负性共刺激分子B7-H3与c-Met结合调控EMT促进结直肠癌的转移及机制
作者单位：苏州大学附属儿童医院 苏州大学 苏州大学附属第一医院
会议名称：《第十四届全国肿瘤生物治疗大会》
会议日期：2015年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
关 键 词：结直肠癌 负性共刺激分子 原癌基因 上皮间质转化 转移
摘 要：研究背景:结直肠癌是严重威胁人类健康的重大疾病,转移是导致结直肠癌预后不良的关键因素。我们前期研究发现:负性共刺激分子B7-H3在结直肠癌中异常高表达,随着癌变过程的进展其表达水平也逐步上调,且与结直肠癌患者肿瘤转移的发生密切相关,但确切的机制尚待研究。目的:本研究旨在探讨B7-H3在结直肠癌组织标本的异常表达及其与肿瘤转移的关系,进而通过体外细胞实验阐明B7-H3对结直肠癌转移的调控作用及分子机制。方法:以高表达B7-H3的结直肠癌细胞系HCT116、SW480为研究对象,B7-H3表达沉默后,通过迁移实验、侵袭实验和划痕实验观察结直肠癌细胞的体外迁移和侵袭能力;通过Real-time PCR、Western Blot和免疫荧光法观察结直肠癌细胞中EMT相关标志分子及其转录因子的mR NA和蛋白水平的表达变化;通过Immunoprecipitation和Western Blot方法证明结直肠癌细胞HCT116中B7-H3与c-Met的物理结合;B7-H3表达沉默后,通过Western Blot观察结直肠癌细胞中B7-H3/c-Met下游关键信号分子Akt、Erk磷酸化水平的表达变化;通过免疫组化方法分析30例结直肠癌组织标本中B7-H3和E-cadherin的表达。结果:B7-H3表达沉默后,结直肠癌细胞的体外迁移和侵袭能力受到抑制;进一步研究发现该分子表达沉默后,结直肠癌细胞中的上皮标志E-cadherin呈上调表达,间质标志Vimentin和N-cadherin呈下调表达,EMT相关转录因子Snail、Slug、Zeb1、Twist的表达也显著下调。作用机制研究表明B7-H3可与c-Met结合,其结合后会显著影响其下游信号分子Akt的磷酸化水平。临床标本检测发现B7-H3高表达组,癌组织中低表达E-cadherin;而B7-H3低表达组,癌组织中高表达E-cadherin。结论:本研究发现B7-H3可与原癌基因c-Met结合,其后通过影响Akt信号通路调控结直肠癌细胞的上皮间质转化,从而影响肿瘤的转移。