血清白蛋白刺激小胶质细胞前炎症细胞因子表达的作用研究
作者单位：第三军医大学西南医院神经外科
会议名称：《中华医学会神经外科学分会第九次学术会议》
会议日期：2010年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
关 键 词：血清白蛋白 细胞因子 小胶质细胞 神经炎症 血脑屏障
摘 要：目的观察血清白蛋白对小胶质细胞分泌前炎症细胞因子IL-1β和TNF-α的影响。方法小鼠N9小胶质细胞体外培养,经预实验确定血清白蛋白干预的剂量和条件,于白蛋白刺激后3、6、9、12小时提取细胞总RNA,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR方法检测小胶质细胞IL-1β和TNF-αmRNA的表达水平,并采用ELISA方法检测白蛋白刺激后3、6、12、24小时小胶质细胞培养上清中IL-1β和TNF-α分泌水平的特点,各实验均以等体积PBS干预细胞为对照组。结果逆转录PCR产物行琼脂糖凝胶电泳,结果显示白蛋白刺激组细胞后3、6、9、12小时IL-1β、TNF-αmRNA表达均显著强于对照组,而两组内参GAPDH mRNA表达未显示差异;荧光定量PCR检测亦发现细胞干预后3、6、9、12小时,白蛋白刺激组细胞IL-1β和TNF-αmRNA的表达水平显著高于PBS对照组,结果均具有统计学意义(P0.05);于细胞干预后3、6、12、24小时收集的各组细胞培养上清经ELISA检测显示白蛋白刺激组TNF-α蛋白水平从3h至24小时持续显著高于PBS对照组(P0.05),而白蛋白刺激组IL-1β较PBS对照组的高分泌则出现在干预后6h,并持续到干预后24h(P结论白蛋白作用小胶质细胞后,早期即可诱导促进细胞分泌前炎症细胞因子IL-1β和TNF-α,这为我们进一步研究血脑屏障损伤性中枢神经系统疾病的病理进程,以及明确小胶质细胞在其中所起的作用提供了新的依据。