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SE-iFISH,一种全新的循环肿瘤细胞(CTC)检测技术平台应用于肿瘤治疗的疗效评估

作     者:林平 王丹丹 沈琳 李一林 李龙芸 陈建魁 张春燕 马清 郑直 周育森 戈峰 张海石 王东民 

作者单位:美国Cytelligen 赛特生物医药科技有限公司 北京大学肿瘤医院 北京协和医院肺癌中心 解放军307医院 中国医学科学院与中国协和医科大学基础医学研究所 军事医学科学院 首都医科大学肿瘤医学院与世纪坛医院 上海华山医院 北京大学第一附属医院 

会议名称:《第十四届全国肿瘤生物治疗大会》

会议日期:2015年

学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

关 键 词:CTC iFISH 疗效评估 

摘      要:背景:循环肿瘤细胞(CTC)的检测已被人们广泛应用于肿瘤疗效的快速评估、预后的判别及耐药与复发的即时性监测。然而目前CTC的主要检测方法主要是基于CTC大小或其表面特定标示物的表达。此种依赖于CTC自身生物学特性的检测手段因肿瘤细胞不可预知的高异质性,从而极大地限制了其在临床上用于众多不同实体瘤的CTC检测。此外,目前常规的CTC鉴别方法因肿瘤细胞间质化(EMT)导致细胞内角蛋白的降解,亦会导致严重的假阴性。目的:本研究主要着重于开发一种不依赖于肿瘤细胞大小及CTC表面表示物表达的新方法,从而能够对多种不同实体瘤的CTC进行有效富集,并应用新颖的瘤标免疫荧光染色-染色体原位杂交(iF ISH)整合方法对CTC进行鉴别与分类,从而确定并分离出具有特殊临床意义的CTC。方法:应用差相富集技术(SET)对患有不同肿瘤的多种病患者的各种治疗前、后的样本进行CTC富集,并利用CK-i FISH,Ep CAM-i FISH,CD133-iF ISH,HER2-iF ISH等多种技术手段对CTC进行鉴别及亚类分型,原代肿瘤细胞培养及单细胞分析等。结果:SET方法可有效地从多种不同实体瘤(包括肺癌、肝癌、乳腺癌、胰腺癌、结直肠癌、胃癌、食管癌、肾癌、膀胱癌、宫颈癌、卵巢癌、黑素瘤、神经胶质瘤等)不同体液标本(包括血液、胸水、腹水、尿液、骨髓、脑脊液等)进行肿瘤细胞的有效富集,并利用多种iF ISH技术手段对CTC等肿瘤细胞进行各种有效的检测与分析,从而能够准确寻找出药敏或耐药的CTC等。同时获得的CTC即可拥有肿瘤细胞原代培养、肿瘤动物模型的建立,亦可适用于单细胞全基因组或基因突变的分析。结论:SET-i FISH检测CTC可以为生物治疗多种不同肿瘤的疗效评估提供有效帮助。

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