间充质干细胞源性外泌体转载miR-218-5p和黄芩苷复合可溶性微针调控毛囊生态位促进AGA毛囊再生
作者单位：四川省医学科学院·四川省人民医院
会议名称：《2024年全国皮肤病防治学术年会》
会议日期：2024年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100206[医学-皮肤病与性病学] 10[医学]
关 键 词：毛囊生态位 miR-218-5P 间充质干细胞源性外泌体 黄芩苷 可溶性微针
摘 要：目的:雄激素性脱发(Androgenetic alopecia, AGA)是男性进行脱发中最常见类型,毛囊生态位失调是AGA的主要原因,通常由毛囊周围微环境中的血管功能不全和氧化应激引起。本研究拟制备一种新型复合生物材料调控毛囊生态位,拮抗雄激素对毛囊的抑制作用。方法:本研究通过电穿孔法构建稳定富集miR-218-5P的外泌体,通过超速离心后收集,通过电镜、WB及NTA粒径检测法对其进行表征。用甲基丙烯酸酯明胶联合黄芩苷制备空心微针针体,并将预先制备的Exos-miR-218-5P通过离心殖入空腔。并检测其透皮能力、电镜、药物释放效率。借助MTT、细胞划痕、QRT-PCR、WB、免疫荧光等实验方法,在细胞培养、体外器官培养及小鼠体内实验探究该MN-Baiclin-Exo-miR-218-5p微针系统对毛乳头细胞(DPC) PI3K/Akt信号通路表达情况及抗氧化能力和高DHT浓度诱导下毛囊生长的调控作用及VEGF的表达情况。结果:Exos-miR-218-5P粒径维持在40-130nm范围,表面可表达CD9及CD63标记物,在细胞实验中,20ug/ml Exos-miR-218-5P可上调毛乳头细胞中β-catenin及CyclinD1蛋白表达,可激活PI3K/Akt信号通路表达,但不能有效拮抗H2O2的氧化作用。在联合黄芩苷后,可明显拮抗DHT对DPC的抑制作用,再次激活VEGF分泌,相比于对照组,ROS荧光探针信号减弱,MN-Baiclin-Exo-miR-218-5p可有效拮抗H2O2的氧化作用。在动物体内,MN-Baiclin-Exo-miR-218-5p组相比于其他组更能促进毛囊生长,有效提高毛囊生长率,增加毛球大小及真皮厚度,通过组织免疫荧光显示MN-Baiclin-Exo-miR-218-5p可上调β-catenin、Ki-67及p-PI3K的表达,增加毛囊周围血管血量。结论:综上所述,我们设计的MN-Baiclin-Exo-miR-218-5p可溶性微针系统可通过清除毛囊周围ROS和促进血管生成来重塑毛囊周围微环境,激活PI3K/Akt/β-catenin信号通路促进AGA中毛囊生长。