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痘苗病毒滴度测定用国家标准品的制备

中国生物制品学杂志 2012年第9期25卷 1099-1101,1105页

作者：黄维金朱蓉赵晨燕徐静万延民齐影刘强王文波温智恒周艳孟淑芳俞永新王佑春中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室北京100050 武汉生物制品研究所有限责任公司武汉430060 北京生物制品研究所有限责任公司北京100024 复旦大学上海市公共卫生临床中心上海201508 吉林大学生命科学学院长春130012

目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2... 详细信息

目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度设5个平行孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘苗病毒滴度进行赋值。检测病毒标准品于不同温度下保存不同时间的稳定性,并对病毒标准品的各项质量指标进行检定。结果 4个实验室共测定44次,4个实验室间的检测结果差异无统计学意义(P>0.05),各实验室检测结果的几何平均数为3.05×106PFU/ml,95%CI为2.00×106～4.65×106PFU/ml,标准差为0.09,总变异系数1.41%。制备的痘苗病毒标准品于4℃可稳定放置10 d,37℃放置稳定性较差。制备的痘苗病毒标准品装量检查合格(1 ml/支);pH值为6.9;无菌试验合格;分装重量精密性为0.95%。结论制备的痘苗病毒标准品可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。

关键词：痘苗病毒蚀斑滴定标准品

HIV-1 AE重组型疫苗构建及免疫原性研究

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中华疾病控制杂志 2010年第9期14卷 831-835页

作者：张聪优万延民仇超黄杨阮力许雪梅徐建青中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物物理与结构生物学系北京100073 复旦大学附属上海市公共卫生临床中心上海201508

目的利用AE亚型的膜蛋白,研发抗HI V-1 AE重组型的疫苗并进行免疫原性评价。方法构建表达中国流行株97CNGX2F(HI V-1 AE2F)包膜蛋白gp140的重组痘苗病毒rVVT140AE。使用表达gp140的DNA疫苗和rVVT140AE用初免-加强方式免疫小鼠。免疫结... 详细信息

目的利用AE亚型的膜蛋白,研发抗HI V-1 AE重组型的疫苗并进行免疫原性评价。方法构建表达中国流行株97CNGX2F(HI V-1 AE2F)包膜蛋白gp140的重组痘苗病毒rVVT140AE。使用表达gp140的DNA疫苗和rVVT140AE用初免-加强方式免疫小鼠。免疫结束后第2周处死小鼠,分别检测特异性抗体滴度和特异性T细胞反应。结果本疫苗所活化的特异性抗体滴度在3 200和51 200之间,几何平均值为11 143;总T细胞免疫反应强度为(1 918±442)SFCs/106脾细胞,其中针对env1、env2、env3、env4肽池的免疫反应强度分别为(1 280±330)SFCs/106脾细胞,(66±16)SFCs/106脾细胞,(163±34)SFCs/106脾细胞和(409±96)SFCs/106脾细胞,均显著高于空载体对照组(<10 SFCs/106脾细胞)。结论本实验构建的HI V-1 AE2F株包膜蛋白gp140重组痘苗病毒疫苗可作为针对我国HI V-1流行株的候选疫苗免疫原。

关键词： HIV疫苗包膜蛋白疫苗,合成

对定量检测整合HIV-1 DNA的PCR方法的评价

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国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册） 2003年第6期26卷 278-278页

作者：万延民

肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响

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微生物学免疫学进展 2020年第2期48卷 8-15页

作者：贾丽秋王静刘洋杨淑凤黄玉昆张飞万延民马郁芳大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室辽宁大连116044 复旦大学附属华山医院感染科上海200040 大连医科大学基础医学院微生物学教研室辽宁大连116044 佳木斯大学基础医学院免疫学教研室黑龙江佳木斯154007

目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)肽聚糖脱乙酰酶Rv1096对分枝杆菌与宿主细胞相互作用的影响。方法利用过表达Rv1096基因的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)Rv1096,通过差速离心及胰蛋白酶消化试验,确定Rv1096蛋白的亚细胞定位;通过氨基酸定点突变联合伴刀豆凝集素A(Concanavalin A, ConA)免疫印迹确定Rv1096的O-甘露糖基化位点;运用刃天青显色法检测MSRv1096对溶菌酶的抵抗力;通过巨噬细胞感染试验,分析了Rv1096对耻垢分枝杆菌细胞内存活能力和宿主细胞炎症应答的影响。结果确定了Rv1096在重组耻垢分枝杆菌MSRv1096中的亚细胞定位在细胞壁;发现Rv1096蛋白含有三个O-甘露糖基修饰位点(265Thr,266Ser,267Ser);细胞外测试结果表明,Rv1096能增强耻垢分枝杆菌对溶菌酶的抵抗能力,最低抑菌质量浓度从1.5 mg/mL升至2.5 mg/mL,而细胞感染显示其并不能显著增强耻垢分枝杆菌在人单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)内的存活能力;定量PCR检测结果显示,过表达Rv1096的耻垢分枝杆菌刺激THP-1细胞分泌炎症因子(TNF-α,IL-6和IL-1β)的能力显著下降。通过平行对比证明若删除O-甘露糖基化位点(265Thr,266Ser,267Ser),对Rv1096基因功能无显著影响。结论 Rv1096是一个细胞壁相关蛋白,具有三个O-甘露糖基化位点。过表达Rv1096对耻垢杆菌在宿主细胞内的存活能力无显著影响,但能够降低宿主细胞对耻垢分枝杆菌的炎症因子应答,且上述功能不受O-甘露糖基化修饰影响。

关键词：结核分枝杆菌肽聚糖脱乙酰酶 O-甘露糖基化蛋白溶菌酶抵抗巨噬细胞

GBV-C／HIV共感染对AIDS疾病进程和HIV病毒复制的影响

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病毒学报 2008年第1期24卷 17-21页

作者：祝婷丁心平万延民刘连兴彭虹黄相刚冯晏萌邬超阮玉华韩丽凤邢辉王建军苏斌徐臣徐建青邵一鸣中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京100050 阜阳市疾病预防控制中心安徽阜阳236000 安徽省疾病预防控制中心安徽合肥230061

近年来,一些研究发现,GBV-C/HIV共感染可延缓HIV感染疾病的进程,然而也有一些研究得出不同的结论。本研究收集我国安徽省阜阳市HIV血清学阳性的既往献血员血浆标本,对其进行GBV-C感染的检测,研究GBV-C/HIV共感染与HIV病毒载量和CD4+T淋... 详细信息

近年来,一些研究发现,GBV-C/HIV共感染可延缓HIV感染疾病的进程,然而也有一些研究得出不同的结论。本研究收集我国安徽省阜阳市HIV血清学阳性的既往献血员血浆标本,对其进行GBV-C感染的检测,研究GBV-C/HIV共感染与HIV病毒载量和CD4+T淋巴细胞绝对计数的关系。用RT-PCR和酶联免疫法检测,在203人中检出GBV-C感染52例,显示该人群GBV-C的感染率为25.6%,男性感染者(35例,67.3%)高于女性感染者(17例,32.7%)。分析发现,GBV-C感染与未感染两组患者的CD4+T淋巴细胞绝对计数和HIV病毒载量数据均无统计学差异。本研究中的HIV-1感染者均未接受ART治疗,因而排除了治疗对疾病进展的影响。研究结果显示,在HIV-1感染晚期的献血人群,GBV-C/HIV共感染对CD4细胞和病毒复制水平无显著影响。由于本研究对象中无HIV-1早期感染者,因而不能判断GBV-C在HIV-1感染的早期对疾病进展有无影响。

关键词： GBV-C HIV CD4^+T淋巴细胞计数疾病进展

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痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

痘苗病毒滴度测定国家标准品的研制

针灸医学：点亮传统智慧新灯塔，开启学科建设新航道

2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：黄维金朱蓉赵晨燕李媛媛万延民齐影刘强王文波温智恒周艳孟淑芳王佑春俞永新中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室武汉生物制品研究所北京生物制品研究所复旦大学上海市公共卫生临床中心吉林大学生命科学学院

目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国5个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度平行5孔,计算... 详细信息

目的研制病毒载体疫苗滴度测定用痘苗病毒滴度国家标准品。方法制备一份痘病毒母液,加入保护剂,分装冻存,分发至我国5个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度平行5孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘病毒滴度进行赋值。对标准品进行分装重量精度、装量、外观、pH值、无菌试验等检测,并考核稳定性。结果利用CEF细胞培养制备了一份大量的痘苗病毒标准品,分装重量精度为0.95%;装量检查合格:1ml/支;pH值为6.9;无菌试验合格。经过5个实验室的56次测定,各试验室间的结果差异有非常显著的统计学意义（F=34.55,P＜0.01）。剔除异常实验室数据,计算病毒滴度的几何均数为6.48,标准差为0.09,总变异系数1.41%,95%的可信区间为:6.30-6.67。病毒滴度为3.05×106PFUml-1,95%可信区间为:2.00×106-4.65×106PFUml-1。-20℃放置1年滴度无变化,4℃可稳定放置10d,37℃稳定性差,1d即开始滴度明显下降。结论该痘病毒标准品符合要求,可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。

关键词：重组痘苗病毒蚀斑滴定标准品

来源： cnki会议评论

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中国针灸 2025年第01期 1-2页

作者：刘保延世界针灸学会联合会

在中华医学的浩瀚长河中，针灸医学如同一座璀璨的灯塔，历经千年而光芒不减。如今，在现代科技浪潮的推动下，我们有责任让这座传统智慧的灯塔更加明亮，为针灸医学的学科建设开辟崭新的航道。针灸作为中华民族传统医学瑰宝，经过数千...

在中华医学的浩瀚长河中，针灸医学如同一座璀璨的灯塔，历经千年而光芒不减。如今，在现代科技浪潮的推动下，我们有责任让这座传统智慧的灯塔更加明亮，为针灸医学的学科建设开辟崭新的航道。针灸作为中华民族传统医学瑰宝，经过数千年的发展，以经络学说为核心、穴位刺激为手段，构建起独特的理论体系与治疗方法。经络，恰似人体内部的神秘网络，连接着各个脏腑器官与身体部位。通过针刺或艾灸特定穴位，调节经络气血运行，实现治疗疾病与保健养生的目的。

关键词：

北京松山国家级自然保护区野猪种群遗传结构初步分析

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兽类学报 2025年

作者：唐小澄杨婧董艳民张洪亮沈延京王小萌鲍伟东北京林业大学林木育种与生态修复国家工程中心北京林业大学生物科学与技术学院北京松山国家级自然保护区管理处北京市永定河休闲森林公园管理处

随着北京市自然生态环境逐渐改善，野猪(Sus scrofa)的种群数量不断增长，造成局部危害，对野猪种群遗传结构进行监测有助于制定种群长期防控管理措施。本研究使用非损伤采样和微卫星分子标记技术，对北京松山国家级自然保护区野猪种群... 详细信息

随着北京市自然生态环境逐渐改善，野猪(Sus scrofa)的种群数量不断增长，造成局部危害，对野猪种群遗传结构进行监测有助于制定种群长期防控管理措施。本研究使用非损伤采样和微卫星分子标记技术，对北京松山国家级自然保护区野猪种群的性别结构、遗传多样性和遗传距离进行分析，了解种群未来发展趋势。结果表明，88份疑似野猪粪便样品鉴定出42只个体，其中35只雌性、7只雄性，雌雄性比为5:1。种群遗传多态信息含量(PIC)在0.55～0.81之间，平均为 0.71，具有适中的遗传多样性。基于微卫星位点间的遗传距离构建进化树，42只个体呈现3个分支，聚类分析结果也显示出该种群个体按照3个遗传支系进行聚类的现象。总体上看，松山地区的野猪群体在遗传结构方面存在一定程度的分离，但并未到达明显分化的程度，仍属于一个种群。对近交系数的分析显示，松山野猪种群总体呈现中度近交状态，将对种群发展产生一定抑制作用。本研究为了解北京地区野猪种群的遗传结构提供了基础资料，对于分析该地区野猪的种群密度变化和预测种群发展趋势有重要参考价值。

关键词：野猪非损伤性取样微卫星分子标记种群遗传多样性保护区管理

基于灰色关联法的接触线磨耗及其影响因素关联性分析

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城市轨道交通研究 2025年

作者：郭英强祁文延中车长春轨道客车股份有限公司西南交通大学轨道交通运载系统全国重点实验室

[目的]地铁系统存在接触线异常磨耗问题，有必要探讨弓网系统各重要数据与接触线磨耗厚度之间的数据关联程度。[方法]在实际线路进行弓网试验，测得动态接触力、列车运行速度、滑板垂向加速度、燃弧持续时间、母线电流、接触网拉出值及... 详细信息

[目的]地铁系统存在接触线异常磨耗问题，有必要探讨弓网系统各重要数据与接触线磨耗厚度之间的数据关联程度。[方法]在实际线路进行弓网试验，测得动态接触力、列车运行速度、滑板垂向加速度、燃弧持续时间、母线电流、接触网拉出值及接触线磨耗厚度等实测数据，采用灰色关联法分析各因素对接触线磨耗厚度的影响占比。[结果及结论]列车运行速度直接影响接触线的磨耗厚度，其影响占比最大，动态接触力次之，其他因素按影响占比由大到小排序为燃弧持续时间、母线电流、接触网拉出值、滑板垂向加速度。

关键词：地铁接触线磨耗检测灰色关联法