CD40基因多态性与汉族人群脑梗塞遗传易感性的关联研究
作者单位：中南大学湘雅三医院
会议名称：《第二届全国治疗药物监测学术年会》
会议日期：2012年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
关 键 词：脑梗塞 CD40 单核苷酸多态性 遗传易感性 可溶性CD40L
摘 要：目的:通过病例-对照研究,明确CD40 rs1883832(C/T)多态性与汉族人群脑梗塞(cerebralinfarction,CI)遗传易感性的关联关系。方法:收集CI患者及健康对照者血液标本并提取外周血DNA,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对所有病例和正常对照组人群CD40 rs1883832(C/T)多态性进行基因分型;ELISA试剂盒检测正常组和病例组三种基因型个体血浆sCD40L水平;实时荧光定量PCR测定CI患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD40 mRNA表达;x检验比较病例和对照人群CD40 rs1883832(C/T)基因型分布的异同;非条件Logistic回归分析确定CD40 rs1883832(C/T)多态性对CI易感性的影响;单因素方差分析(ANOVA)比较不同基因型个体血浆sCD40L水平和不同基因型个体PBMC中CD40表达水平。结果:1、693例健康对照人群中rs1883832多态性位点CC、CT和TT基因型分布频率分别为35.1%、48.3%和16.6%;402例CI患者中CD40 rs1883832(C/T)多态性位点CC、CT和TT基因型分布频率分别为27.4%、53.7%和18.9%,病例和对照人群中该位点基因型分布均符合Hardy-Wenberg平衡,CI病例组和对照组间CD40 rs1883832多态位点三种基因型分布具有显著差异,P值为0.031,病例组T等位基因携带频率(CT+TT)显著高于正常对照组,P值为0.009。通过对性别、年龄及CI病因分层分析发现:1)较正常对照组男性,病例组男性CC基因型频率显著降低(P=0.034),T等位基因携带频率(CT+TT)显著升高(P=0.016);2)在50岁以上人群中,CI患者较同年龄层健康对照人群rs1883832 CC基因型分布频率显著降低(P=0.007),T等位基因携带频率(CT+TT)显著升高(P=0.005);3)与对照组比较,腔隙梗死性CI患者CC基因型分布频率显著降低(P=0.039),T等位基因携带频率(CT+TT)显著升高(P=0.011)。2、CD40 rs1883832多态性位点基因型为TT和CT的男性血浆sCD40L水平较CC基因型个体显著升高(P0.05)。3、CD40 rs1883832多态性位点TT基因型个体PBMC中CD40 mRNA表达水平显著高于该位点CC、CT基因型个体(P0.05)。结论:1)CD40 rs1883832(C/T)多态性位点与汉族人群CI易感性相关,携带该位点T等位基因可增加汉族人群CI的发病风险;2)CD40 rs1883832多态性位点T等位为危险等位基因。讨论:CI又名缺血性脑血管病,主要是由于脑动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)和血栓形成,使管腔狭窄甚至闭塞,导致局灶性急性脑供血不足而引起的疾病。CD40/CD40L是一对互补的跨膜糖蛋白,分别属于肿瘤坏死因子受体(tumour necrosis factor receptor,TNFR)和肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)超家族成员。CD40/CD40L基因参与调控免疫、炎症、高凝等多种病理生理状态,可激活炎症反应,导致内皮功能障碍,活化血小板等。CD40/CD40L在AS发生,发展以及斑块破裂诸多环节中发挥重要作用。国内外大量的研究已经证实,CI是遗传因素与环境因素共同作用的多基因疾病,多种基因的遗传多态性与AS的发生发展密切相关。近年来越来越多研究发现,编码合成人类CD40/CD40L的基因也存在单个核苷酸序列多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP),这些功能性SNP可以通过改变CD40的表达量和活性,引起下游生物学效应的相应变化,从而影响包括AS在内的一系列自身免疫性疾病和炎症性疾病的发生发展。