NRP1参与C3H10T1/2细胞的成脂向分化、成骨向分化和成软骨向分化
作者单位：中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科 日本冈山大学·口腔形态学研究室
会议名称：《中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第十四次全国牙体牙髓病学学术大会》
会议日期：2022年
学科分类：1003[医学-口腔医学] 100301[医学-口腔基础医学] 10[医学]
摘 要：目的:神经毡蛋白1 (NRP1)是一种多功能的膜蛋白,然而,它在间充质干细胞的成脂向分化、成骨向分化和成软骨向分化中的作用尚不明确。本研究中,我们探索了NRP1和其糖基化修饰在间充质干细胞C3H10T1/2向脂肪、骨和软骨分化中的作用。方法:诱导C3H10T1/2成脂向分化、成骨向分化和成软骨向分化。油红O染色检测脂滴形成,qRT-PCR和Western blot检测标志性分化基因或蛋白的表达。我们采用了siRNA和CRISPR-Cas9技术研究低表达的NRP1对各向分化的影响。为了研究NRP1和其糖基化修饰对成脂向分化的调控,我们过表达了野生型NRP1 (NRP1 WT)和糖基化位点突变型NRP1 (NRP1S612A)。结果:NRP1和其糖基化形式在C3H10T1/2成脂向分化、成骨向分化和成软骨向分化中表达上调。敲减和敲除NRP1抑制C3H10T1/2向脂肪、骨和软骨向分化。另外,在C3H10T1/2脂向分化过程中,NRP1可以与JIP4直接结合,引起短暂的Akt和ERK通路活化。我们进一步观察发现,NRP1的糖基化抑制了NRP1在成脂分化中的促进作用。结论:NRP1促进C3H10T1/2成脂向分化、成骨向分化和成软骨向分化。Akt和ERK介导NRP1和JIP4促进脂肪向分化的过程。糖基化修饰在成脂分化中是NRP1的负调控因子。