膀胱癌BIU-87细胞系导向肽NYZL1靶向性的实验研究
作者单位：山西医科大学
会议名称：《第十四届全国肿瘤生物治疗大会》
会议日期：2015年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：研究背景:膀胱癌是泌尿系统中常见的恶性肿瘤,具有高发病率、高复发率和高进展率等特点。大约80%的新发病例被诊断为非肌层浸润性膀胱癌。然而,膀胱镜检查对微小和扁平状肿瘤(特别是原位癌)的诊断敏感性低,往往难以发现病灶而导致漏诊。近年来,随着光学分子成像及其探针技术的发展,肿瘤导向肽有望为肿瘤疾病的早期筛查、诊断和治疗提供一个有效手段。目的:本课题组前期采用体内噬菌体展示文库技术筛选得到膀胱癌BIU-87细胞系的肿瘤导向肽CSSPIGRHC(Cys-Ser-Ser-Pro-Ile-Gly-Arg-His-Cys,命名为NYZL1)。本实验通过体内、体外实验,在细胞、组织和整体动物水平对NYZL1的肿瘤靶向性进行系统性验证,以探讨NYZL1作为靶向载体,利用光学分子成像技术进行膀胱癌靶向诊断的可行性。方法:固相合成导向肽NYZL1及阴性对照肽svN YZL1,标记异硫氰酸荧光素(FITC),制备荧光分子探针;向膀胱癌BIU-87细胞悬液中分别加入两种探针孵育,流式细胞仪(FCM)检测细胞平均荧光强度值,明确探针的亲和作用;将细胞爬片,分别加入两种探针孵育,激光共聚焦显微镜(LSCM)观察探针与细胞的结合,明确其亲和作用特异性;构建膀胱癌BIU-87细胞荷瘤裸鼠模型,随机分组,尾静脉注入探针,循环4 h后,取肿瘤组织及各器官,光学分子成像系统观察探针体内标记器官的靶向性;循环24 h后,取肿瘤组织及各器官,制作冰冻切片,LSCM观察探针的组织靶向特异性。结果:合成的实验组探针是FITC-氨基己酸-CSSPIGRHC(FITC-NYZL1),对照组探针是FITC-氨基己酸-CRIGSPHSC(FITC-sv NYZL1)。体外两组探针标记BIU-87细胞的平均荧光强度值分别为50.34±3.63和17.72±1.57,两者差异有统计学意义(P0.05)。LSCM观察FITC-NYZL1能够特异性地与膀胱癌细胞结合,而FITC-svN YZL1不结合。体内研究发现FITC-NYZL1在肿瘤组织中明显浓聚,而FITC-sv NYZL1在肿瘤组织中无聚集,进一步说明FITC-NYZL1能够特异性地和肿瘤组织结合,而不与正常组织细胞结合。同时研究表明分子探针通过肝胆和泌尿系统代谢和排泄。结论膀胱肿瘤导向肽NYZL1能够与膀胱癌BIU-87细胞及其移植瘤靶向性结合,并可携带荧光素标记肿瘤组织,是膀胱癌分子靶向诊断的重要载体。