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金线莲miR166b/c调控ArHDZ22转录因子分子机制及功能研究

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金线莲miR166b/c调控ArHDZ22转录因子分子机制及功能研究

作者：金钶浙江农林大学

学位级别：硕士

金线莲[Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.]是一种珍稀名贵的中药材,来源于兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus),具有药用、食用及观赏价值,享有“药王”的美誉。因种子细小,种胚发育不完全,金线莲在自然条件下繁殖极其困难... 详细信息

金线莲[Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.]是一种珍稀名贵的中药材,来源于兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus),具有药用、食用及观赏价值,享有“药王”的美誉。因种子细小,种胚发育不完全,金线莲在自然条件下繁殖极其困难,致使其野生资源匮乏。课题组前期实验从金线莲中克隆得到HD-ZipⅢ转录因子—HDZ22,研究发现,HDZ22具有调控拟南芥生长发育的功能。miR166是一类广泛存在于陆生植物中高度保守的miRNA,可通过与下游靶基因HD-Zip Ⅲ转录因子结合,抑制其表达水平,从而广泛参与调控植物生长发育、响应逆境等生物学过程。目前,尚未见aro-miR166的相关报道,为了深入研究miR166介导HD-Zip Ⅲ与金线莲胚胎发育之间的内在联系,明晰aro-miR166对金线莲胚胎发育的分子调控机制,本研究利用金线莲Small RNA测序对aro-miR166进行了筛选及克隆分析,并对其表达模式与生物学功能进行了探讨,主要研究结果如下:1.基于不同浓度精胺溶液(0.3 mM:LS;30 mM:HS)及清水(Control)处理后的金线莲Small RNA测序文库数据对金线莲miRNA进行分析,共筛选得到2453个miRNA,其中包括2374个Known miRNA和79个Novel miRNA;利用miRNA差异表达分析发现,在LS vs Control中,仅有25个差异表达miRNA显著下调;在HS vs Control中,共有140个上调的差异表达miRNA;在HS vs LS中,共有268个差异表达miRNA,其中35个上调,233个下调。此外,对金线莲miRNA进行靶基因预测,共发现其中2008个miRNA具有靶基因,它们总共调控732个靶基因;对miRNA进行碱基偏好性和家族分析,发现miRNA成熟序列的首位碱基对U具有很强的偏好性,本次测序得到的miRNA共归属于40个MIRNA家族,其中,MIR166基因家族的miRNA最多,共有208个;另有441个miRNA未归属于任何MIRNA家族。2.参考金线莲全长转录组测序数据,筛选得到29个靶向调控HD-Zip Ⅲ的差异表达miR166前体(MIR166),根据成熟体序列分类,将其命名为miR166a-miR166f。通过在线网站进行miR166二级结构预测及系统进化分析,初步确定其潜在的生物学功能;利用qRT-PCR对miR166a-miR166f及HDZ22在不同浓度精胺及清水处理下的金线莲的组织表达模式进行分析,结果发现,miR166a-miR166f及HDZ22在金线莲不同组织部位均有表达,但表达模式存在显著差异;根据miR166二级结构预测、最小自由能等方式筛选,选取MIR166b、MIR166c进行克隆分析并通过后续实验验证其生物学功能。3.为验证aro-miR166对HDZ22的靶向调控,选择MIR166与HDZ22的结合位点进行定点突变,成功得到HDZ22突变序列(m HDZ22)。双荧光素酶报告基因实验表明,同时注射有p CAMBIA1304-MIR166、35S::HDZ22-LUC混合菌液的烟草,其荧光强度较p CAMBIA1304空载、35S::HDZ22-LUC组明显减弱,而p CAMBIA1304-MIR166、35S::m HDZ22-LUC共同表达时,荧光强度有所恢复,这说明MIR166靶向调控HDZ22转录活性,抑制HDZ22对LUC蛋白的表达;qRT-PCR结果显示,以不含p CAMBIA1304-MIR166为阴性对照,在p CAMBIA1304-MIR166、HDZ22-Flag、35S-s GFP-1300菌液共同侵染时,HDZ22的表达量显著降低,这是由于MIR166对HDZ22靶转录本定点切割,从而诱导烟草内HDZ22蛋白降解。4.为探究aro-miR166的生物学功能,利用农杆菌介导的花序浸染法将p HBMIR166b、p HB-MIR166c转入至HDZ22过表达型拟南芥进行异源表达,经过Basta抗性筛选与PCR分子鉴定得到T3代纯合转基因株系。对野生型、HDZ22过表达型及T3代纯合MIR166-HDZ22双过表达型转基因拟南芥进行表型、种子等指标的测量,发现MIR166b、MIR166c过表达延缓了拟南芥生长发育期,出现植株矮化、莲座叶数量减少、雌蕊及雄蕊长度显著减少、种子长度及宽度显著减少、种子重量显著降低等现象,以上说明MIR166b、MIR166c能负调控HDZ22对拟南芥生长发育的作用。

关键词：金线莲 miR166 HD-ZipⅢ 胚胎发育转录后调控

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基于掩码引导与记忆的分割跟踪方法研究

基于掩码引导与记忆的分割跟踪方法研究

作者：周钶燕郑州轻工业大学

学位级别：硕士

随着计算机硬件和机器学习理论的发展,视频目标跟踪技术在无人驾驶、视频侦查、医疗影像分析等领域具有重要的应用价值。同为计算机视觉任务的目标分割能够提供详细的像素级信息,对跟踪器的性能提升大有帮助。本文通过研究分割跟踪算法... 详细信息

随着计算机硬件和机器学习理论的发展,视频目标跟踪技术在无人驾驶、视频侦查、医疗影像分析等领域具有重要的应用价值。同为计算机视觉任务的目标分割能够提供详细的像素级信息,对跟踪器的性能提升大有帮助。本文通过研究分割跟踪算法,探索分割信息在跟踪中的应用,首先使用分割信息解决孪生跟踪框架中的背景干扰问题,其次利用历史帧分割信息解决实际跟踪问题。(1)为了降低背景干扰对孪生跟踪方法的影响,设计了一个掩码引导的背景抑制分割跟踪方法。首先,设计一个掩码感知模块,通过回归损失指导特征的选择,挑选仅对目标区域敏感的浅层特征,从而提高获得掩码的准确性和可靠性。其次,为了利用掩码信息抑制背景干扰,提出掩码引导的模板背景抑制方法和自适应时空上下文策略。前者利用目标掩码过滤模板中的背景干扰,提高目标模板对目标的表征能力;后者通过掩码计算感兴趣目标的分布情况,帮助目标定位。最后,在VOT2016、VOT2018、VOT2019、OTB100和TC128数据集上评估了跟踪器。定量和定性的结果表明,所提方法实现了良好跟踪精度和鲁棒性。(2)为了适应真实跟踪场景,提出一种电力设备分割跟踪方法。首先,设计了基于掩码记忆的L2匹配分割方法,使用负平方欧几里得距离来计算帧间亲和度,利用构建的历史掩码信息进行目标匹配,提升设备的粗分割精度。其次,为了减少记忆冗余,提出变化感知的记忆更新机制,通过图像掩码联合变化度函数评估目标变化程度,设计变化度置信度阈值决策记忆更新策略。最后,将分割策略融入DCF跟踪框架,实现电力设备鲁棒分割跟踪。本文分别在通用数据集VOT2018、无人机数据集UAV123和实际电力场景数据集中验证算法性能。实验结果表明所提出的方法能有效提升无人机巡检精度,并为电力设备安全运行提供技术参考。

关键词：目标跟踪目标分割记忆更新深度学习电力巡检

凝固浴及双疏改性对聚偏氟乙烯膜结构及膜蒸馏性能的影响

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中国科学:化学 2024年

作者：丁齐超董钶狄肖通虎杨杏宁波大学材料科学与化学工程学院鲁汶大学化工系

膜蒸馏(MD)技术在高盐废水处理领域前景广泛.如何获得高性能的MD膜是研究的热点.本文采用复合相分离法(NTIPS)制备了聚偏氟乙烯(PVDF)基膜,探究了不同凝固浴(乙醇、甘油及其混合溶液)对基膜结构和MD性能的影响;进一步考察了基膜通过全... 详细信息

膜蒸馏(MD)技术在高盐废水处理领域前景广泛.如何获得高性能的MD膜是研究的热点.本文采用复合相分离法(NTIPS)制备了聚偏氟乙烯(PVDF)基膜,探究了不同凝固浴(乙醇、甘油及其混合溶液)对基膜结构和MD性能的影响;进一步考察了基膜通过全氟癸基三乙氧基硅烷实现双疏改性后,其MD的渗透通量、盐截留率,以及抗湿润、耐污染性.结果表明,改变凝固浴可对基膜结构进行调控,实现从指状孔向海绵状孔的转变;双疏改性后, PVDF双疏膜在处理同时含盐、含表面活性剂、含油或腐殖酸的复杂料液时,具有优越的抗湿润性能和优良的耐污染性.本研究对于复合相分离过程如何调控PVDF膜孔结构以及膜的双疏改性提供了一种切实可行的思路.

关键词：聚偏氟乙烯双疏膜凝固浴复合相分离法膜蒸馏结构调控

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中国制造产业链集聚的生产率效应

经济问题探索 2024年第4期 103-123页

作者：刘维林颜钶洋南开大学经济与社会发展研究院天津300071

发挥产业链集聚优势以提升中国制造业的全要素生产率是应对全球产业链重组和推进中国产业体系现代化的关键途径。本文利用2003—2015年中国工业企业数据库和《中国投入产出表》的数据,在专业化和多样化空间集聚的理论基础上,提出上下游... 详细信息

发挥产业链集聚优势以提升中国制造业的全要素生产率是应对全球产业链重组和推进中国产业体系现代化的关键途径。本文利用2003—2015年中国工业企业数据库和《中国投入产出表》的数据,在专业化和多样化空间集聚的理论基础上,提出上下游集聚影响全要素生产率的理论假说,构建了基于区位熵和投入产出关联的产业链集聚指标,并运用多种计量模型对理论假说进行检验。结果发现:产业链上游、下游空间集聚能够显著促进产业全要素生产率的提升,且下游空间集聚的作用大于上游空间集聚,该结论在一系列内生性和稳健性检验后依然成立。产业市场集中度发挥了中介机制作用,而固定资产占比下降能够强化产业链空间集聚对全要素生产率提高的促进作用。进一步分析表明,产业链空间集聚对全要素生产率的影响因产业内在发展特点和外部成长环境的不同而存在异质性。本文的研究从产业链集聚视角为推进中国制造业高质量发展和产业链供应链现代化提供了政策启示。

关键词：产业链集聚全要素生产率投入产出关联制造业

基于阶梯碳价和自适应分时电价的电动汽车有序充电

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电力自动化设备 2024年第2期44卷 64-71页

作者：王均黄钶然许潇吴兰姜伟黄明山河南工业大学电气工程学院河南郑州450001 四川大学电气工程学院四川成都610065 河南工业大学机电工程学院河南郑州450001 河南许继仪表有限公司河南许昌461000

将阶梯碳价与分时电价的耦合关系进行内联,提出了一种基于阶梯碳价和自适应分时电价的电动汽车有序充电策略。利用蒙特卡罗方法生成电动汽车的无序充电场景;建立阶梯碳价模型和自适应分时电价模型;以电网日负荷均方差最小、电动汽车用... 详细信息

将阶梯碳价与分时电价的耦合关系进行内联,提出了一种基于阶梯碳价和自适应分时电价的电动汽车有序充电策略。利用蒙特卡罗方法生成电动汽车的无序充电场景;建立阶梯碳价模型和自适应分时电价模型;以电网日负荷均方差最小、电动汽车用户充电总成本最小和发电商碳交易成本最小为目标函数,建立电碳双定价机制下的电动汽车有序充电模型,并采用带精英策略的快速非支配排序遗传算法(NSGA-Ⅱ),结合熵权逼近理想解排序(TOPSIS)模型求解Pareto解集的最优折中解;对4种碳交易机制下的优化结果进行对比分析。仿真结果表明,在有奖励阶梯碳价和自适应分时电价机制下电网负荷波动平抑效果最佳且发电商碳交易成本最小,验证了所提模型的合理性和可行性。

关键词：电动汽车碳交易机制阶梯碳价自适应分时电价有序充电熵权TOPSIS模型 NSGA-Ⅱ 灵敏度分析

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BIM技术在市政路桥设计中的运用探讨

中文科技期刊数据库（文摘版）工程技术 2024年第2期 0080-0083页

作者：冯钶钶河南中平交科研究设计院有限公司河南平顶山467000

在信息化时代的大背景之下,公众对于市政路桥的期望逐步上升,传统的设计方法已经不能满足建筑单位的真实需求。为了保证市政路桥项目的安全性与高效性,需要不断优化现有方案,采用先进技术手段实现市政路桥工程项目的智能化管理。随着各... 详细信息

在信息化时代的大背景之下,公众对于市政路桥的期望逐步上升,传统的设计方法已经不能满足建筑单位的真实需求。为了保证市政路桥项目的安全性与高效性,需要不断优化现有方案,采用先进技术手段实现市政路桥工程项目的智能化管理。随着各种工艺技术的持续创新,BIM技术已经被整合到现代市政路桥设计中。它不仅可以在设计过程中进行数据建模,还可以建立实时动态数据库。结合当前的智能技术、传感技术等,BIM技术可以以建模的方式展示工程,从而打破了传统建设项目设计体系的局限性。在实际应用中,它能够整合设计方案,深入分析各个环节的成本和损失,从而有效地解决建设过程中的设计哲学问题,进而增强建设的经济效益。

关键词： BIM技术市政路桥设计运用

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公路勘察设计新理念在公路设计中的应用

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2024年第5期 0005-0008页

作者：冯钶钶河南中平交科研究设计院有限公司河南平顶山467000

伴随着社会经济迅速发展和科学水平不断升高,我国公路建设工程越来越多,同时也为国民经济持续增长提供了保证。其中公路勘察设计新理念在公路设计工程中也占据着举足轻重的地位。工程开工前,必须分析公路建设项目应用情况,主动勘察设计... 详细信息

伴随着社会经济迅速发展和科学水平不断升高,我国公路建设工程越来越多,同时也为国民经济持续增长提供了保证。其中公路勘察设计新理念在公路设计工程中也占据着举足轻重的地位。工程开工前,必须分析公路建设项目应用情况,主动勘察设计。公路勘察设计时必须以勘察设计新理念来指导公路设计,设计人员既要重视公路质量又要注重公路安全与环保,在公路勘察中要用新理念综合考察,提升勘察设计水平。文章从总结设计经验入手,分析了公路勘察设计新理念的运用,使新理念运用到设计当中,为路桥公路设计提供指导。

关键词：公路勘察勘察理念公路设计应用分析

基于RAD测序技术开发鸦片罂粟地域(品种)特异性SNP位点

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中国法医学杂志 2022年第3期37卷 232-237页

作者：王白石宋炳轲高珊聂昊杨宇晨付钶钶王德兰徐小玉张瑾张颖丛斌沈阳医学院基础医学院辽宁沈阳110034 天津市公安局物证鉴定中心天津300384 公安部物证鉴定中心北京100038 保定市公安局刑侦支队河北保定071000 河北医科大学法医学院河北省法医学重点实验室河北省法医分子鉴定协同创新中心中国医学科学院消化道微生态药理毒理创新单元河北石家庄050017

在我国,鸦片罂粟的违法种植是境内阿片类毒品的主要来源。利用新型、高效的分子标记对鸦片罂粟进行溯源推断可以从源头上对毒品进行铲除,对涉毒案件的侦破具有重要意义。但是,由于地域特异性分子标记的缺乏,我国法庭科学中鸦片罂粟DNA... 详细信息

在我国,鸦片罂粟的违法种植是境内阿片类毒品的主要来源。利用新型、高效的分子标记对鸦片罂粟进行溯源推断可以从源头上对毒品进行铲除,对涉毒案件的侦破具有重要意义。但是,由于地域特异性分子标记的缺乏,我国法庭科学中鸦片罂粟DNA溯源推断方法及体系一直处于空白阶段。基于此,本研究应用RAD简化测序技术对国内3个地区鸦片罂粟植株及1个特殊的蒂巴因品种进行了群体简化测序和组装,并对其SNP位点进行了开发和特异性检测。鸦片罂粟各地域(品种)间的特异性SNP位点结果分别为:甘肃品种(bai)1988个,蒂巴因品种(T)9959个,郑州品种(ZZ)12080个;武汉品种(WH)3110个。本研究获得的一系列罂粟地域(品种)特异性SNP位点,为今后罂粟溯源体系的构建提供了充足的分子标记支持。RAD简化测序技术更是为毒品原植物溯源体系的构建提供了一种理想的特异性位点获取方法,对于涉毒案件中及时发现、铲除毒品源头具有十分重要的意义。

关键词：罂粟 RAD简化测序分子标记 SNP位点

5种STEMI风险评分1年内心血管不良事件预测价值的比较

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中华急诊医学杂志 2024年第4期33卷 558-565页

作者：王伊钶宋剑平沈建通程继芳王雅朱霞浙江大学医学院附属第二医院护理部杭州川310009 湖州师范学院湖州313000 湖州市重大慢性疾病精准防控重点实验室湖州313000 宁波市第一医院心内科宁波315000

ST段抬高型心肌梗死(ST elevation myocardial infarction,STEMI)属于高危的心血病。据中国疾控中心预计,中国急性心肌梗死患者将从2010年的810万增加至2260万,病死率不断增加,预后差,毅然成为重大公共卫生问题。

关键词： ST段抬高型心肌梗死心血管不良事件 STEMI 中国疾控中心预测价值预后差风险评分