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Effects of Erlong Zuoci Pill (耳聋左慈丸) and Its Disassembled Prescriptions on Gentamicin-induced Ototoxicity Model in vitro

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Chinese Journal of Integrative Medicine 2010年第3期16卷 258-263页

作者：董杨曹碧茵王静丁大连韩志芬施建蓉 Shanghai University of Traditional Chinese Medicine Hearing Research Lab 215 Parker HallSUNY University at BuffaloBuffaloNY 14214USA

Objective：To study the effects of Erlong Zuoci Pill（耳聋左慈丸,ELZCP）and its disassembled prescriptions on gentamicin（GM）-induced ototoxicity model in ***：After the spiral organ of cochleae of newborn mice（postnatal days：2-3）cultured for 24 h,GM alone or combined with water extracting-alcohol precipitating solution of ELZCP or with its disassembled prescriptions was *** cells were observed under a fluorescence microscope after TRITC-phalloidin staining,and the cochlear hair cell loss rate was calculated by counting the whole cochlear hair cells and analyzed by whole cochlear hair cells analyzing ***： GM induced cochlear outer hair cells（OHCs）and inner hair cells（IHCs）injuries in a dose-dependent manner, and they were significantly different as compared with those in the normal control group（P〈0.05,P〈0.01）. ELZCP at the concentration of 0.003-3 mg/mL could decrease the hair cells loss induced by the 0.3 mmol/L GM （P〈0.05,P〈0.01）,the effects was in a dose-dependent manner,and the concentration of 0.3 mg/mL showed the optimal protective *** the ELZCP disassembled prescriptions,Liuwei-Dihuang could decrease OHC loss rate than that in the 0.3 mmol/L GM model group（P〈0.05）,but the OHC loss rate was still higher than that in the ELZCP group（P〈0.01）,which indicated that the protective effect of hair cells by Liuwei-Dihuang was not better than that of *** decreased OHC loss rate from 72.1%±3.7%to 58.8%±8.2%（P〈0.05）. Conclusions：ELZCP could play a role in antagonizing the injury of cochlear hair cells induced by GM ototoxicity, and its disassembled prescriptions,Liuwei-Dihuang was the main component to protect the cochlear hair cells from GM-induced ototoxicity,and Magnetitum combined with Radix Bupleurui could strengthen the action of the whole prescription; Poria could reduce GM-induced OHC loss.

关键词： Eriong Zuoci Pill gentamicin ototoxicity hair cell cochlear culture disassembled prescriptions

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铜山县卫生技术人才结构调查

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中国卫生经济 1997年第4期16卷 25-27页

作者：陈玉柱潘颖丁大连江苏省铜山县卫生局 221100 江苏省铜山县卫生学校 221100

铜山县卫生局对本县29个乡镇卫生院的卫生技术(以下简称卫技)人才结构进行了全面调查,旨在为制定卫生服务决策和人才培养计划提供科学依据。现将有关情况报告如下: 一、调查方法与实施本次调查方式以报表方式进行,对铜山县29个乡镇卫... 详细信息

铜山县卫生局对本县29个乡镇卫生院的卫生技术(以下简称卫技)人才结构进行了全面调查,旨在为制定卫生服务决策和人才培养计划提供科学依据。现将有关情况报告如下: 一、调查方法与实施本次调查方式以报表方式进行,对铜山县29个乡镇卫生院所有卫技人才(重点是50岁以下的卫技人才)进行了调查。明确调查的目的和意义,统一布置调查的步骤和方法,指定各项工作的责任人,调查报表由填表者和领导签字,单位盖章。资料记录、整理的每一个环节皆经他人两次核对,在基本情况分析的基础上,又进一步进行了分层分析。

关键词：铜山县卫生人才人才结构调查医院

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万古霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞影响的实验研究

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吉林大学学报（医学版） 2002年第1期28卷 27-29页

作者：金昕任丽丽王苹丁大连杜宝东吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理教研室美国纽约州立大学布法罗听力研究中心

目的 :通过内耳器官离体培养技术来观察万古霉素对体外培养耳蜗毛细胞的影响 ,探讨万古霉素耳毒性。方法 :选用生后 2～ 4 d的昆明小鼠做为实验对象 ,应用鼠尾胶包埋法离体培养耳蜗基底膜 ,通过若单明 -鬼笔环太染色技术定量观察不同浓... 详细信息

目的 :通过内耳器官离体培养技术来观察万古霉素对体外培养耳蜗毛细胞的影响 ,探讨万古霉素耳毒性。方法 :选用生后 2～ 4 d的昆明小鼠做为实验对象 ,应用鼠尾胶包埋法离体培养耳蜗基底膜 ,通过若单明 -鬼笔环太染色技术定量观察不同浓度的万古霉素对耳蜗毛细胞的影响。结果 :给予万古霉素后的离体耳蜗内、外毛细胞未发生坏死和缺失 ,毛细胞密度与正常对照组无差别。结论

关键词：毛细胞器官培养万古霉素耳毒性

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Cu／ZnSOD基因敲除小鼠耳蜗易于出现mtDNA缺失突变—FOS对组织损伤的特异性研究

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Chinese Medical Journal 2002年第2期 258-263页

作者：张欣欣丁大连等中国人民解放军总医院耳鼻咽喉科，北京100853 美国纽约州Buffalo大学听力及聋病康复中心

目的：探讨ROS对各种组织mtDNA的损伤情况，耳蜗mtDNA是否为ROS损伤的标靶。方法：应用套式PCR及分子克隆测序技术对10只Sod1基因敲除小鼠及5只同系野生型小鼠耳蜗、脑、肝脏、肾脏、心脏及皮肤组织进行研究。结果：1.各组mtDNA可检测到... 详细信息

目的：探讨ROS对各种组织mtDNA的损伤情况，耳蜗mtDNA是否为ROS损伤的标靶。方法：应用套式PCR及分子克隆测序技术对10只Sod1基因敲除小鼠及5只同系野生型小鼠耳蜗、脑、肝脏、肾脏、心脏及皮肤组织进行研究。结果：1.各组mtDNA可检测到3种缺失，常见的缺失为mtDNA3867bp和mtDNA3726bp缺失，mtDNA4236bp缺失不常见。***缺失在不同组织的含量有明显的不同，肝脏和肾脏组织含量最高，耳蜗、心脏和大脑组织其次，脾脏及皮肤组织含量最低。与野生型小鼠比较，Sod1基因敲除小鼠mtDNA在不同组织的缺失量是野生型小鼠的3-20倍，其中耳蜗组织mtDNA缺失量约是WT小鼠的15倍。结论：缺乏Sod1的保护，ROS可以攻击各种组织mtDNA，但具有明显的组织特异性，耳蜗mtDNA是其损害的敏感标靶。

关键词： Cu/ZnSOD基因基因敲除耳蜗基因突变组织特异性创伤

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前庭毛细胞的反相激活模式

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中华耳科学杂志 2017年第6期15卷 715-720页

作者：丁大连亓卫东 Richard Salvi Center for Hearing and Deafness State University of New York at Buffalo 复旦大学附属华山医院耳鼻咽喉头颈外科

分布在内耳前庭各个终器的感觉毛细胞可分为两种类型,它们分别是I型毛细胞和II型毛细胞。这两种毛细胞无论是在静纤毛的长度,还是毛细胞细胞体的形状,或者神经末梢的连接方式以及与之相联系的前庭神经元都不一样。前庭毛细胞感受重力或... 详细信息

分布在内耳前庭各个终器的感觉毛细胞可分为两种类型,它们分别是I型毛细胞和II型毛细胞。这两种毛细胞无论是在静纤毛的长度,还是毛细胞细胞体的形状,或者神经末梢的连接方式以及与之相联系的前庭神经元都不一样。前庭毛细胞感受重力或体位改变刺激的机制是由于其插入到覆盖在其上方耳石膜或终帽内的纤毛随着这些辅助结构的惯性位移而发生弯曲,纤毛的弯曲引起毛细胞膜电位发生去极化或超极化改变,从而促使毛细胞的神经冲动信号发放增强或减弱。静纤毛朝着动纤毛的方向弯曲形成对毛细胞的兴奋性刺激,而静纤毛朝着背离动纤毛的方向弯曲则构成对毛细胞的抑制。球囊斑和椭圆囊斑都被从其中心穿越的一条狭窄的细胞带划分为两个区域,这条狭窄的细胞带被称之为微纹区,在椭圆囊斑微纹区两侧周边区毛细胞的动纤毛都排列在朝向微纹区的位置,而球囊斑微纹区两侧周边区毛细胞的动纤毛都排列在背离微纹区的位置,由此可见,每一个囊斑微纹区两侧毛细胞的极性正好完全相反。当机体沿着一个囊斑的平面从垂直于微纹区的方向产生一个加速运动时,该囊斑一侧周边区的毛细胞会因为静纤毛朝着动纤毛的方向弯曲使该侧毛细胞发生去极化而处于兴奋状态,而另一侧周边区的毛细胞却因静纤毛朝着离开动纤毛的方向弯曲使该侧毛细胞发生超极化而处于抑制状态。三个壶腹嵴上毛细胞的动纤毛都是朝着或背离椭圆囊的统一方向,其中外半规管壶腹嵴上每个毛细胞的动纤毛都是统一朝着椭圆囊,而上半规管和后半规管壶腹嵴上的每个毛细胞的动纤毛都是统一朝着半规管的方向。壶腹嵴是一个位于壶腹腔内的横位的马鞍形隆起,当其上方覆盖的胶状质终帽随着内淋巴液的流动发生相对位置移动时,壶腹嵴一侧的毛细胞纤毛必然会随着终帽顶部的偏移而发生方向一致的弯曲,从而使这半侧壶腹嵴毛细胞产生同步的去极化或超极化反应,然而壶腹嵴另外一侧毛细胞的纤毛却会因为内淋巴液在壶腹嵴上方推动终帽时在被壶腹嵴遮挡一侧的底部形成一个反方向的漩涡式回流使壶腹嵴另外一侧毛细胞的纤毛发生方向相反的弯曲,从而使壶腹嵴两侧毛细胞处于一侧兴奋而另一侧抑制的截然相反的不平衡状态。这意味着同样的加速运动方向对与之相对应的前庭终器两侧感觉上皮产生的是截然不同的刺激信号,从而造成该前庭终器两侧感觉上皮输入信号的不平衡。这种不平衡刺激模式经前庭周边神经元传入到前庭中枢神经系统,使整个从周边到中枢的前庭系统都是以这种不平衡刺激方式传递和感知机体的平衡状态。

关键词：前庭器官毛细胞去极化超极化内淋巴流动

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中药聪耳胶囊干预老年性耳蜗螺旋神经节和疆孔神经损害的实验研究

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中华中医药杂志 2007年第6期22卷 355-359页

作者：宣伟军丁大连华中科技大学同济医学院 Center for Hearing and Deafnese State University of New York at BuffaloUSA

目的:观察中药健耳Ⅱ号胶囊化裁方——聪耳胶囊对C57小鼠老年性耳蜗螺旋神经节和疆孔神经损害的干预影响并探讨其作用机制。方法:刚出生的C57BL/6J小鼠40只,随机分为对照组和聪耳胶囊组各20只。对照组小鼠为常规饲料喂养;聪耳胶囊组小... 详细信息

目的:观察中药健耳Ⅱ号胶囊化裁方——聪耳胶囊对C57小鼠老年性耳蜗螺旋神经节和疆孔神经损害的干预影响并探讨其作用机制。方法:刚出生的C57BL/6J小鼠40只,随机分为对照组和聪耳胶囊组各20只。对照组小鼠为常规饲料喂养;聪耳胶囊组小鼠常规饲料喂至出生后两个月时,以聪耳胶囊溶液代替日常饮水;至7月龄时两组同时终止实验。制作耳蜗切片,在光镜下定量观察比较各组小鼠耳蜗螺旋神经节细胞密度以及疆孔内神经纤维数量。结果:对照组小鼠耳蜗底回螺旋神经节细胞数量明显减少,存活者呈现异常的形态学改变,疆孔内神经纤维数量也有所减少。聪耳胶囊组小鼠蜗轴(特别是底回)内的螺旋神经节细胞密度以及疆孔内的神经纤维数量则减损较轻,其中两组动物的神经节细胞数量呈现极显著差异(P<0.001)。结论:①中药聪耳胶囊与其源方健耳Ⅱ号胶囊一样,均可延缓C57BL/6J小鼠老年性耳蜗神经系统损害。②中药聪耳胶囊的药理学效应可能在于对相关基因活性表达的调控而阻断了细胞凋亡通路。③小鼠老年性耳蜗损害系由底回开始然后向顶回逐渐蔓延发展。④小鼠老年性听觉周边神经系统的损害可能首先发生螺旋神经节,然后再蔓延到听神经纤维。

关键词：老年性耳聋聪耳胶囊机理

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氨基糖苷类抗生素耳毒性研究

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中华耳科学杂志 2007年第2期5卷 125-131页

作者：丁大连 Richard Salvi Center for Hearing and Deafness State University of New York at Buffalo

由于抗菌谱广和价格便宜等原因,氨基糖苷类抗生素被广泛应用于临床。然而氨基糖苷类抗生素的耳毒性和肾毒性却使其在临床应用中受到一定限制。氨基糖苷类抗生素在耳蜗毛细胞中的主要积聚部位是线粒体和溶酶体。氨基糖苷类抗生素引起的... 详细信息

由于抗菌谱广和价格便宜等原因,氨基糖苷类抗生素被广泛应用于临床。然而氨基糖苷类抗生素的耳毒性和肾毒性却使其在临床应用中受到一定限制。氨基糖苷类抗生素在耳蜗毛细胞中的主要积聚部位是线粒体和溶酶体。氨基糖苷类抗生素引起的细胞内氧自由基活动增强是毛细胞损害的重要因素之一,因此局部或者全身应用氧自由基清除剂可以保护耳蜗免受氨基糖苷类抗生素的损害。钙激活的蛋白酶在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞破坏过程中同样扮演了重要的角色,因此抑制钙激活蛋白酶的活性也能有效保护耳蜗毛细胞。急性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏大都死于细胞凋亡,其凋亡原因主要是因为线粒体被药物特异性结合并破坏后,其内部的细胞色素C被释放到细胞质中,因而刺激了Caspase-9并激发其下游的Caspase-3,从而导致毛细胞的程序化死亡。与此不同的是,慢性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏不仅包括细胞凋亡而且涉及细胞坏死。在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞坏死过程中,溶酶体的超载破裂最终造成毛细胞自溶性坏死是其典型特征。氨基糖苷类抗生素对螺旋神经节没有直接的毒性作用,但是在耳蜗毛细胞被破坏之后,螺旋神经节往往由于缺乏神经营养因子而发生延迟性神经元死亡,应用转基因技术将神经营养因子基因片段转染到耳蜗支持细胞使之产生分泌神经营养因子的功能,可以有效减轻延迟性神经元死亡的发生率。

关键词：氨基糖苷类抗生素耳毒性

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镉中毒及其耳毒性

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中华耳科学杂志 2011年第1期9卷 50-53页

作者：刘洪孙虹 Richard Salvi 丁大连中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉-头颈外科长沙410013 Center for Hearing and Deafness State University of New York at Buffalobuffalony14214 中南大学湘雅医院耳鼻咽喉-头颈外科长沙410008

1镉污染概述重金属是指比重大于5的金属,即密度大于每立方厘米4.5克的金属。重金属的种类有45种,这些重金属属于过渡元素,所谓过渡金属的概念是指元素周期表中d区的一系列金属元素,镉便是其中一种毒性较高的过渡金属。

关键词：耳毒性镉中毒金属元素过渡金属重金属元素周期表镉污染

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卡铂引起的灰鼠耳蜗内毛细胞缺损模式

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临床耳鼻咽喉科杂志 2005年第10期19卷 457-460页

作者：杨军丁大连吴皓王家东上海第二医科大学附属新华医院耳鼻咽喉-头颈外科上海200092 美国纽约布法罗大学听力与耳聋中心上海第二医科大学附属仁济医院耳鼻咽喉科

目的:研究卡铂损害灰鼠耳蜗内毛细胞(IHCs)的模式,即IHCs何时出现缺损、给药后不同时间基底膜上IHCs缺损的范围、基底膜上IHCs最大缺损部位以及致绝大部分IHCs缺损所需时间等。方法:对成年灰鼠采用一次性卡铂腹腔注射(100mg/kg),给药后... 详细信息

目的:研究卡铂损害灰鼠耳蜗内毛细胞(IHCs)的模式,即IHCs何时出现缺损、给药后不同时间基底膜上IHCs缺损的范围、基底膜上IHCs最大缺损部位以及致绝大部分IHCs缺损所需时间等。方法:对成年灰鼠采用一次性卡铂腹腔注射(100mg/kg),给药后不同时间处死动物,常规制备耳蜗铺片和耳蜗图,以定量观察灰鼠耳蜗毛细胞的缺损情况。结果:注射卡铂后从24h～3个月,灰鼠的外毛细胞基本无缺损。IHCs损伤模式的特征:①注射卡铂后24h耳蜗毛细胞完整无损,IHCs从注药后第3天开始出现缺损;②从注射卡铂后3d到3个月期间,IHCs的最大缺损率均出现在第1回和第2回交界处;③IHCs缺损从第1回和第2回交界处开始,范围逐渐向底回和顶回扩展,与顶回相比,底回的IHCs缺损出现早且更严重;④至注射后3个月基底膜上IHCs的缺损呈平坦型。结论:100mg/kg卡铂腹腔注射对各回IHCs的破坏是不均等的,对卡铂的敏感度不一致可能造成了各回IHCs缺损在时间上的差异。

关键词：卡铂耳蜗内毛细胞

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耳聋左慈汤含药血清对庆大霉素致小鼠耳蜗毛细胞损伤的拮抗作用

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中药药理与临床 2009年第4期25卷 3-5页

作者：董杨王静丁大连施建蓉上海中医药大学教学实验中心上海201203 美国纽约州立大学布法罗听力研究中心纽约14214

目的:用血清药理学方法观察耳聋左慈汤对庆大霉素(Gentamicin,GM)所致小鼠耳蜗毛细胞损伤的作用。方法:完整分离小鼠耳蜗基底膜,平铺于鼠尾胶上,无血清培养液培养24小时后,正常组更换含10%空白血清的培养液,模型组同时加入0.3mMGM和10%... 详细信息

目的:用血清药理学方法观察耳聋左慈汤对庆大霉素(Gentamicin,GM)所致小鼠耳蜗毛细胞损伤的作用。方法:完整分离小鼠耳蜗基底膜,平铺于鼠尾胶上,无血清培养液培养24小时后,正常组更换含10%空白血清的培养液,模型组同时加入0.3mMGM和10%空白血清,耳聋左慈汤药物血清组同时加入0.3 mM GM和10%含药血清,继续培养24小时,免疫荧光染色后荧光显微镜下进行全耳蜗毛细胞计数。用全耳蜗毛细胞损失率评价耳聋左慈汤含药血清对GM所致耳蜗毛细胞损伤的作用。结果:正常耳蜗毛细胞排列整齐,无缺失,而0.3mM GM模型组耳蜗毛细胞大量缺失,外毛细胞损失率(41.8±1.9)%高于内毛细胞损失率(16.8±1.8)%;耳聋左慈汤药物血清可降低耳蜗毛细胞的损失率,内、外毛细胞损失率与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:耳聋左慈汤含药血清对GM造成的耳蜗毛细胞损伤有拮抗作用。

关键词：耳聋左慈汤庆大霉素血清药理学耳蜗毛细胞

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