mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞转化为H/RS样细胞的影响
作者单位：南方医科大学南方医院病理科、基础医学院病理学教研室、广东省分子肿瘤病理学重点实验室
会议名称：《中华医学会病理学分会2007年学术年会暨第九届全国病理大会》
会议日期：2007年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
关 键 词：mCD99L2基因 RNAi 慢病毒表达质粒 肿瘤细胞转化 A20细胞 H/RS 细胞
摘 要：目的探究沉默 mCD99L2基因对小鼠 B 淋巴瘤细胞系 A20细胞转化为 H/RS 样细胞的影响。方法重组 SiRNA 表达质粒 LV-mCD99L2,体外转染内源性 mCD99L2表达阳性的 A20细胞,筛选出稳定表达 LV 质粒的细胞株并扩增培养;采用免疫荧光技术和流式细胞仪检测转化前后两组细胞鼠源 CD30 表达;透射电镜观察转化后细胞超微结构形态特点;细胞计数方法动态观测培养细胞干扰组 A20-LV-mCD99L2和未经干扰组 A20细胞的 H/RS 样细胞(直径(?)25μm)转型率,以人霍奇金淋巴瘤细胞系 L428作为对照：采用流式细胞仪检测两组细胞周期变化。结果获得了稳定表达 LV 质粒的单克隆细胞株 A20-LV-mCD99L2;免疫荧光标记显示转化细胞 CD30呈阳性表达;流式细胞仪检测 A20-LV-mCD99L2细胞 CD30阳性率为54．4%;透射电镜观察转化后细胞核增大,可见单核、双核及多核,核仁明显的 H/RS 样细胞;干扰组 H/RS 样细胞的转型率明显高于未经干扰组(P0．01);两组处于 S 期的细胞无明显差异,两组细胞均未见凋亡峰。结论 mCD99L2基因沉默可诱导小鼠 B 淋巴瘤细胞系 A20细胞转化为 H/RS 样细胞。