姜黄素调控CXCL12/CXCR4信号通路对糖尿病肾病小鼠保护作用研究

作     者：李永妍 

作者单位：海南医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王颖

授予年度：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：姜黄素 糖尿病肾病 CXCL12 CXCR4 炎症 

摘      要：目的: 糖尿病肾病是糖尿病最常见的微血管并发症,也是导致终末期肾脏疾病的主要原因。糖尿病肾病的发病机制十分复杂,长期高糖血症会导致肾组织炎症浸润,加重肾组织损伤。CXCL12作为促炎因子,通过作用于其受体CXCR4可诱导炎症反应。基于前期课题组研究发现姜黄素具有抗炎、抗氧化作用,本研究旨在探讨姜黄素通过调控CXCL12/CXCR4信号通路对糖尿病肾病小鼠的保护作用,为姜黄素治疗糖尿病肾病提供科学依据。 方法: 将8周龄db/db小鼠,随机分为模型组、姜黄素组,以同龄非糖尿病db/m小鼠为对照组,每组各6只。姜黄素组予普通饲料饲养+姜黄素200mg/kg/天灌胃,对照组和模型组予普通饲料饲养+同等体积的纯净水灌胃。记录小鼠的精神及行为状况,每隔6天称量小鼠的体重及饮食量。姜黄素连续干预8周,用血糖仪测量各组小鼠空腹血糖。采用代谢笼收集各组小鼠的24小时尿液量并检测24小时尿蛋白定量。小鼠予安乐死,收集血液及肾脏标本。检测肾功能、血脂、空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数。HE、PAS和Masson染色观察肾脏病理组织损伤情况。ELISA检测血液、尿液中CXCL12、CXCR4、IL-6和IL-1β的表达水平。Wester Blot和Real Time-qPCR检测肾组织中CXCL12、CXCR4、IL-6和IL-1β的蛋白及mRNA表达。 结果: 1、在饲养过程中发现对照组小鼠精神状态良好,活动敏捷,对外界刺激敏感,毛发茂盛有光泽。模型组小鼠行为笨拙,毛发暗淡,体重饮食增加,对外界刺激反应迟缓。经过姜黄素治疗后上述症状均有所改善。 2、与对照组相比,模型组小鼠饮食量增多,体重增长明显。给予姜黄素干预减少db/db小鼠的饮食量及体重增长。 3、与对照组相比,模型组小鼠肾功能异常,24小时尿蛋白定量、血脂、空腹血糖及空腹胰岛素升高,出现胰岛素抵抗;姜黄素干预可改善db/db小鼠的肾功能及胰岛素抵抗,降低血脂、空腹血糖及尿蛋白排泄。 4、肾脏病理结果显示,对照组小鼠肾小球及肾小管形态正常。与对照组相比,模型组小鼠肾小球体积增大、系膜及基底膜增厚,肾小管上皮细胞排列紊乱、管腔变大,肾脏纤维化。与模型组相比,姜黄素组小鼠肾脏病理学损伤减轻。 5、ELISA结果显示,与对照组相比,模型组小鼠血液及尿液中CXCL12、CXCR4、IL-6及IL-1β高表达。经姜黄素干预后上述指标表达降低。 6、Western blot结果显示,与对照组相比,模型组小鼠肾组织CXCL12、CXCR4、IL-6、IL-1β蛋白表达升高,姜黄素可以降低db/db小鼠肾组织中CXCL12、CXCR4、IL-6及IL-1β蛋白表达。 7、Real Time-qPCR结果显示,与对照组相比,模型组小鼠肾组织CXCL12、CXCR4、IL-6、IL-1β的mRNA高表达。与模型组相比,姜黄素组小鼠肾组织中CXCL12、CXCR4、IL-6及IL-1β的mRNA表达降低。 结论: 1、姜黄素改善糖尿病肾病小鼠肾功能、血脂、血糖及胰岛素抵抗,减少尿蛋白排泄。 2、姜黄素可能通过下调CXCL12/CXCR4信号通路抑制炎症反应,减轻糖尿病小鼠肾损伤。