TGF-β/TGF-βRⅡ轴通过调控c-JUN激活在慢性肝损伤中的作用研究
作者单位：广州医科大学附属第五医院
会议名称：《2024中国肿瘤标志物学术大会暨CACA整合肿瘤学高峰论坛暨第十七届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会》
会议日期：2024年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学]
摘 要：目的:作为危害人类健康的主要病因之一,慢性肝病的发病机制一直是肝脏病因学研究的难点。肝脏马洛里小体(Mallory-Denk Bodies,MDBs)作为慢性肝损伤中与炎症相关的肝脏蛋白聚集体,存在于各种慢性肝脏疾病包括肝癌中。因此研究MDBs发生机制对于慢性肝病发病机制与防治具有重要意义。转化生长因子β(TGF-β)作为一种强大的炎症免疫反应调节器,在炎症过程中可以诱导肝巨噬细胞释放不同的生长因子和炎症介质,起到推动炎症反应级联放大的作用。本文通过构建二乙基-1,4-二氢-2,4,6-三甲基-3,5-吡啶二羧酸酯(DDC)诱导小鼠肝脏MDBs形成的病理模型以探究TGF-β介导的信号在MDBs形成中的作用,为慢性肝脏疾病治疗和防治提供新的药物靶点和理论依据。方法:实验小鼠通过0.1%DDC诱导小鼠约10周形成MDBs基础上(DDC-Fed),后撤药1月(DDC-Withdrawn), MDBs消失,再重新喂药6到10天,MDBs快速形成(DDC-Refed)。同时,对照小鼠喂养正常饮食。进一步我们将上述四组小鼠肝脏取材、制备成单细胞悬液进行单细胞核测序和生物信息学分析,随后利用小鼠组织和血清进行ELISA、Wetern Blot等体内外实验进行验证。结果:单细胞测序数据分析表明,在MDBs形成过程中,肝细胞-巨噬细胞配受体对TGF-β/TGF-βRⅡ轴在DDC-Fed、DDC-Refed组中显著富集,且GSVA分析显示TGF-β信号通路在喂药组中也明显激活。转录因子分析结果显示c-JUN在DDC-Fed与DDC-Refed组中明显上调。由于UbD是MDBs形成的关键驱动因子,我们也预测到在UbD的启动子序列上存在多个c-JUN的结合位点,暗示c-JUN激活可以调节UbD的表达,促进MDBs的形成。体外实验结果表明,DDC喂养10w后的小鼠血清中TGF-β1分泌明显增多。Western blot结果表明,与对照组相比,在形成MDBs后的小鼠DDC-Fed、DDC-Refed肝脏组织中,TGF-βRⅡ受体显著激活,而且c-JUN的蛋白水平同步上调。结论:本文首次报道肝脏MDB形成过程与TGF-β/TGF-βRⅡ轴信号通路调控的紧密关系,且TGF-β信号通路及下游分子在DDC诱导的肝脏MDBs形成过程中明显激活。同时,启动子结合位点预测表明c-JUN多个位点可以结合在UbD的启动子区域参与调控UbD的活化。这对进一步探索肝脏MDB形成慢性肝病发病机制与防治具有重要意义。