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噬菌体临床应用监管法规的现状及展望

中国抗生素杂志 2024年第1期49卷 26-34页

作者：姜昕宇吴楠楠卢曙光朱同玉乐率陆军军医大学基础医学院微生物学教研室微生物工程重庆市高校重点实验室重庆400038 创噬纪(上海)生物技术有限公司上海201100 上海市公共卫生临床中心上海噬菌体与耐药研究所上海201508 复旦大学附属中山医院上海市器官移植重点实验室上海200030

抗生素的广泛使用使得耐药和泛耐药病原菌不断涌现,对全球公共卫生造成了巨大威胁。目前,噬菌体治疗已成为抗击多重耐药菌的重要手段之一,在欧美国家和中国已经进行了临床应用。然而,中国目前尚未形成针对噬菌体治疗的专项监管法规,研... 详细信息

抗生素的广泛使用使得耐药和泛耐药病原菌不断涌现,对全球公共卫生造成了巨大威胁。目前,噬菌体治疗已成为抗击多重耐药菌的重要手段之一,在欧美国家和中国已经进行了临床应用。然而,中国目前尚未形成针对噬菌体治疗的专项监管法规,研究者发起的临床研究成为我国开展噬菌体治疗的主要形式,这制约了我国噬菌体治疗的进一步发展和广泛应用,亟需在当前的药品监管框架下,制定适当的噬菌体监管法规。因此,本文回顾了格鲁吉亚、美国、英国、比利时和中国的噬菌体治疗现状和监管法规框架,旨在为噬菌体临床治疗的监管提供参考。完善的噬菌体临床应用监管法规将极大促进噬菌体治疗在中国的推广和应用,也必将有效地遏制细菌耐药危机,更好地维护人民群众的生命健康安全。

关键词：噬菌体治疗药品立法监管新药申报限制类医疗技术噬菌体制剂生产

负载锌离子的复合水凝胶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第9期40卷 866-875页

作者：潘泽平石云龙袁志强彭毅志安中莲乐率龚雅利陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆400038 重庆大学附属江津医院急诊科重庆402260 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室微生物工程重庆市高校重点实验室重庆400038

目的探讨负载锌离子的复合水凝胶(以下简称含锌水凝胶)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及其机制。方法该研究为实验研究。制备聚(甘油癸二酸酯)-共-聚乙二醇-共聚-邻苯二酚/季铵化壳聚糖水凝胶(以下简称单纯水凝胶)和在单纯水... 详细信息

目的探讨负载锌离子的复合水凝胶(以下简称含锌水凝胶)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损感染创面的作用及其机制。方法该研究为实验研究。制备聚(甘油癸二酸酯)-共-聚乙二醇-共聚-邻苯二酚/季铵化壳聚糖水凝胶(以下简称单纯水凝胶)和在单纯水凝胶的基础上添加锌离子的疏松多孔且具有良好黏附性的固态含锌水凝胶。计算用磷酸盐缓冲液(PBS)浸泡14 d后含锌水凝胶中锌离子的释放率。检测用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养2 h后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)浓度。利用酶标仪检测单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率,反映清除氧自由基能力。测量用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养24 h后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)形成的血管长度。采用细胞计数试剂盒8检测用单纯水凝胶、含锌水凝胶、PBS培养24 h后L929细胞的活力。将小鼠红细胞悬液分为用PBS处理的空白对照组和用相应溶液处理的单纯水凝胶组、含锌水凝胶组和Triton X-100组,利用酶标仪检测孵育2 h后红细胞的溶血情况并计算溶血率。以上实验样本数均为3。取21只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,在背部脊柱对称位置各制备1个用MRSA感染的全层皮肤缺损创面。将小鼠分为滴加PBS的空白对照组和用相应水凝胶处理的单纯水凝胶组和含锌水凝胶组。伤后3 d,检测空白对照组、单纯水凝胶组、含锌水凝胶组小鼠创面中的细菌浓度,样本数为4。于伤后0(即刻)、3、7、14 d,大体观察小鼠创面感染情况并计算伤后3、7、14 d创面愈合率,样本数为5。伤后14 d,行苏木精-伊红染色和Masson染色分别检测小鼠创面中的新生上皮和胶原生成情况,行免疫荧光染色检测小鼠创面中血管新生及M2型巨噬细胞分布情况。结果浸泡14 d后,含锌水凝胶中锌离子的释放率为(70.5±4.6)%。与用含锌水凝胶比较,用PBS和单纯水凝胶培养2 h后细菌浓度均明显升高(P0.05)。伤后3 d,含锌水凝胶组小鼠创面中的细菌浓度明显低于空白对照组和单纯水凝胶组(P值均<0.05)。伤后3~14 d,3组小鼠创面均逐渐愈合,含锌水凝胶组小鼠伤后14 d创面基本愈合。伤后7 d,含锌水凝胶组小鼠创面愈合率为(72.4±8.4)%,明显高于空白对照组和单纯水凝胶组的(31.6±6.7)%、(44.7±5.4)%(P值均<0.05)。伤后14 d,含锌水凝胶组小鼠创面愈合率为(92.7±4.3)%,明显高于空白对照组的(73.5±7.4)%,P<0.05。伤后14 d,与空白对照组和单纯水凝胶组相比,含锌水凝胶组小鼠创面的新生表皮长度更长、厚度更厚,胶原沉积更多,新生血管和M2型巨噬细胞分布更丰富。结论含锌水凝胶具有良好的生物相容性、清除氧自由基能力和体内外抗菌效果、促血管生成能力,可持续缓释锌离子,促进创面再上皮化及胶原合成,从而促进小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合。

关键词：生物相容性材料水凝胶感染糖尿病,实验性锌离子抗菌性创面修复

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铜绿假单胞菌噬菌体治疗的研究进展

中国抗生素杂志 2017年第10期42卷 814-820页

作者：杨雨卉乐率第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038

噬菌体是专门裂解细菌的病毒,有望用于治疗超级耐药细菌感染。截止2017年1月10日,Pub Med数据库共存有1900多株噬菌体基因组序列,其中铜绿假单胞菌噬菌体为202株,约占所有测序噬菌体的十分之一。铜绿假单胞菌是临床中最常见的条件致病... 详细信息

噬菌体是专门裂解细菌的病毒,有望用于治疗超级耐药细菌感染。截止2017年1月10日,Pub Med数据库共存有1900多株噬菌体基因组序列,其中铜绿假单胞菌噬菌体为202株,约占所有测序噬菌体的十分之一。铜绿假单胞菌是临床中最常见的条件致病菌之一,且抗生素耐药情况日趋严重。2017年2月,世界卫生组织将铜绿假单胞菌列为迫切需要新型抗生素来治疗的超级细菌之一。因此,铜绿假单胞菌噬菌体及其治疗耐药菌感染的研究备受关注。本文先就铜绿假单胞菌噬菌体的研究情况进行分析,然后对铜绿假单胞菌噬菌体治疗现状进行综述。

关键词：铜绿假单胞菌抗生素耐药噬菌体治疗

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医学微生物学新生研讨课的经验与分析

重庆医学 2017年第18期46卷 2581-2582页

作者：乐率谭银玲胡晓梅第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038

新生研讨课起源于美国大学,最早可以追溯到1882年在美国肯塔基的里学院（Lee College）开设的一门新生小班研讨课。该课程由大一新生自愿参加,且不计学分。经过不断地发展和完善,新生研讨课目前主要分为适应性转换与学术性转换两种模式。

关键词：新生研讨课医学微生物学美国研究型大学基础医学课程教师教学方法自主学习在美国本科教育质量科研思维文献查阅

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细菌耐受噬菌体感染的分子机制研究进展

微生物学通报 2021年第9期48卷 3249-3260页

作者：钟卓君饶贤才乐率陆军军医大学基础医学院微生物学教研室重庆400038

噬菌体是能感染细菌的病毒。为了抵抗噬菌体的感染,细菌进化出多种抵抗噬菌体感染的机制,这些机制的阐析极大地促进了基因编辑领域的发展,同时也为噬菌体治疗的开展奠定了基础。本文就细菌针对噬菌体感染的各个环节所进行的抵抗及其分... 详细信息

噬菌体是能感染细菌的病毒。为了抵抗噬菌体的感染,细菌进化出多种抵抗噬菌体感染的机制,这些机制的阐析极大地促进了基因编辑领域的发展,同时也为噬菌体治疗的开展奠定了基础。本文就细菌针对噬菌体感染的各个环节所进行的抵抗及其分子机制进行了简要综述,同时讨论了这些防御系统的存在对细菌自身的影响,分析了当前细菌耐受噬菌体机制研究存在的局限性,并对未来研究进行了展望。

关键词：噬菌体耐受基因编辑超感染排斥限制-修饰系统 CRISPR系统流产感染噬菌体诱导性染色体岛

利用高通量测序拼接技术研究病毒准种进化过程

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利用高通量测序拼接技术研究病毒准种进化过程

中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：乐率第三军医大学基础部微生物学教研室

目的病毒由于其突变率较高,因此在一个群体中会形成具有多种不同序列、但却有很高同源性(同源性≥95%)的变异株病毒群体,即称为准种。准种的研究金标准是克隆后测序,一般挑取20-30个克隆进行验证,可以检测到5%以上的准种序列。但是比例...

目的病毒由于其突变率较高,因此在一个群体中会形成具有多种不同序列、但却有很高同源性(同源性≥95%)的变异株病毒群体,即称为准种。准种的研究金标准是克隆后测序,一般挑取20-30个克隆进行验证,可以检测到5%以上的准种序列。但是比例更小的准种序列则无法获得。因此,人们对准种的认识还不够深入。方法本研究发明了一种新型的测序方法 (Tag Linkage Deep Sequencing),可以将高通量测序的读

关键词：

来源： cnki会议评论

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铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的分离与鉴定

微生物学通报 2013年第4期40卷 609-616页

作者：张琳乐率卢曙光姚新月赵岩王竞谭银玲胡福泉李明第三军医大学基础部微生物教研室重庆400038

【目的】鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的生物学特性。【方法】双层琼脂培养法制备PaP4的单个噬斑,观察噬斑特点;用聚乙二醇8000浓缩PaP4颗粒后,再用氯化铯密度梯度离心纯化;用透射电子显微镜观察磷钨酸负染色的PaP4颗粒;提取... 详细信息

【目的】鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的生物学特性。【方法】双层琼脂培养法制备PaP4的单个噬斑,观察噬斑特点;用聚乙二醇8000浓缩PaP4颗粒后,再用氯化铯密度梯度离心纯化;用透射电子显微镜观察磷钨酸负染色的PaP4颗粒;提取PaP4基因组核酸,通过限制性内切酶图谱分析其核酸类型;按照感染复数(MOI)分别为0.000 1、0.001、0.01、0.1、1和10加入噬菌体纯培养液和宿主菌,充分裂解细菌后,测定噬菌体滴度;以MOI=10的比例加入噬菌体及宿主菌,进行一步生长实验,绘制一步生长曲线。【结果】PaP4的噬斑直径约3 mm 5 mm,圆形透明边缘清晰;PaP4噬菌体呈多面体立体对称的头部,直径约50 nm,有一个约30 nm的短尾;限制性酶切实验表明PaP4基因组为双链DNA;当MOI为0.001时PaP4感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高;用一步生长曲线描绘了其生长特性。【结论】PaP4属dsDNA短尾科裂解性噬菌体;最佳感染复数是0.001;由一步生长曲线得出感染宿主菌的潜伏期是25 min,裂解期是20 min,平均裂解量是150。

关键词：铜绿假单胞菌噬菌体裂解性噬菌体短尾病毒科最佳感染复数一步生长曲线

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噬菌体培养与鉴定方法研究进展

中国抗生素杂志 2022年第9期47卷 872-878页

作者：郭文琼卢家辉潘伍亮乐率成都医学院护理学院成都610500 成都医学院临床医学院成都610500 陆军军医大学基础医学院微生物学教研室重庆400038

噬菌体是地球上数量最多的生命体,不仅广泛存在于自然界,也大量存在于人体之中。但是,目前分离、鉴定的噬菌体数量却仅有数万个。虽然宏基因组技术的出现为探究噬菌体提供了高通量的方法,但是宏基因组测序结果中,大量噬菌体序列功能未知... 详细信息

噬菌体是地球上数量最多的生命体,不仅广泛存在于自然界,也大量存在于人体之中。但是,目前分离、鉴定的噬菌体数量却仅有数万个。虽然宏基因组技术的出现为探究噬菌体提供了高通量的方法,但是宏基因组测序结果中,大量噬菌体序列功能未知,也不知道其来源于何宿主菌,是一个亟须研究的“黑匣子”。微生物的分离培养是研究微生物的起点,噬菌体的研究亦是如此。本文首先对噬菌体分离、培养与鉴定研究进行总结,然后对裂解性和溶原性噬菌体分离方法进行归纳和分析,为分离新的噬菌体提供较为全面的方法学综述。

关键词：噬菌体分离鉴定微生物组噬菌体组溶原性噬菌体

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噬菌体遗传改造技术研究进展

生命的化学 2017年第2期37卷 171-175页

作者：谢晓渝乐率第三军医大学大坪医院野战外科研究所急诊科重庆400038 第三军医大学基础部微生物学教研室重庆400038

噬菌体在20世纪初被发现时,其抗感染的潜力就受到极大重视。但随着抗生素的问世,噬菌体治疗被逐渐忽略。近年来,多重耐药菌的不断出现和新型抗生素的缺乏使得噬菌体治疗再次受到全球关注。对噬菌体进行精确的遗传改造可以使之更好的发... 详细信息

噬菌体在20世纪初被发现时,其抗感染的潜力就受到极大重视。但随着抗生素的问世,噬菌体治疗被逐渐忽略。近年来,多重耐药菌的不断出现和新型抗生素的缺乏使得噬菌体治疗再次受到全球关注。对噬菌体进行精确的遗传改造可以使之更好的发挥抗感染作用。此外,噬菌体通过遗传改造还可以用于药物传递、疫苗展示、病原体诊断等众多生物医药领域,具有极大的应用前景。本文着重对噬菌体遗传改造技术及其应用进展进行综述。

关键词：噬菌体遗传改造噬菌体治疗