线粒体生成障碍和氧化应激损伤促进大鼠和人的难治性根尖牙周炎
作者单位：温州医科大学附属口腔医院
会议名称：《第十六次全国牙体牙髓病学学术大会》
会议日期：2023年
学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学]
摘 要：目的:探究线粒体生成障碍和氧化应激损伤是否促进大鼠和人难治性根尖周炎(RAP)的发生发展。方法:通过在雄性Wistar大鼠上颌第一磨牙中植入粪肠球菌的方式构建RAP模型,同时收集人RAP患者的临床样本。通过micro-CT扫描、组织学分析、免疫组化和免疫荧光共定位进行检测。另外,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测线粒体生物发生,线粒体DNA和线粒体呼吸链以评估线粒体功能,通过MitoSOX染色检测线粒体ROS水平,通过检测ATP水平、丙二醛表达和抗氧化活性评估线粒体氧化损伤和抗氧化能力。结果:在上颌骨中,RAP组的骨缺损面积、根尖周凋亡细胞数和trap阳性多核细胞数量均显著高于对照组(p0.01)。此外,与对照组相比,在大鼠和人RAP病变中,线粒体生物发生关键调节因子PGC1α和Nrf2的mRNA和蛋白水平均显著降低(p0.01)。同时,通过免疫荧光双染分别对PGC1-α、Nrf2和线粒体标记蛋白TOMM20进行共定位同样证明了RAP中线粒体生物发生出现障碍。此外,在RAP中观察到线粒体功能障碍,表现为mtROS增加,ATP生成减少,线粒体DNA拷贝数减少和线粒体呼吸链表达减少。最后,RAP组的线粒体氧化应激标志物3-硝基酪氨酸、4-羟基壬烯醛和8-羟基脱氧鸟苷的表达水平显著升高(P0.05)。结论:线粒体生成障碍和氧化应激损伤在RAP的发生发展中发挥重要的作用。