一种IL-2变构体的制备与免疫学活性研究
作者单位：青岛大学医学院附属医院临床免疫检验科 青岛大学医学院医药生物技术重点实验室
会议名称：《中华医学会第七次全国检验医学学术会议》
会议日期：2008年
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
关 键 词：白细胞介素2 变构体 88Arg IL-2 纯化 制备 T细胞 荷瘤小鼠 免疫学活性
摘 要：目的制备一种IL-2的变构体(Arg IL-2,Asn88被Arg88代替),并研究其免疫学活性。方法:利用定点诱变技术构建了重组质粒pGEX4T-2/Arg IL-2,在大肠杆菌中表达出可溶性的融合蛋白,蛋白经过亲和层析、Thrombin酶切和离子交换层析等一系列的纯化,用Western-blot进行鉴定,MTT法分析纯化后的Arg IL-2对人T细胞的增殖作用,对人卵巢癌细胞SKOV增殖的影响。研究纯化后的88Arg IL-2对荷瘤小鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响,对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响。结果:纯化制备的重组Arg IL-2纯度达95%。重组88Arg IL-2能促进人T细胞的增殖,不能直接抑制人卵巢癌细胞SKOV的增殖,能抑制荷瘤小鼠卵巢癌皮下移植瘤的生长,在促进荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖方面比IL-2的作用更强。结论:我们制备的重组Arg IL-2在体内体外均具有一定的增强免疫的活性,在体内具有一定的抗肿瘤活性,为其大量制备和进一步的生物学活性研究奠定了基础。