miR-34a通过下调Bmi-1负向调控胃癌干细胞样特性
作者单位：复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科
会议名称：《第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议》
会议日期：2014年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
关 键 词：Bmi-1 胃癌 肿瘤干细胞样特性 miR-34amiR-34a
摘 要：目的:探究miR-34a对胃癌干细胞样特性（自我更新能力、化疗抵抗及转移能力）的影响并试图阐明miR-34a调控癌基因Bmi-1的机制。方法:慢病毒感染结合流式细胞分选术获得稳定的miR-34a上调的胃癌细胞株。采用无血清微球体培养法、平板克隆形成实验、CCK-8细胞增殖实验、CCK-8细胞毒性实验和Transwell迁移实验检测miR-34a对胃癌干细胞样特性（自我更新能力、化疗抵抗及转移能力）的影响。Western-blot法检测蛋白水平的改变,探索miR-34a调控癌基因Bmi-1的机制。功能补偿实验（无血清微球体培养法、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验）探索miR-34a是否通过调控Bmi-1影响胃癌干细胞样特性。结果:miR-34a过表达后自我更新、化疗抵抗性和转移潜能均下降,这表明miR-34a负性调控胃癌干细胞样特性。Western blot结果显示miR-34a上调后可抑制靶基因c-myc和Bmi-1的表达水平,而上调c-myc可以上调被miR-34a抑制的Bmi-1表达水平,这表明miR-34a可通过靶向c-myc下调Bmi-1。细胞功能补偿实验结果显示miR-34a过表达后细胞自我更新能力、转移潜能均下降,此时过表达Bmi-1能使细胞自我更新能力和转移潜能恢复,这表明上调Bmi-1可以逆转miR-34a所导致的胃癌干样特性抑制。结论:miR-34a负性调控胃癌细胞干样特性,并可通过靶向c-myc下调Bmi-1;miR-34a可通过调控Bmi-1影响胃癌细胞干样特性。