有机磷化合物对原代培养皮层神经元毒性作用研究
作者单位：中国科学院动物研究所分子毒理学实验室
会议名称：《全国生化/工业与卫生毒理学学术会议》
会议日期：2010年
学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
摘 要：目的:研究神经病靶酯酶（NTE）抑制剂对神经元的毒性作用,探讨有机磷（OP）迟发性神经毒性（OPIDN）作用与细胞骨架蛋白水平的关系,并比较OP对不同动物来源的神经元毒性的差异。方法:以小鼠和鸡的胚胎皮层神经元为材料,分别用不同浓度（1、10、25、50、100μmol/L）的三邻甲苯磷酸酯（TOCP）、氟丙胺磷（MPX）、对氧磷（PXN）和苯甲基磺酰氟（PMSF）体外作用24 h或48 h后,检查神经元的形态、活性、骨架蛋白表达以及NTE和乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的变化。结果:4种药物作用24 h后两种神经元活性均未明显改变。作用48 h后,50、100μmol/LTOCP导致两种神经元活性显著下降。而MPX、PXN和PMSF对此则无影响。小鼠和鸡皮层神经元在高浓度TOCP作用下形态明显改变,出现神经元突起断裂、消失。小鼠皮层神经元在用25μmol/L的TOCP处理时即见其形态明显改变,而鸡皮层神经元则在TOCP为50μmol/L时才见形态学变化。然而,MPX、PXN和PMSF在各浓度对两种神经元形态均无明显影响。4种药物均可使小鼠和鸡皮层神经元的神经纤丝重链（NF-H）和轻链（NF-L）蛋白水平显著下降,TOCP还导致β-tubulin、β-tubulin-Ⅲ和β-actin水平的显著下调,而MPX、PXN和PMSF则对这3种骨架蛋白无影响。然而,由TOCP引起的小鼠皮层神经元细胞骨架蛋白水平降低幅度明显比鸡皮层神经元中的高。TOCP、MPX和PMSF对两种神经元中NTE活性具有明显的抑制作用,其中MPX的作用最强,在50μmol/L时几乎使NTE活性全部抑制,而PXN则无此作用。4种药物对两种神经元中AChE的活性均具有明显抑制作用,其中PXN作用最强,在10μmol/L时对AChE活性抑制就达80%。结论:TOCP对原代培养皮层神经元的毒性作用与神经元中β-tubulin和β-actin的表达受抑制有关,而与NF的表达下降无关;OP对原代培养的小鼠和鸡皮层神经元的细胞毒性并不是由于其对神经元NTE和AChE活性抑制引起:与鸡皮层神经元相比,小鼠皮层神经元对TOCP的细胞毒性更敏感。