白假丝酵母菌特异性Csa2蛋白双抗原夹心ELISA方法的建立和应用评价
作者单位：海南省人民医院 香港大学微生物系 南方医科大学珠江医院检验医学部
会议名称：《第十三届全国免疫学学术大会》
会议日期：2018年
学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学]
关 键 词：白假丝酵母菌 Csa2 双抗原夹心ELISA 定植与感染
摘 要：目的 :建立以白假丝酵母菌Csa2蛋白抗体为靶标的双抗原夹心ELISA,通过检测白假丝酵母菌尿道感染患者血清对建立的方法进行应用评价。方法 :通过间接免疫荧光染色检测Csa2蛋白在白假丝酵母菌菌体分布情况;应用棋盘滴度法优化反应条件,建立双抗原夹心ELISA方法;通过一系列倍比稀释的兔抗阳性血清验证其检测灵敏度;通过检测正常兔血清验证是否与其存在交叉反应。检测324健康体检者血清,确定该方法的cutoff值;检测120例健康体检者及30份假丝酵母菌尿路感染患者血清,分析其诊断的灵敏性、特异性、阳性预测值(PPT)、阴性预测值(NPT)。结果 :Csa2蛋白是一种分布在白假丝酵母菌菌丝相表面的蛋白;以0.1μg/mL的rCsa2蛋白为包被抗原,以1:1000稀释的rCsa2-HRP蛋白为检测抗原,为建立双抗原夹心ELISA法的最适合工作条件;应用建立的方法可检测到rCsa2免疫兔血清的最高稀释倍数为1:16000,且不与正常兔血清发生交叉反应。该方法的cutoff值为0.072,诊断白假丝酵母菌尿路感染敏感性为65.2%(15/23),特异性为99.2%(126/127),PPT为93.8%(15/16),NPT为94.0%(126/134)结论:成功建立检测白假丝酵母菌Csa2蛋白抗体双抗原夹心ELISA,可辅助诊断白假丝酵母菌定植与感染。