大肠杆菌-枯草芽孢杆菌小型穿梭载体的构建
作者单位：武汉阳光广济医药开发有限公司 浙江大学材料与化工学院 西北农林科技大学动物科技学院 华中农业大学 河南农业大学河南郑州 西北农林科技大学动物科技学院 武汉阳光广济医药开发有限公司
会议名称：《全国首届动物生物技术学术研讨会》
会议日期：2004年
学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学]
关 键 词：穿梭载体 枯草杆菌 大肠杆菌 稳定性 pGDVM
摘 要：以大肠杆菌（***）克隆载体pUC19为模板,分别用两对引物扩增了含有复制起始序列（ori）和复制蛋白基因（rep）的近700bp片段,以枯草芽孢杆菌（***）质粒载体pGDV1为基本骨架,构建了三个大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pGDVM,pGDVM1和pGDVM2。经大肠杆菌-枯草杆菌反复穿梭实验和细菌连续培养分析检测,结果显示含大肠杆菌pUC19复制起始区（ori）和复制起始蛋白基因（rep）的近700bp克隆片段在大肠杆菌中具有完全的复制起始和复制功能;构建的三个质粒载体在大肠杆菌和枯草杆菌中能稳定的遗传。