索如何更好地构建政府、市场和志愿服务组织三部门的关系,使其都能更好地发挥作用。中国对志愿服务的研究也取得了引人瞩目的成绩,但与西方相比仍具有一定差距,在中国志愿服务组织与政府关系问题上,多数研究只是泛泛而谈,缺乏理论研究,这样,对我国志愿服务组织发展的设计也就缺乏说服力。明确志愿服务组织的地位,梳理志愿服务组织与政府的关系是研究志愿服务的基础,也是探索志愿服务发展的必经之路。本文从优化资源配置的途径入手,探讨政府、市场和志愿服务组织的地位和关系,首先摆正志愿服务组织的地位,再引入“能力强弱”和“政策一致性”两个变量设计了政府与志愿服务组织的关系模型,模型中包含了政府与志愿服务组织的八种关系模式。对于是什么力量决定一个社会中政府与志愿服务组织的关系,本文认为有政府选择和社会选择两种决定模式,并结合美国、日本、台湾和香港的实例探讨在不同选择模式下政府与志愿服务组织呈现的不同关系模式。接下来本文结合中国志愿服务组织发展的现状和政府对志愿服务的管理体制分析中国志愿服务组织发展所面临的问题,在此基础上对我国未来志愿组织与政府应建立怎样的关系进行了设计,并探索了实现这种关系所采取的路径。

关键词：志愿服务组织政府关系