肝片吸虫GSTO2基因的酶学特征及其对巨噬细胞的免疫调节作用
作者单位：石河子大学动物科技学院 中国兽医药品监察所
会议名称：《2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第二届青年科学家学术论坛》
会议日期：2021年
学科分类：090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
关 键 词：肝片吸虫 谷胱甘肽S-转移酶 酶学特征 巨噬细胞 调节作用
摘 要：[目的]肝片吸虫病是由肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)引发的一种重要人畜共患蠕虫病,给全球公共健康带来了严重的危害。为逃避终末宿主(人或者动物)的免疫反应,Fh在感染过程中会分泌包括谷胱甘肽S-转移酶(GST)在内的多种排泄分泌产物,以帮助虫体在宿主体内入侵、移行和长期寄生。为研究Omega2类GST (GSTO2)蛋白的生物学功能及对宿主的调节作用,以期为该蛋白在Fh免疫逃避中的作用及其机制研究提供新的科学依据。[方法]本研究扩增了GSTO2基因,利用在线软件对其进行生物信息学分析;构建原核表达载体并利用IPTG诱导表达重组蛋白GSTO2 (rGSTO2),利用免疫荧光技术分析rGSTO2蛋白在Fh成虫体内的表达;研究不同条件下rGSTO2蛋白的酶学特性,并探究了rGSTO2蛋白体外对RAW264.7巨噬细胞的调节作用。[结果]成功扩增出765 bp的Fh GSTO2基因,编码254个氨基酸,含有胞质GST超家族的特征性N-端βαβαββα结构域和C端α螺旋结构域。rGSTO2蛋白主要在Fh卵黄卵泡、肠细胞、排泄孔及卵黄腺细胞内表达,具有硫醇转移酶和脱氢抗坏血酸酶活性。间接免疫荧光分析发现rGSTO2蛋白可结合在RAW264.7细胞表面,显著抑制RAW264.7细胞的增殖。同时,rGSTO2蛋白可促进NO的产生,并显著调节RAW264.7细胞因子的表达。[结论]在Fh感染时GSTO2对宿主巨噬细胞发挥了重要的调控作用,为进一步揭示Fh免疫逃避的分子机制研究提供了理论依据。