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利福平耐药结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物表型耐药与其基因突变的一致性研究

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中国防痨杂志 2024年第8期46卷 942-950页

作者：于兰陈双双王嫩寒田丽丽赵琰枫樊瑞芳刘海灿李传友代小伟北京市疾病预防控制中心结核病实验室北京100035 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

目的:研究利福平耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)耐药基因突变特征与FQs最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)的关系。方法:选取2016—2021年北京市结核病防治机构及定点医院收治的利福平耐药结核病(rifampicin resistant tuberculosis,RR-TB)患者分离培养阳性菌株进行微孔板法药物敏感性检测,总结RR-TB患者菌株对左氧氟沙星(levofloxacin,Lfx)和莫西沙星(moxifloxacin,Mfx)的MIC值;同时进行一代测序。分析FQs耐药相关基因gyrA和gyrB突变特征与FQs MIC之间的关系;以表型药物敏感性试验(phenotypic drug susceptibility testing,pDST)结果为参照标准,评价基因型药物敏感性试验(genotypic drug susceptibility testing,gDST)对FQs耐药的检测效能;探讨RR-MTB对FQs表型耐药与基因型耐药差异的原因。结果:303株RR-TB患者菌株中,FQs pDST耐药率为27.7%(84/303),gyrA基因突变检出率为25.1%(76/303),未检测到gyrB基因突变。以pDST结果为参照标准,gDST检测RR-MTB的FQs耐药性的敏感度和特异度分别为84.5%(71/84;95%CI:74.6.1%~91.2%)和97.7%(214/219;95%CI:94.5%~99.1%)。两种方法结果不一致的菌株有25株,不一致率为8.3%(25/303)。FQs耐药菌株的MIC主要为2μg/ml,最常见的突变位点发生在第94位点(53.9%,41/76),gyrA基因在第88和94位点突变与pDST耐药完全一致,而第90和91位点突变的pDST耐药一致率分别为95.8%(23/24)和3/5。第88位点的突变与Lfx pDST耐药相关,与Mfx pDST高浓度耐药相关;第90位点的突变以丙氨酸转变为缬氨酸为主(92.3%,24/26),该突变发生的Lfx和Mfx最低MIC为临界浓度(1μg/ml和0.25μg/ml)。第94位点天冬氨酸突变为天冬酰胺均为Lfx和Mfx高浓度耐药(1/1),该位点天冬氨酸突变为酪氨酸与Lfx耐药(1/1)相关,与Mfx高浓度耐药相关(1/1)。结论:北京地区RR-MTB的FQs耐药的主要机制是gyrA基因突变,不同gyrA基因突变提示FQs耐药水平存在差异。FQs pDST和gDST检测RR-MTB的结果高度一致,可及早应用gDST检测RR-TB患者的FQs的耐药性,以指导临床制定合理治疗方案。

关键词：分枝杆菌,结核荧光喹诺酮类微生物敏感性试验 DNA突变分析抗药性,细菌

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17种抗生素对北京地区快速生长分枝杆菌体外抑菌效果分析

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中国防痨杂志 2024年第9期46卷 1056-1062页

作者：陈双双田丽丽王嫩寒杨新宇赵琰枫李传友代小伟北京市疾病预防控制中心结核病实验室北京100035

目的:分析17种抗生素对北京地区快速生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM)临床分离株的抑菌效果,为RGM引起的非结核分枝杆菌病的临床治疗提供可靠的理论依据。方法:收集北京市疾病预防控制中心结核病实验室2016年1月至2020... 详细信息

目的:分析17种抗生素对北京地区快速生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM)临床分离株的抑菌效果,为RGM引起的非结核分枝杆菌病的临床治疗提供可靠的理论依据。方法:收集北京市疾病预防控制中心结核病实验室2016年1月至2020年12月五年间分离保存的130株非结核分枝杆菌菌株,对其进行菌种鉴定。对鉴定出的RGM临床分离株和相应标准株复苏后,采用微量肉汤稀释法进行17种药物(阿米卡星、环丙沙星、磺胺甲噁唑-甲氧苄啶、克拉霉素、利奈唑胺、莫西沙星、多西环素、米诺环素、头孢西丁、替加环素、妥布霉素、亚胺培南、美罗培南、阿莫西林/克拉维酸、贝达喹啉、德拉马尼和氯法齐明)的敏感性试验,记录其最低抑菌浓度(MIC)及抑制50%或90%受试菌的MIC值(MIC90和MIC50)。结果:经菌种鉴定且复苏成功的RGM为37株,包括19株脓肿分枝杆菌、17株偶发分枝杆菌和1株龟分枝杆菌。已明确耐药折点的14种抗生素中,所检测的3种RGM临床分离株对替加环素均敏感,龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌临床分离株对克拉霉素均敏感,脓肿分枝杆菌临床分离株对利奈唑胺敏感。另外,偶发分枝杆菌临床分离株对阿米卡星、环丙沙星、磺胺甲噁唑-甲氧苄啶、莫西沙星对均敏感。脓肿分枝杆菌临床分离株对阿米卡星的敏感率为73.7%(14/19),偶发分枝杆菌临床分离株对利奈唑胺、美罗培南敏感率分别为82.4%(14/17)、88.2%(15/17)。所检测的19株脓肿分枝杆菌对多西环素、阿莫西林/克拉维酸均耐药,偶发分枝杆菌临床分离株对妥布霉素均耐药。此外,贝达喹啉和氯法齐明对RGM临床分离株的MIC90均小于药敏板最低检测限值,而德拉马尼的MIC90均高于药敏板最大检测限值。结论:替加环素、阿米卡星、利奈唑胺、贝达喹啉和氯法齐明对RGM均具有较好的体外抑菌活性,而多西环素、阿莫西林/克拉维酸、德拉马尼几乎没有体外抑菌活性。非结核分枝杆菌种间耐药谱差异较大,建议用药前进行菌种鉴定和药物敏感性试验,以选择合适的抗菌药物。

关键词：分枝杆菌非典型性快速生长分枝杆菌微生物敏感性试验评价研究

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上党梆子艺术家张爱珍及其声腔艺术简论

上党梆子艺术家张爱珍及其声腔艺术简论

作者：代小伟山西师范大学

学位级别：硕士

张爱珍老师是建国以来继吴婉芝、郝聘芝等上党梆子著名旦角表演艺术家之后成长起来的又一批上党梆子演员的代表,曾是“梅花奖”、“金唱片”等奖项的获得者,1988年、1993年两届的山两省人大代表,享受国务院特殊津贴。张爱珍老师在继承... 详细信息

张爱珍老师是建国以来继吴婉芝、郝聘芝等上党梆子著名旦角表演艺术家之后成长起来的又一批上党梆子演员的代表,曾是“梅花奖”、“金唱片”等奖项的获得者,1988年、1993年两届的山两省人大代表,享受国务院特殊津贴。张爱珍老师在继承前辈的基础上,发展和创新了上党梆子旦角的声腔表演艺术,改变了上党梆子重须生,大嗓门唱,表演粗犷、激越,同时不可避免的存在简单、粗糙,唱腔高、尖、炸的毛病,将旦角的表演艺术推进一个新的高度,为上党梆子在当代快节奏、多元化的生活和娱乐方式下寻找出路,积极地为上党梆子走出困境贡献出了自己最大的力量。正是由于张爱珍老师掌握了艺术必须与时俱进的规律,在实践中大胆改革创新,实践引起了争论,争论活跃了思路,新的思路又推动了实践的进一步深化。三十多年来,张爱珍老师继承吴婉芝老师的表演艺术,但又没有停留在吴婉芝的唱腔艺术上,而是根据自己的心得,结合自己的自身条件和时代的要求,锐意创新,广泛吸取当地民歌、京剧、豫剧、山东枣梆等艺术养分,做到了以字行腔,以腔传情,形成了委婉缠绵,刚柔相济的“爱珍腔”,从而拓宽了上党梆子中旦角的戏路,让一个风格粗犷有余而婉转不足的上党梆子,转变为既能表现激越高昂的情绪又能演绎才子佳人,表现细语缠绵的情剧的剧种。“爱珍腔”在上党地区的广泛流传,无论是城市还是农村,老戏迷还是新观众,专家还是同行,都交口称赞,成为这个时代的宠儿,其孜孜以求的奋斗精神,在我们时代和艺术不断推陈出新的今天,对于每一个广大戏曲工作者,对于每一个戏曲演员,都有值得学习和借鉴的地方。论述和评价张爱珍的表演艺术,对其在实践中逐步形成的“爱珍腔”进行理论上的归纳和总结,并对其声腔特色予以评价,突出她对上党梆子的贡献,就显得尤为必要。本论文旨在对张爱珍老师的艺术道路做真实的记录,对其声腔形成过程、创腔规律与声腔特色等问题做一番研究,全文共分五章。第一章对张爱珍老师的艺术道路给予详细的记录,分析其能够在戏曲艺术道路上不断成长的原因,突出其坚苦卓绝的奋斗精神,对戏曲艺术执着的信念和追求;第二章是对张爱珍老师的声腔发展历程给予介绍,以张爱珍老师的三出代表剧目为载体,代表着张爱珍老师声腔发展历程中三大步质的跨越;第三章在了解其艺术人生和声腔发展的轨迹基础上,归纳张爱珍老师新腔的创腔规律,为学习者和上党梆子的声腔艺术留下宝贵的财富,第四章总结并归纳“爱珍腔”的唱腔特色,通过创制新腔,使上党梆子的声腔艺术达到新的里程碑,突出她对上党梆子艺术的贡献：最后一章对全文进行简要的总结,并把张爱珍放在整个上党梆子历史发展的过程中,对其贡献予以定位。

关键词：地方戏研究上党梆子张爱珍爱珍腔声腔艺术

白腐真菌和黑曲霉降解蔗渣、稻草中木质素以及发酵饲料体外消化试验的研究

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白腐真菌和黑曲霉降解蔗渣、稻草中木质素以及发酵饲料体外消化试...

作者：代小伟广西大学

学位级别：硕士

本研究主要以甘蔗渣和稻草为研究对象，采用固体发酵法研究本实验室诱变的木质拟层孔菌和黑曲霉对甘蔗渣、稻草中的木质素和纤维素的降解作用。发酵之后用水牛瘤胃液模拟瘤胃内环境对发酵饲料进行反刍家畜离体消化试验。试验一：采用... 详细信息

本研究主要以甘蔗渣和稻草为研究对象，采用固体发酵法研究本实验室诱变的木质拟层孔菌和黑曲霉对甘蔗渣、稻草中的木质素和纤维素的降解作用。发酵之后用水牛瘤胃液模拟瘤胃内环境对发酵饲料进行反刍家畜离体消化试验。试验一：采用四因素三水平的正交试验设计，考察料液比、发酵温度、发酵时间以及pH值对降解木质素、纤维素的影响。四因素对甘蔗渣和稻草纤维成分降解率的影响次序依次为：发酵时间＞料液比＞温度＞pH值：木质拟层孔菌降解甘蔗渣和稻草中木质素的最佳发酵条件为：发酵天数30天，料液比1：3，发酵温度30℃，pH值为6.5，最高分别达11.29％和13.49％，黑曲霉降解甘蔗渣和稻草中纤维素的最佳发酵条件为：发酵天数30天，料液比1：3，发酵温度30℃，pH值为6.5，降解率最高可达6.59％和6.20％，混合菌降解甘蔗渣稻草中木质素最高可达到5.79％和5.94％，而降解纤维素降解率最高可达到8.61％和18.78％。试验二：取用最佳条件发酵的木质拟层孔菌和黑曲霉发酵饲料，用水牛瘤胃液模拟瘤胃内环境对发酵饲料进行反刍家畜二级离体消化试验。体外消化试验结果表明：甘蔗渣、稻草经微生物处理后，纤维各成分的体外消化率较未处理有显著的提高，其中，甘蔗渣经木质拟层孔菌、黑曲霉和混合菌处理后ADL的消化率为5.56％、3.59％和4.04％，未处理甘蔗渣的ADL的消化率为2.02％，处理比未处理分别提高了175.25％(P＜0.05)、77.72％(P＜0.05)和100％(P＜0.05)，稻草经木质拟层孔菌、黑曲霉和混合菌处理后ADL的消化率为6.35％、广西大学硕士学位论文3.52%和5.31，未处理稻草的分别提高7 245.11、91.30%、ADL的消化率为和1 88.59。84%，处理比未处理

关键词：木质拟层孔菌,黑曲霉,甘蔗渣,稻草,体外消化率

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镁钙铁系合成砂的研制及应用

耐火材料 2003年第6期37卷 368-369页

作者：马书尚代小伟山东恒欣镁业有限责任公司莱州261400

随着我国高功率和超高功率电炉的迅速发展,对耐火材料的使用要求也越来越高,电炉炉底相继采用镁钙铁干式捣打料取代原来的砖砌炉底.采用镁钙铁干式捣打料施工方便,不需干燥和烘烤,可直接使用,在使用过程中,炉底烧结成一个坚固的整体.

关键词：镁钙铁合成砂耐火材料电炉干式捣打料

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H5N1型禽流感病毒动物模型的研究现状

基础医学与临床 2007年第6期27卷 710-713页

作者：代小伟秦川中国医学科学院中国协和医科大学实验动物学研究所病理科北京100021

H5N1亚型禽流感病毒在全球多个国家肆虐,已严重威胁人类健康。禽流感病毒动物模型的建立可以为研究病毒的突变、传染性和发病机制提供良好的技术平台。本综述概括了H5N1对几种哺乳动物:食蟹猴、雪貂、小鼠、大鼠、沙鼠、家猫等的致病性... 详细信息

H5N1亚型禽流感病毒在全球多个国家肆虐,已严重威胁人类健康。禽流感病毒动物模型的建立可以为研究病毒的突变、传染性和发病机制提供良好的技术平台。本综述概括了H5N1对几种哺乳动物:食蟹猴、雪貂、小鼠、大鼠、沙鼠、家猫等的致病性,为以后理想动物模型的建立和研究提供一定的帮助。

关键词：禽流感病毒动物模型 H5N1亚型哺乳动物

高致病性禽流感H5N1实验流行病学研究—感染及传播初探

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高致病性禽流感H5N1实验流行病学研究—感染及传播初探

作者：代小伟中国协和医科大学

学位级别：硕士

禽流感(Avian Influenza)是一种由禽流感病毒(Avian Influenza ViFUS，AIV)引起的禽类烈性传染病。AIV为正粘病毒科流感病毒属类病毒，按病毒表面抗原的不同可分为血凝素(H)和神经氨酸酶(N)亚型，目前已分离到16个H亚型和9个N亚型的病... 详细信息

禽流感(Avian Influenza)是一种由禽流感病毒(Avian Influenza ViFUS，AIV)引起的禽类烈性传染病。AIV为正粘病毒科流感病毒属类病毒，按病毒表面抗原的不同可分为血凝素(H)和神经氨酸酶(N)亚型，目前已分离到16个H亚型和9个N亚型的病毒，其中H5N1、H9N2、H7N7能感染人类，以H5N1型感染最广泛最严重。自1997年香港人感染禽流感病例发现以来，中国大陆、日本、柬埔寨、老挝、越南、泰国、印度尼西亚、埃及、伊拉克、土耳其、尼日利亚等国相继暴发禽流感，其中泰国、越南、印度尼西亚感染率较高。据世界卫生组织统计：至2007年3月，全球人感染禽流感病例共298例，其中177人死亡，病死率达59.6％。禽流感的暴发不仅引起巨大的经济损失，还给人类健康造成严重威胁。严防禽流感在人间的暴发已迫在眉睫。在禽类AIV的感染及传播特点已经较为明确，而其在哺乳动物除通过滴鼻方式可以致病外，是否还存在其它感染途径;AIV能否在哺乳动物之间及人与人之间进行传播至今仍不清楚。为研究AIV感染及传播特点，从而进一步了解高致病性禽流感的流行病学特征，本实验选用对H5N1病毒最敏感的BALB／c小鼠，进行两方面的实验研究：①多途径感染：通过污染饲料、口腔灌注、腹腔注射、皮肤损伤途径感染BALB／c小鼠，经病毒分离、RT-PCR、血清IgG抗体及病理检查观测小鼠感染发病情况。②传播途径研究：通过滴鼻方式感染BALB／c小鼠，再将健康小鼠与攻毒小鼠同笼饲养，观测健康小鼠感染情况，了解小鼠之间是否存在水平传播;通过滴鼻方式感染孕14天BALB／c孕鼠，观测胎鼠的感染情况，了解H5NI病毒是否能经过胎盘进行垂直传播。通过病原学、血清学及病理学检查发现：①BALB／c小鼠经多种途径感染后均出现明显的临床症状，MDCK细胞可分离到H5N1病毒，RT-PCR可检测到目的片段，感染后第7天小鼠血清中可出现较低水平IgG抗体，肺、肝、脑等多个脏器发现明显病理改变。说明H5N1病毒除通过呼吸道可感染哺乳类动物外，还可经消化道、腹腔注射、皮肤损伤方式进行感染。②健康小鼠与攻毒鼠同笼饲养后，部分健康小鼠肺组织病毒分离及RT-PCR检测阳性，病理表现为轻-中度间质性肺炎。说明通过小鼠间密切接触可传播病毒，即H5N1在哺乳动物之间存在水平传播;经无菌解剖从感染孕鼠子宫取出的胎鼠病原检测阳性，存活孕鼠所产下的仔鼠RT-PCR可检测到病毒核酸，感染后第21天仔鼠血清中可检测到高水平IgG抗体。说明病毒可通过胎盘垂直传播。从以上结果得出，高致病性禽流感H5N1病毒可通过多种途径感染哺乳类动物，在病毒进行传播的过程中，空气飞沫、粪口、皮肤损伤、身体接触等均可能使健康动物发生感染。除水平传播外，实验中我们发现AIV还可进行垂直传播，为以后的流行病学研究奠定了充实的理论基础，有益于更好的防控禽流感。我们可通过多途径(消化道、腹腔注射、皮肤损伤及自然感染)感染建立H5N1感染动物模型，为进一步研究禽流感的发病机制提供基础平台。

关键词：禽流感 H5N1病毒感染水平传播垂直传播 BALB/c小鼠

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盐度对南美白对虾的生长及生化成分的影响

海洋科学 2004年第9期28卷 20-25页

作者：黄凯王武卢洁代小伟周家能广西大学动物科技学院广西南宁530005 上海水产大学渔业学院上海200090 广西大学生物技术实验中心广西南宁530005

在室内不同盐度条件下进行了南美白对虾(Penaeusvannamei)幼虾饲养试验 ,就盐度对南美白对虾生长、成活率及生化成分的影响进行了研究。结果表明 ,盐度对南美白对虾体质量增长率、成活率、饲料系数有显著影响(P<0.05) ;在盐度为20时 ,... 详细信息

在室内不同盐度条件下进行了南美白对虾(Penaeusvannamei)幼虾饲养试验 ,就盐度对南美白对虾生长、成活率及生化成分的影响进行了研究。结果表明 ,盐度对南美白对虾体质量增长率、成活率、饲料系数有显著影响(P<0.05) ;在盐度为20时 ,南美白对虾生长最好 ,不同盐度条件下 ,南美白对虾体内的蛋白质、水分、氨基酸。

关键词：南美白对虾盐度生长生化成分

Azan特殊染色在肾上腺、垂体组织中的应用

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临床与实验病理学杂志 2010年第2期26卷 245-246页

作者：黄澜代小伟徐艳峰秦川中国医学科学院实验动物研究所病理室北京100021

在内分泌组织的病理诊断和研究中,由于常规的HE染色不能够很好的显示垂体、肾上腺的组织形态,经常需要对垂体、肾上腺进行特殊染色以显示各组织学形态.垂体特染方法很多,但试剂配制繁琐,染色步骤多,而肾上腺的特殊染色则通常需要用特殊... 详细信息

在内分泌组织的病理诊断和研究中,由于常规的HE染色不能够很好的显示垂体、肾上腺的组织形态,经常需要对垂体、肾上腺进行特殊染色以显示各组织学形态.垂体特染方法很多,但试剂配制繁琐,染色步骤多,而肾上腺的特殊染色则通常需要用特殊固定液对组织进行早期固定,因此我们尝试用Azan改良方法对垂体及肾上腺进行染色并进行比较.结果表明Azan改良法不仅能很好显示腺垂体和神经垂体各类细胞的组织形态,同时还能清晰显示肾上腺各部分的组织形态,此方法有步骤少、细胞形态清晰、容易诊断等优点,该方法操作方便、容易掌握.

关键词： Azan染色垂体肾上腺