白念珠菌液泡钙通道Yvc1通过介导ROS梯度定位参与菌丝极性生长
作者单位:南开大学微生物学系分子微生物学与技术教育部重点实验室
会议名称:《多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会》
会议日期:2019年
学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(81873961,31670146,31870139) 天津市自然科学基金(17JCZDJC33300)
摘 要:Yvc1是白念珠菌的液泡膜钙通道蛋白,在氧化压力应答、菌丝发育、细胞壁完整性和致病性等多种生理过程中发挥着重要作用,然而Yvc1调控菌丝发育的具体机制尚不清楚。本研究发现在菌丝诱导条件下,WT菌株中ROS聚集于菌丝顶端,而yvc1Δ/Δ菌株中ROS在萌发管中非极性分布,表明Yvc1能够调控ROS的极性分布。此外,Fre8是白念珠菌的NADPH氧化酶,通过在菌丝顶端产生ROS,促进菌丝的极性生长。为了研究Yvc1介导的ROS定位与菌丝极性生长的关系,本研究构建了pAu34M-Fre8-GFP质粒,并分别转化WT和yvc1Δ/Δ菌株,观察其定位。结果发现Fre8弥散分布于yvc1Δ/Δ菌株的萌发管,而在WT菌株中集中分布于菌丝顶端,在加入Ca2+螯合剂EGTA后,Fre8在WT菌株中也表现出与yvc1Δ/Δ菌株一致的弥散分布。说明Yvc1通过调控菌丝中的Ca2+浓度进而介导Fre8的定位,从而改变ROS在菌丝顶端的分布。同时发现极性生长相关蛋白Bud6、Exo70和Lifeact的定位与Fre8和ROS情况相同,在WT菌株分布集中,而在yvc1Δ/Δ菌株中去极化分布。因此,本研究表明白念珠菌Yvc1通过调控ROS在菌丝顶端的极性分布参与极性生长,同时Ca2+在细胞代谢与系统发育中起到重要的桥梁作用。