花粉管通道法获得转外源puroindoline基因小麦

作     者：耿洪伟 何中虎 夏兰芹 陈新民 张庆祝 王德森 

作者单位：中国农业科学院作物科学研究所/国家小麦改良中心 

会议名称：《2004’中国作物学会学术年会》

会议日期：2004年

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：“973”国家重点基础研究发展规划项目(2001CB11130101) 国家自然科学基金(30260061) 

关 键 词：小麦 籽粒硬度 puroindoline基因 遗传转化 共抑制 

摘      要：籽粒硬度是衡量小麦品质优劣、贸易价格和决定其最终用途的重要指标,是小麦品质改良的重要目标性状。控制硬度的主效基因pinA和pinB位于染色体5D短臂上,软质对硬质为显性。PINA和PINB(统称为Puroindoline)共同作用形成Friabilin,从而影响籽粒质地的形成。已有三例遗传转化实验表明,通过控制pinA和pinB的表达来改善谷物作物的籽粒硬度是可行的,但已报道的转基因研究只限于将pinA和pinB基因的野生序列转入二倍体水稻和pinB-D1b小麦,己报道的转基因研究只限于将pinA和pinB基因的野生序列转入二倍体水稻和pinB-D1b小麦,获得籽粒软质的转基因植株。如何通过控制pinA和pinb的表达来改善提高谷物作物的籽粒硬度,目前尚未见报道。本研究利用含有能促进外源基因高效表达的Ω序列、kozak序列和poly(A)序列及筛选基因bar的单子叶植物高效表达载体pUBPa和pUBPb,通过花粉管通道法转化优质面包小麦中优9507(pinB-D1b),获得了转基因植株。PCR检测和基因组southern杂交证实了外源基因在受体小麦基因组中的整合,水洗淀粉表面蛋白的定量分析表明,外源基因的导入影响了Friabilin表达。研究的目的是通过外源pinA和pinB与内源基因共抑制,从而抑制受体植株中pinA和pinB的表达,提高受体植株的籽粒硬度,旨在为进一步了解pinA和pinB的功能,并通过基因工程方法快速改良中国现有小麦优良品种的籽粒硬度奠定基础。