活体荧光技术在肿瘤研究中的应用
作者单位：中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室
会议名称：《亚洲实验动物学会联合会（AFLAS）第三次会议暨中国实验动物学会（CALAS）第八届学术年会》
会议日期：2008年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的建立绿色荧光(GFP)转基因小鼠模型,用GFP和DsRed标记肿瘤细胞,建立系统的活体光学成像技术所需标记动物和标记细胞。并且利用GFP小鼠和DsRed标记的肿瘤细胞,建立双荧光小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法把EGFP和DsRed基因插入chickenβ-actin强启动子下游构建转基因载体,并且用上述载体标记肿瘤细胞;利用显微注射转基因技术建立绿色荧光转基因C57BL/6J小鼠;将DsRed标记的B16小鼠黑色素瘤细胞接种到绿色荧光转基因小鼠皮下,建立双荧光小鼠肿瘤模型;用活体荧光成像仪和荧光纤维镜分别在整体和细胞水平观察肿瘤的生长。结果建立了绿色荧光转基因小鼠模型和荧光素酶转基因小鼠模型,标记了12种人和小鼠的肿瘤细胞。利用DsRed标记的B16小鼠黑色素瘤细胞和GFP转基因小鼠建立了双荧光小鼠肿瘤模型。利用活体荧光影像仪可以动态监测肿瘤的生长,可以观察到双色荧光小鼠模型中受体绿色荧光组织和红色荧光移植肿瘤相互融合。利用荧光显微镜,可以观察到肿瘤内绿色荧光标记的来源于受体小鼠的血管和免疫细胞。经香菇多糖刺激的GFP小鼠肿瘤模型的移植瘤组织中,来源于受体小鼠绿色荧光标记的血管明显少于经生理盐水刺激的对照组,而免疫细胞明显多于对照小鼠。结论成功建立了绿色荧光转基因小鼠,将成为活体荧光影像系统的重要实验动物模型;利用绿色荧光转基因小鼠和红色荧光DsRed标记的肿瘤细胞建立的双荧光小鼠肿瘤模型,采用活体荧光成像仪和荧光显微镜可在整体和细胞水平直接观察肿瘤的生长以及肿瘤与宿主的相互作用;而且香菇多糖治疗效果的观察也证实了活体光学成像技术的直观性和实用性。