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以纯化的新城疫病毒ND35毒株免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与EDS-76V、IBDV、IBV、MDV、APV、AIV(H5亚型)反应.通过Western blot对7G5单抗针对病毒蛋白的鉴定,发现其在47.5ku～62ku之间出现条带,预测7G5单抗是针对新城疫病毒F蛋白.这5株单克隆抗体分别为IgG1、IgG2b亚类,κ轻链。

关键词：新城疫病毒单克隆抗体鉴定

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副鸡禽杆菌河南株的分离及其PCR鉴定

副鸡禽杆菌河南株的分离及其PCR鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：苗立中沈志强吴忆春李峰林初文谢金文王艳山东省滨州畜牧兽医研究院山东省滨州职业学院生物工程系

从河南某些鸡场的疑似鸡传染性鼻炎的病鸡框下窦分泌物中分离到1株细菌,经染色镜检、菌落形态观察及生化试验鉴定为副鸡禽杆菌(APG),命名为HN-1株。参照GenBank上发表的副鸡禽杆菌基因组序列的保守区设计1对引物,通过PCR技术扩增出939b... 详细信息

从河南某些鸡场的疑似鸡传染性鼻炎的病鸡框下窦分泌物中分离到1株细菌,经染色镜检、菌落形态观察及生化试验鉴定为副鸡禽杆菌(APG),命名为HN-1株。参照GenBank上发表的副鸡禽杆菌基因组序列的保守区设计1对引物,通过PCR技术扩增出939bp的基因片段,将扩增产物与T载体连接后,转化感受态细胞,筛选出阳性重组质粒进行测序。将测序结果与GenBank上已发表的Apg基因序列比对,显示同源性达98%。从而从分子水平证实该分离株为副鸡禽杆菌。

关键词：副鸡禽杆菌分离鉴定聚合酶链式反应

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鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及外膜蛋白OmpA的序列分析

鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及外膜蛋白OmpA的序列分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：郭东春曲连东刘家森姜骞韩凌霞司昌德孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心

从哈尔滨某鸭场的病鸭体内分离到细菌,经菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定确定为鸭疫里氏杆菌。通过动物回归试验分离的鸭疫里氏杆菌有很强的致病性。药敏试验结果显示对嗯诺沙星等高度敏感。克隆扩增了鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A,测序结... 详细信息

从哈尔滨某鸭场的病鸭体内分离到细菌,经菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定确定为鸭疫里氏杆菌。通过动物回归试验分离的鸭疫里氏杆菌有很强的致病性。药敏试验结果显示对嗯诺沙星等高度敏感。克隆扩增了鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A,测序结果表明:外膜蛋白A核苷酸全长1164bp,编码387个氨基酸。分离到鸭疫里氏杆菌和克隆的外膜蛋白A为下一步鸭疫里氏杆菌的诊断打下基础。

关键词：鸭疫里氏杆菌分离鉴定外膜蛋白A 序列分析

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鸭肠炎病毒UL31基因的克隆与表达

鸭肠炎病毒UL31基因的克隆与表达

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：赵妍马波王君伟东北农业大学动物医学院

本研究根据GenBank上发表的登录号为EF203708的序列设计了一对表达引物,通过聚合酶链式反应扩增获得大小为942bp的片段,测序证明序列正确后,通过原核表达载体pET-30a和pGEX6p-1构建了重组质粒pET-30a-UL31和pGEX6p-1-UL31,并利用大肠杆... 详细信息

本研究根据GenBank上发表的登录号为EF203708的序列设计了一对表达引物,通过聚合酶链式反应扩增获得大小为942bp的片段,测序证明序列正确后,通过原核表达载体pET-30a和pGEX6p-1构建了重组质粒pET-30a-UL31和pGEX6p-1-UL31,并利用大肠杆菌表达系统分别表达出41ku和61ku的目的蛋白。通过温度、时间、转数等方面条件的优化,实现了pGEX6p-1-UL31蛋白部分在上清中表达,为蛋白纯化和鸭肠炎病毒的分子生物学研究奠定基础。

关键词：鸭肠炎病毒 UL31基因原核表达

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减蛋综合征病毒京911株全基因克隆及序列分析

减蛋综合征病毒京911株全基因克隆及序列分析

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：于志丹王君伟肖妙东北农业大学动物医学院

设计18对PCR引物分段扩增减蛋综合征病毒(京911株)全基因序列,扩增产物克隆到pMD18-T载体并测序。用DNAMAN软件对编码核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性分析,全基因核苷酸序列同源性为97.41%,其编码主要蛋白开放阅读框核苷酸序列除纤维... 详细信息

设计18对PCR引物分段扩增减蛋综合征病毒(京911株)全基因序列,扩增产物克隆到pMD18-T载体并测序。用DNAMAN软件对编码核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性分析,全基因核苷酸序列同源性为97.41%,其编码主要蛋白开放阅读框核苷酸序列除纤维蛋白同源性为89.82%,其它同源性均在96.00%以上,氨基酸序列除纤维蛋白同源性为93.94%,其它蛋白同源性均在97.00%以上,结果显示该毒株与国际标准毒株EDSV-AV127株高度同源,推测两者为同一基因型。

关键词：减蛋综合征病毒全基因

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