免疫检查点新分子Pik3ip1抗肿瘤作用及其潜在机制初探
作者单位：中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院·广东省口腔医学重点实验室
会议名称：《中华口腔医学会第十三次全国口腔粘膜病学暨第十一次全国口腔中西医结合学术大会》
会议日期：2021年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的:本课题组前期研究发现Pik3ip1是一个新的免疫检查点分子,表达于T淋巴细胞表面,且已获得其单克隆抗体。本研究拟探究anti-Pik3ip1单克隆抗体的抗肿瘤作用并揭示其发挥作用的潜在机制。方法:构建小鼠结肠癌细胞系MC38、恶性黑色素瘤细胞系B16-F10的C57BL/6J荷瘤模型,腹腔注射给予抗体,比较小鼠肿瘤生长及小鼠生存时间;分离MC38细胞皮下移植瘤小鼠的肿瘤、引流淋巴结、脾脏,制备单细胞悬液,流式细胞术检测活化的T淋巴细胞(CD45+CD44hiCD62LloCD4+T及CD45+CD44hiCD62Llo CD8+T)比例及增殖(Ki67+)、CD107a表达、耗竭分子(PD-1,LAG-3,TIGHT,PD-1H,TIM-3)表达、调节性T淋巴细胞(Treg)的比例,初步探究anti-Pik3ip1单克隆阻断抗体治疗肿瘤的潜在机制。结果:C57BL/6小鼠皮下移植瘤实验结果显示,克隆号为3H9的抗体可有效延缓MC38皮下移植瘤的生长(p=0.040),可延长B16-F10荷瘤小鼠的生存时间(p=0.009)。分析小鼠MC38皮下移植瘤、引流淋巴结相关免疫指标,结果显示在肿瘤免疫微环境中、引流淋巴结中活化的T淋巴细胞(CD45+CD44hiCD62Llo CD4+T及CD45+CD44hiCD62LloCD8+T)占白细胞(CD45+)的比例及其增殖(Ki67+)比例在3H9组与Control Ig组均未见明显差异;CD8+T淋巴细胞表面表达CD107a在小鼠肿瘤中及引流淋巴结中3H9组较Control Ig组均上调(p值分别为0.003,0.041);在肿瘤免疫微环境中CD4+T及CD8+T淋巴细胞表面耗竭分子LAG-3在3H9组较Control Ig组均表达上调(p值分别为0.002和0.009)。结论:本研究获得具有体内阻断功能的anti-Pik3ip1单克隆抗体3H9;克隆号为3H9的Anti-Pik3ip1可延长B16-F10荷瘤小鼠的生存时间,延缓MC38荷瘤小鼠肿瘤的生长;Anti-Pik3ip1单克隆抗体3H9延缓MC38荷瘤小鼠肿瘤生长的作用机制可能为增强介导机体抗肿瘤免疫的CD8+T淋巴细胞分泌功能;经anti-Pik3ip1单克隆抗体3H9治疗MC38荷瘤小鼠后活化的T淋巴细胞表面表达耗竭分子LAG-3增加,提示在阻断Pik3ip1的免疫抑制作用时,机体可通过增加其他耗竭分子的表达促进肿瘤生长。