抗菌肽与成纤维细胞生长因子对实验兔角膜损伤修复的影响及临床治疗试验研究

作     者：刘后方 

作者单位：华南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：石达友;廖申权

授予年度：2021年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：抗菌肽 角膜溃疡 EGF 氧氟沙星 

摘      要：在宠物临床中眼科急诊比较常见,并且多数是眼外伤,其中角膜损伤比例比较高,一般角膜外伤后治疗不及时就会导致角膜溃疡并伴随混合型细菌感染,因此在临床中控制角膜溃疡伴随的炎症也显得非常重要。在眼科治疗过程中由于长期使用抗生素,也经常导致一些耐药菌出现并严重影响后期治疗效果,因此单纯使用抗生素已经不能完全解决眼科疾病。本论文主要通过探讨新型生物材料抗菌肽和成纤维细胞生长因子对动物角膜损伤修复的影响,以期为宠物临床眼科常见的细菌性炎症治疗时联合用药提供更多选择与科学依据,论文试验研究工作主要分为三部分。 试验一新型生物材料抗菌肽的体外抑菌试验研究。通过采用角膜损伤面活菌计数方法,对各种治疗药物及浓度的抑菌效果进行评价,试验结果显示,在实验造模后14 d,活菌计数抗菌肽组达到0,而其他各组活菌仍处于较高数量,根据活菌计数统计可见抗菌肽的抑菌效果比氧氟沙星的抑菌效果显著,对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌效果与氧氟沙星呈倍数关系。试验结果表明,抗菌肽抑菌效果明显优于氧氟沙星。 试验二新型生物材料抗菌肽对实验兔角膜损伤修复的影响。通过碱烧伤法建立实验兔角膜损伤模型,选择健康成年实验兔24只,随机分成A、B、C、D共4组,每组6只(雌雄各半),A组为含抗菌肽组,B组为抗生素对照组,C组为EGF组,D组为空白对照组。A组采用抗菌肽滴眼液(一日3次)治疗,B组采用左氧氟沙星滴眼液(1日3次)治疗,C组采用EGF滴眼液(一日3次)治疗,D组只使用生理盐水(一日3次)。在试验后第3、7、14、21、28 d,进行活菌计数,检测实验兔眼压、泪液、房水中IL-1、IL-8、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量,检测血液白细胞水平,观察组织学结构变化等,从而综合评定各组治疗效果。 试验期间的综合试验结果显示,抗菌肽、氧氟沙星与EGF均可抑制炎性因子MMP-1、MMP-2、MMP-9、IL-1、IL-8以及白细胞数量,但抗菌肽效果明显优于其他两者。同时抗菌肽、氧氟沙星与EGF均参与了角膜溃疡中眼压和泪液的调节,抗菌肽与EGF效果优于氧氟沙星。角膜损伤溃疡面变化宏观微观检测,结果可见抗菌肽可以加快角膜溃疡面愈合,降低角膜浑浊度,减少角膜上皮细胞中炎性细胞浸润,减少组织增生,促使溶解的纤维蛋白恢复。氧氟沙星在抑制炎症发生,减少炎性细胞浸润中有明显效果但抑制组织增生效果较差;EGF可以明显缩短角膜溃疡愈合,降低角膜浑浊度,加快纤维组织重构排列,效果优于抗菌肽。同时抗菌肽、氧氟沙星以及EGF均可促进MUC5AC在结膜杯状细胞中表达。试验结果表明,抗菌肽在抑制实验兔角膜损伤溃疡的炎性反应作用明显优于EGF、氧氟沙星,在促进角膜溃疡面修复作用过程中是EGF的效果最好,其次是抗菌肽,最后是氧氟沙星。 试验三新型生物材料抗菌肽在治疗宠物角膜损伤溃疡临床病例中的应用。通过收集临床中使用抗菌肽治疗角膜溃疡的病例,并综合分析治疗性试验结果显示,使用抗菌肽治疗的病例均表现出恢复快,治疗周期短,副作用明显减少与复发率降低的优势,特别是对于复杂与多重性感染的宠物角膜溃疡临床病例有很好的治疗效果。试验结果表明,抗菌肽对兽医临床中宠物角膜溃疡有显著的治疗效果。 本论文试验结果表明,抗菌肽对动物眼部常见致病菌的抑菌效果明显优于氧氟沙星与EGF,特别是在抑制角膜溃疡炎性反应作用效果显著;在促进角膜溃疡面修复作用过程中是EGF的效果最好,其次是抗菌肽,最后是氧氟沙星;抗菌肽对兽医临床中宠物角膜溃疡有显著的治疗效果。