云南霉素与抗黏附肽RGD偶连物的合成及其抗肿瘤活性
作者单位：中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所
会议名称：《第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议》
会议日期：2006年
学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 100701[医学-药物化学] 10[医学]
关 键 词：云南霉素 RGD peptide MTT assay
摘 要：目的:构建云南霉素（yunnanmycin,YNM）与抗黏附肽RGD（Arg-Gly-Asp）的偶联物,并研究其体外的抗肿瘤活性。方法:云南霉素的羟基、氯基用叔丁氧甲酰基 （Boc）保护,RGD的羧基用甲酯基（OMe）保护;以2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉（EEDQ）为缩合剂,使云南霉素的羧基与RGD的氯基缩合得到偶连物;薄层层析 （TLC）监测反应进程。利用硅胶制备板对产物进行分离纯化。ESI质谱分析产物的分子量,HPLC分析产物的纯度。 MTT法检测产物对人高转移巨细胞肺癌PG细胞、人肝癌 Bel-7402细胞的增殖抑制作用;Boyden chamber法分析产物对PG细胞侵袭能力的影响。结果:质谱分析发现终产物终含有分子量分别为773、801、901的成份,分别对应于 YNM-RGD、YNM-RGD（OMe）2和YNM（Boc）-RGD （OMe）2;HPLC分析三种化合物的总含量为87．16％。MTT 显示偶连物和云南霉素对PG细胞的IC50值分别为 0．1 29mM、0．01mM,对Bel-7402细胞的IC50值为 0．135mM、0．029mM,0．1mM的RGD对两种细胞均无明显的细胞毒作用;1mM时偶连物、云南霉素和RGD对PG 细胞的抑制率分别为73．1％、91．8％和16．9％。Boyden chamber显示0．1mM时偶连物和RGD对PG细胞跨膜抑制率分别为50．9％、40．8％;0．2mM时为66．4％、56．2％;0．1 mM的云南霉素对PG的细胞跨膜能力无明显影响。结论:合成了云南霉素与抗黏附肽RGD的偶连物,纯度为 87．16％。偶连物兼有云南霉素和RGD的生物活性;与云南霉素相比,偶连物的细胞毒作用下降,但与RGD相比仍有较强的细胞毒作用;YNM—RGD在体外具有抗侵袭的能力。