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2 篇 期刊文献

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187 篇 农学
- 183 篇 兽医学
- 1 篇 畜牧学
- 1 篇 林学
2 篇 医学
- 1 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
- 1 篇 医学技术（可授医学...

主题

10 篇 原核表达
10 篇 单克隆抗体
9 篇 猪圆环病毒2型
9 篇 序列分析
8 篇 表达
6 篇 克隆
6 篇 猪繁殖与呼吸综合...
6 篇 鉴定
5 篇 猪瘟病毒
5 篇 间接elisa
4 篇 猪流行性腹泻病毒
4 篇 新城疫病毒
4 篇 分离
4 篇 病毒拯救
4 篇 prrsv
4 篇 分离鉴定
4 篇 rt-pcr
3 篇 f基因
3 篇 猪流感病毒
3 篇 禽流感

机构

29 篇 中国农业科学院哈...
23 篇 东北农业大学
13 篇 华南农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院哈...
9 篇 新疆农业大学
7 篇 中国农业科学院哈...
7 篇 中国农业科学院哈...
6 篇 南京农业大学
5 篇 黑龙江八一农垦大...
5 篇 中国农业科学院上...
5 篇 中山大学
4 篇 吉林农业大学
4 篇 莱阳农学院
3 篇 河南科技大学
3 篇 延边大学
3 篇 青岛农业大学
3 篇 军事医学科学院军...
3 篇 中国农业科学院哈...
3 篇 哈尔滨维科生物技...

作者

15 篇 冯力
15 篇 孙东波
14 篇 时洪艳
14 篇 刘长明
13 篇 陈建飞
13 篇 危艳武
9 篇 陈化兰
9 篇 张超范
9 篇 童光志
8 篇 袁婧
8 篇 张朝霞
8 篇 刘胜旺
8 篇 佟有恩
7 篇 孔宪刚
7 篇 毕英佐
7 篇 谢青梅
7 篇 仇华吉
7 篇 马静云
6 篇 孙元
6 篇 刘思国

语言

184 篇 中文
5 篇 英文

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猪肺炎支原体P46基因的克隆及表达

猪肺炎支原体P46基因的克隆及表达

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：单虎秦晓冰黄娟张莉平迟灵芝青岛农业大学动物科技学院

参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PC(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET-32a(+)中,经IPTG诱导后成功地在大肠杆菌Rosetta(... 详细信息

参考GenBank登录的猪肺炎支原体(Mhp)P46基因序列,利用Primer5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PC(SOE-PCR)对猪肺炎支原体P46基因的3个位点进行定点突变,将此突变基因插入到表达载体pET-32a(+)中,经IPTG诱导后成功地在大肠杆菌Rosetta(DE3)宿主菌中表达分子量约为63.5ku的融合蛋白。Western blot分析表明,该融合蛋白具有较好的免疫原性。为猪肺炎支原体疫苗的制备及猪肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定基础。

关键词：猪肺炎支原体重叠延伸PCR 定点突变表达

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猪流感(H1N1亚型)灭活疫苗的研究

猪流感(H1N1亚型)灭活疫苗的研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：杨焕良乔传玲李海燕陈艳辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室

将一株H1N1亚型的猪流感病毒(SIV)接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以氢氧化铝为佐剂制成灭活疫苗。疫苗接种4～6周龄猪后,注射疫苗后均无不良反应。疫苗一次免疫后28d用同亚型病毒108.0EID50剂量攻毒,保护率达80%;二次免疫后14d攻毒可... 详细信息

将一株H1N1亚型的猪流感病毒(SIV)接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以氢氧化铝为佐剂制成灭活疫苗。疫苗接种4～6周龄猪后,注射疫苗后均无不良反应。疫苗一次免疫后28d用同亚型病毒108.0EID50剂量攻毒,保护率达80%;二次免疫后14d攻毒可完全保护,攻毒对照组的猪均能够从肺脏中分离到病毒。疫苗在4℃～8℃保存6个月,免疫猪后,免疫效力未见下降。

关键词：猪流感 H1N1亚型灭活疫苗免疫

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马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立

马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：郭巍戴伶俐李雪峰闫妍王英原周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室/慢病毒及马病课题组

根据马流感病毒的M基因和HA基因的保守序列,设计了两对引物,MF和MR为通用引物,可以检测出H3N8和H7N7亚型EIV,目的片段227bp,HF和HR为H3N8亚型特异性引物,目的片段595bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测... 详细信息

根据马流感病毒的M基因和HA基因的保守序列,设计了两对引物,MF和MR为通用引物,可以检测出H3N8和H7N7亚型EIV,目的片段227bp,HF和HR为H3N8亚型特异性引物,目的片段595bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测鉴别H3N8亚型EIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。

关键词：马流感病毒 RT-PCR

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小鼠Ii基因克隆、表达及其抗体制备

小鼠Ii基因克隆、表达及其抗体制备

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：董林王艳萍沈志强余为一山东省滨州市畜牧兽医研究院安徽农业大学动物科技学院

为获取小鼠Ii编码基因,利用原核表系统进行诱导表达,提取与纯化目的蛋白,并制备其相应抗体。应用RT-PCR获取小鼠Ii编码基因;插入pGEX-4T-1表达载体,SDS-PAGE分析蛋白表达;纯化融合蛋白,免疫家兔,制备抗血清。扩增出了与预期大小相同的70... 详细信息

为获取小鼠Ii编码基因,利用原核表系统进行诱导表达,提取与纯化目的蛋白,并制备其相应抗体。应用RT-PCR获取小鼠Ii编码基因;插入pGEX-4T-1表达载体,SDS-PAGE分析蛋白表达;纯化融合蛋白,免疫家兔,制备抗血清。扩增出了与预期大小相同的700bp的特异性基因条带,其与GenBank登录的鼠Ii同源性高达99.2%～99.8%;SDS-PAGE检测到大小约49.5kd的特异性蛋白条带;应用琼脂双向免疫扩散、间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光法等进行抗体活性鉴定,证明获得了特异性强、具有良好生物活性的抗体。本试验为内源性靶向Th细胞表位疫苗、肿瘤的免疫与治疗及Ii在免疫应答中的促进作用奠定了一定基础。

关键词：恒定链基因克隆表达抗体

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高致病性禽流感H5N1重组二价(RE1、RE4株)油乳剂灭活苗免疫效果的试验报告

高致病性禽流感H5N1重组二价(RE1、RE4株)油乳剂灭活苗免疫效果的...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：马志军韦海涛祝俊杰赵景义杨秀环姚学军靳月生关键民王俊海李秀岭邓友安高薇北京市畜牧兽医总站北京昌平区动物疫病预防控制中心北京怀柔区畜牧兽医工作站北京大兴区动物疫病控制中心

高致病性禽流感是严重危害养禽业健康发展的烈性传染病。免疫是防治高致病性禽流感的最重要手段之一,并且也取得了很显著的防治效果。但是由于禽流感病毒生存环境的压力不断加快,病毒变异的速度也在加大,防治高致病性禽流感工作面临

关键词：禽流感病毒病毒变异油乳剂灭活疫苗

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鸡贫血病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立

鸡贫血病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：宋修庆高宏雷王晓燕林欢宇文延青王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国科学院生物物理研究所

根据CAV的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性达到10个拷贝/... 详细信息

根据CAV的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明:该方法的敏感性达到10个拷贝/μL,与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复试验相关系数都小于5%,表明其敏感性高,特异性好,重复性佳。

关键词：鸡传染性贫血病毒 TaqMan探针荧光定量PCR

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猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03全长cDNA克隆的构建

猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03全长cDNA克隆的构建

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：吴波平冯力时洪艳陈建飞孙东波高秀春白兴华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学

为构建猪捷申病毒(PTV)感染性克隆,进行病毒基因组结构、功能及新型疫苗研究,根据NCBI发表的PTV Swine/CH/IMH/03株及Talfan株核苷酸序列,设计并合成了4对特异性引物,PCR扩增并克隆覆盖PTV swine/CH/IMH/03全长基因组的4个片段。经过反... 详细信息

为构建猪捷申病毒(PTV)感染性克隆,进行病毒基因组结构、功能及新型疫苗研究,根据NCBI发表的PTV Swine/CH/IMH/03株及Talfan株核苷酸序列,设计并合成了4对特异性引物,PCR扩增并克隆覆盖PTV swine/CH/IMH/03全长基因组的4个片段。经过反复拼接和测序,最终将PTV全长cDNA定向克隆到pBluescriptSK(+)中。PCR、双酶切及测序鉴定证明PTV全长cDNA克隆构建成功。与Swine/CH/IMH/03亲本株及NCBI登录的其他PTV毒株序列比对发现,该克隆只有3个位点存在核苷酸及氨基酸突变,分别位于2A、2C及3D中。

关键词： PTV 全长cDNA克隆感染性克隆

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猪重要病毒病检测用基因芯片寡核苷酸探针的筛选及优化

猪重要病毒病检测用基因芯片寡核苷酸探针的筛选及优化

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：杨林王秀荣张桂红陈苏红廖明中国动物疫病预防控制中心华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

本研究通过对我国养猪业危害严重的四种重要病毒病:猪瘟(CSFV)、猪口蹄疫(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合症(PRRSV)和猪流感开展特异引物和探针的设计、靶基因扩增和克隆、芯片杂交与反应条件优化等实验,筛选出四条敏感性好、特异性高的探针... 详细信息

本研究通过对我国养猪业危害严重的四种重要病毒病:猪瘟(CSFV)、猪口蹄疫(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合症(PRRSV)和猪流感开展特异引物和探针的设计、靶基因扩增和克隆、芯片杂交与反应条件优化等实验,筛选出四条敏感性好、特异性高的探针用于猪重要病毒病检测基因芯片的制备,同时开展了探针的优化实验,确立了不对称PCR引物浓度比例,为建立猪重要病毒病基因芯片诊断技术平台奠定了基础。

关键词：猪基因芯片指针

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不同厂家生产的鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫效果比较

不同厂家生产的鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫效果比较

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：林绮萍唐秀英陈瑞爱朱文冠黄文科李琳刘成宏广东大华农动物保健品有限公司

本研究对国内外4个厂家生产的鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫鸡只进行血清HI抗体水平测定,比较不同公司所产疫苗免疫效果的差异。结果表明:ND的抗体效价以大华农苗最高,其他三个厂家差异不显著;H9的抗体效价大华农苗高于国内C公司疫... 详细信息

本研究对国内外4个厂家生产的鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫鸡只进行血清HI抗体水平测定,比较不同公司所产疫苗免疫效果的差异。结果表明:ND的抗体效价以大华农苗最高,其他三个厂家差异不显著;H9的抗体效价大华农苗高于国内C公司疫苗;EDS的抗体效价国外B公司疫苗高于国内D公司疫苗;IB的抗体效价先活苗基础免疫再灭活苗加强免疫组以大华农苗最高,国内D公司苗最低,灭活苗直接免疫组以国内C公司苗最高,国外B公司苗最低。

关键词：鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫效果对比

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鹅副粘病毒JLSY03株的分子鉴定及F基因测序

鹅副粘病毒JLSY03株的分子鉴定及F基因测序

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：王楠李林邵洪泽吴丹姚新华吉林省兽医科学研究所吉林省动物疫病预防控制中心

新近分离的鹅副粘病毒JLSY03株经SPF鸡胚增值纯化,通过血凝、血凝抑制实验及透射电镜进行形态学观察确定其为Ⅰ型禽副粘病毒(PMV-1)。采用RT-PCR方法成功扩增出JLSY03株蛋白基因,并进行测序,其核苷酸序列大小为1815bp,包含完整的开放阅... 详细信息

新近分离的鹅副粘病毒JLSY03株经SPF鸡胚增值纯化,通过血凝、血凝抑制实验及透射电镜进行形态学观察确定其为Ⅰ型禽副粘病毒(PMV-1)。采用RT-PCR方法成功扩增出JLSY03株蛋白基因,并进行测序,其核苷酸序列大小为1815bp,包含完整的开放阅读框架(1662bp),编码533个氨基酸,F蛋白裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,与新城疫病毒强毒株的特征相符,属基因Ⅶ型。与国内外发表的部分新城疫强毒株和弱毒株之间相应序列进行比较,F基因核苷酸序列同源性在84.8%～90.9%之间,氨基酸同源性在88.8%～95.7%之间。

关键词：鹅副粘病毒 RT-PCR F基因序列分析

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