犬小孢子菌SSH文库中差异表达基因的研究
作者单位：大连医科大学附属第一医院 山东省青州市人民医院
会议名称：《2009全国中西医结合皮肤性病学术会议》
会议日期：2009年
学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
摘 要：目的:利用已经构建的两个抑制消减杂交(SSH)文库:儿童头皮组织诱导培养基菌株(tester)与儿童光滑皮肤组织诱导培养基菌株(driver1)差异文库;tester与成人头皮组织诱导培养基菌株(driver2)差异文库,应用斑点杂交和实时定量PCR(RT-PCR)技术研究SSH文库的差异基因,探讨犬小孢子菌在头癣中的发病机制。方法:用斑点杂交进行SSH文库阳性克隆的筛选,应用BLAST、GenBank和蛋白质直系同源簇数据库进行序列分析,最后利用实时PCR(RT-PCR)对差异基因进行实时定量检测。结果:数据库比较,去除混杂基因后,共得到13个EST,其中5个为未知新序列,可能代表了tester特异表达的新基因,8个分别找到了同源基因和功能分类。RT-PCR检测结果:FSH1和PQ-LRP基因在tester RNA池中的表达量分别为driver1 RNA池中表达量的44.6倍和117倍;GAL4和NADH1基因在tester RNA池中的表达量分别为driver2 RNA池中表达量的78.2倍和9.8倍。结论:FSH1和PQ-LRP基因在儿童头皮组织诱导培养基菌株中相对于儿童光滑皮肤组织诱导培养基菌株中的上调表达表明,这2个基因在犬小孢子菌感染头皮组织中具有重要作用,可以作为犬小孢子菌致头癣的分子机理继续研究。GAL4和NADH1基因在儿童头皮组织诱导培养基菌株中相对于成人头皮组织诱导培养基菌株中的上调表达显示,这2个基因可能与犬小孢子菌更易于感染儿童有关,可以作为研究犬小孢子菌致病性的候选基因。