柔嫩艾美耳球虫表面抗原Sag10基因的克隆及在昆虫杆状病毒表达系统中的表达
作者单位：中国农业科学院饲料研究所生态饲料研究室 Helmholtz Centre for Infection ResearchD-38124 BraunschweigGERMANY
会议名称：《第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛》
会议日期：2008年
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
摘 要：提取 Eimeria tenella 北京株第二代裂殖子总 RNA,根据 sag10基因序列设计引物,应用 RT-PCR 技术扩增得到 Eimeria tenella 表面抗原基因sag10。该球虫表面抗原基因全长708bp,编码236个氨基酸。其中有7个核苷酸与报道序列(Genbank AJ586552)有差异,涉及4个氨基酸。将 sag10与转化载体 pFastBac-HIS8PP连接,构建了 pFastBac-sag10表达质粒,转化大肠杆菌 DH10 Bac 后纯化得到病毒表达载体,转染 Spodoptera frugiperda(Sf21)昆虫细胞后,获得的阳性重组杆状病毒,可在昆虫细胞中表达出约35kDa 的抗原蛋白 SAG10.