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斑马鱼和大蜡螟:鉴定后续感染和评估不同肠道定植肺炎克雷伯菌菌株的免疫学差异的模型

作     者:张秀彩 赵雅洁 吴庆 林婕 方人驰 毕文姿 董郭枫 李佳慧 张艺之 曹建明 周铁丽 

作者单位:温州医科大学附属第一医院医学检验中心 温州医科大学检验医学院、生命与科学学院 浙江大学附属第四医院检验科 

会议名称:《2019年浙江省医学会医学微生物与免疫学分会学术大会》

会议日期:2019年

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

摘      要:背景和目的肠道是细菌病原体的主要储库。肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)是健康人类微生物组的一部分,为感染提供潜在的储存库。然而,并非肠道中的所有肺炎克雷伯菌定植都会引起进一步的感染,如何区分定植后引起感染的菌株以及与无症状的定植菌之间的差异则不太清楚。方法在这项研究中,我们报告了一例来自ICU的住院患者,筛选出两个用于分析随后感染情况的肠道定植菌株(FK4111,FK4758)。通过PFGE和MLST分析菌株之间的同源性。为了分析感染是否是由肠道定植引起以及它们之间的差异,我们建立了斑马鱼和大蜡螟的感染模型。苏丹黑B和中性红染色斑马鱼评估中性粒细胞和巨噬细胞的聚集情况,并对斑马鱼肠道定植后各器官细菌量进行定量分析。最后通过大蜡螟实验评估菌株的毒力差异。结果苏丹黑B和中性红染色结果表明,与FK4111相比,FK4758对吞噬细胞的中性粒细胞募集和吞噬作用更敏感。评估器官细菌负荷的结果显示,与其他器官相比,FK4111和FK4758在肠道中具有最高的细菌负荷。然而,在脾脏,肝脏和心脏器官中,FK4758负荷显著高于FK4111。不产生碳青霉烯酶的ST37菌株FK4111在定植后不会引起感染,而产生碳青霉烯酶的ST11菌株FK4758在肠道定植后可引起感染。结论我们的研究结果表明,并非所有的肠道定植肺炎克雷伯菌都引起感染,定植后肺炎克雷伯菌的感染也不同。因此,我们建立的感染模型是有效和易处理的,并为评估宿主微生物相互作用提供了可能性。

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