基于外侧缰核βCaMKⅡ通路探讨电针干预生命早期应激导致的大鼠抑郁症作用机制研究

作     者：杨夕冉 

作者单位：河南中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：杨旭光

授予年度：2023年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：电针 外侧缰核 母婴分离 抑郁症 

摘      要：目的生命早期“母婴分离应激是生命成长过程中的不良刺激,可能是导致成年后抑郁症的重要因素。当今社会“母婴分离现象普遍存在。本研究基于外侧缰核βCa MKII信号转导通路,采用电针进行干预生命早期经历母婴分离应激的大鼠,探索早期电针干预经历母婴分离应激的成年大鼠可能的作用机制,以期为临床针灸防治生命早期母婴分离导致的成年后抑郁症提供实验依据。方法将未生育过的16只雌性Wistar大鼠和8只雄性Wistar大鼠按2:1配种繁殖,本实验选取Wistar孕鼠生产的子代雄性大鼠作为研究对象,将新生子代大鼠出生当天记为第0天(postnatal day,PND0),子代大鼠出生后第1天记为PND1。将新生实验大鼠随机分为母婴分离模型组和空白对照组,除空白组对照组大鼠正常饲养外,其余大鼠在PND1-21采用母婴分离动物模型制备生命早期母婴分离应激模型,所有实验大鼠在PND21天断奶。将实验大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、假电针组和氟西汀组,每组12只。PND30开始,采用电针“印堂和“百会穴进行电针,电针组每日在麻醉状态下进行电针,电流2m A,频率2HZ,时间为15min;假电针组麻醉操作参照电针组大鼠,但毫针不刺入穴位皮肤,使用医用胶布将毫针粘贴在大鼠的穴位表面,而针柄连接上韩式电针仪但不接通电流。模型组、假电针组、氟西汀组、空白组麻醉方法同电针组,氟西汀组每日予氟西汀(10mg/kg)腹腔注射,各组连续进行21天。每周对各组大鼠进行体质量监测;待各组大鼠成年后采用糖水偏爱实验、强迫游泳实验进行行为学评价,采用ELISA检测各组大鼠血清中ACTH、CORT、CRH分泌量,及血清中神经递质5-HT、GABA的含量;采用RT-PCR检测外侧缰核中βCa MKⅡ、Glu R1 m RNA表达,采用western blot检测外侧缰核脑区βCa MKⅡ、Glu R1蛋白表达。结果1.母婴分离应激及电针干预对大鼠体质量的影响:第1到8周各实验组大鼠的体重差异不显著,无统计学意义(P0.05)。2.电针对母婴分离应激大鼠糖水偏爱度及强迫游泳的影响:糖水偏爱实验结果:与空白组比较,模型组大鼠的糖水偏爱度显著下降,差异具有显著统计学意义(P0.05)。强迫游泳测试实验结果:与空白组比较,模型组和假电针组大鼠的强迫游泳不动时间均有显著的延长,差异具有显著统计学意义(P0.05)。4.电针对母婴分离应激大鼠血清中5-HT和GABA含量的影响:与空白组比较,模型组大鼠血清中5-HT和GABA含量均有显著降低,差异有显著统计学意义(P0.05),假电针组大鼠血清中5-HT和GABA含量与模型组比较差异无统计学意义(P0.05,P0.05)。5.电针对母婴分离应激大鼠外侧缰核βCa MKII和Glu R1 m RNA表达的影响:与空白组比较,模型组大鼠外侧缰核中βCa MKII和Glu R1 m RNA的表达量均显著上调,差异有显著统计学意义(P0.01,P0.01),假电针组大鼠外侧缰核βCa MKII和Glu R1 m RNA的表达也明显上调(P0.01,P0.