小型猪作为生殖毒性实验模型的特点与优势分析
作者单位：军事医学科学院毒物药物研究所 国家北京药物安全评价研究中心
会议日期：2013年
学科分类：10[医学]
摘 要：雌雄小型猪分别于5月龄和4月龄达到性成熟,雌性的动情周期约为21～22 d(动情期3 d,以弓腰反射为标志),妊娠期约为114 d,一般每窝产仔6～8只。小型猪睾丸的解剖学结构与其它哺乳动物相同。精子学资料也与人类相似,但精液量稍有差异,精囊和尿道球腺的发育程度高于前列腺(不同于人)。小型猪的精子由头、尾二部分构成,头部呈椭圆形,顶体不明显;尾部细长,有相当数量的精子尾部在距尾部前端约1/5处有一明显的球状结构。雄性生殖器官病理学检查时可能会遇到生精小管发育不全、间质细胞增生之类的自发病变,进而影响到研究结果的判断和解释。故此,小型猪较适合于开展生育力和早期胚胎发育毒性研究。目前,已建立小型猪胎仔自发性变异和畸形的背景数据库,如哥廷根外观畸形和内脏畸形的背景发生率为4%,最常见的畸形包括隐睾症(2.8%)、并指(趾)症(0.76%)、肌肉关节挛缩(0.32%)、腭裂(0.28%)、心室间隔缺损(0.24%)和横膈疝(0.24%)。研究发现,小型猪对许多的人类致畸原敏感,如沙利度胺、羟基脲、乙醇、维甲酸、氨基蝶呤等。在致畸性研究中,小型猪的给药期从着床日(妊娠第11天)开始,至硬腭闭合日(妊娠第35天)结束;包含整个妊娠期。研究过程中可采用各种给药途径,包括静脉连续输注;但经口给药最为常见。妊娠第4～5周,可通过超声检查确定小型猪的妊娠状态。母猪一般在妊娠第110天至112天处死后进行剖宫检查。足月产小型猪胎仔体重为350～400 g,故此可对所有的胎猪进行尸检。胎猪的检查项目一般均包括黄体、总着床、死胎、活胎的计数,外观和内脏检查,胎猪性别的确定和称重,骨骼的茜素红染色检查,半数胎猪头部的Bouin氏液固定后的检查。X射线照片可更好地显示颅骨和骨密度,检查的质量也超过茜素红染色检查,故此也可采用X射线法检查胎猪的骨骼。外观和内脏检查的发现,以国际畸胎学会联合会制订的常用实验动物发育异常的术语进行命名和分类。为了进一步缩短小型猪致畸试验的期限,有研究者对哥廷根小型猪中期(妊娠第60天)和终末(妊娠第110天)剖宫产检查结果进行了比较分析,发现中期剖宫产胎猪大小与终末处死家兔时胎兔的大小和体重相当,生殖器官内部检查可确定胎猪性别,骨骼和软骨双染法可检出骨骼改变,并可检查出乙胺嘧啶诱发的胎仔异常;从而表明小型猪中期剖宫产技术可行,并具有节省时间、开支等方面的优势。