通过TRPV1通路探讨CBD对幼年大鼠诱发实验性热性惊厥的影响

作     者：冉淑红 

作者单位：湖北医药学院 

学位级别：硕士

导师姓名：陈全景

授予年度：2024年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学] 

主      题：大麻二酚 惊厥 瞬时受体电位通道 白介素-6 胶质纤维酸性蛋白 

摘      要：背景:热性惊厥(Febrile seizures,FS)是儿科急诊常见的疾病之一,绝大多数FS都呈良性病程并具有自愈性,但在理论上FS有4个潜在的不良后果:复发或转变为复杂性热性惊厥、转变为癫痫、反复惊厥发作引起的神经系统后遗症等。这些可能出现的不良后果是引起家长焦虑情绪的主要因素,但目前仍缺乏安全有效的预防手段。胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)特异地表达于中枢神经系统星型胶质细胞胞质内,当中枢神经系统受损时,GFAP水平明显升高,可用于评估脑组织神经系统热损伤程度及预测脑损伤的预后。热敏瞬时受体电位香草酸-1(The heat-sensitive transient receptor potential vanilloid-1,TRPV1)定位于外周和中枢结构中,并与外周和中枢结构的热敏感性有关,在响应环境和核心体温变化的热调节中起重要作用,研究发现TRPV1的激活与热性惊厥的发作有关,同时,激活TRPV1可刺激炎性因子(如白介素-6,白介素-1β,肿瘤坏死因子-α)分泌,促进反复热性惊厥的发生。大麻二酚(Cannabidiol,C BD)是大麻素的主要非精神活性物质,前期研究发现,CBD具有一定的抗惊厥与抗癫痫特性,其有益作用可被TRPV1拮抗剂SB366791阻止,所以认为CBD能通过调控TRPV1通路发挥抗癫痫作用。本研究探讨CBD是否能通过作用于TRPV1通路发挥对热性惊厥的保护作用,希望为热性惊厥的防治提供新的思路。 目的:本研究通过激活TRPV1通路对幼年大鼠诱发实验性热性惊厥的影响,分析CBD是否发挥神经保护作用,检验TRPV1通路在热性惊厥发病机制中的潜在作用。 方法:选择出生14日龄Spargue Dawley(SD)大鼠,随机分为5组:空白对照组(8只)、FS组(10只),CBD+FS组(10只)、SB366791+FS组(10只)及SB366791+CBD+FS组(10只),分别予以CBD(60mg/kg)、SB366791(1mg/kg)腹腔注射进行预处理,使用气浴法建立大鼠惊厥模型,记录惊厥潜伏期、持续时间、惊厥级别等;收集脑组织标本,酶联免疫法检测海马组织IL-6、TRPV1水平,Western Blot(WB)法检查脑组织GFAP的表达;对收集的实验数据进行分析和统计学处理。 结果: 1、本研究有48只大鼠纳入实验,其中惊厥发作的大鼠共24只。可观测的大鼠行为:抹脸、点头、狂奔、行走无力、跌倒、四肢阵挛性惊厥、全身性肌阵挛性抽搐及小便失禁等。大鼠恢复期的特点是长时间不活动,伴有间歇性肌阵挛性抽搐和头部晃动。 2、各组间惊厥潜伏期、惊厥持续时间、惊厥发作级别无明显差异(P0.05),无统计学意义。但比较其平均值/中位数,CBD+FS组惊厥潜伏期最长、惊厥持续时间最短,惊厥发作级别最低。 3、FS组、CBD+FS组、SB366791+CBD+FS组未惊厥大鼠与惊厥大鼠TRPV1浓度相比,惊厥大鼠TRPV1浓度明显高于未惊厥大鼠(P0.05);CBD+FS组明显高于SB366791+FS组(P0.05);CBD+FS组与SB366791+CBD+FS组无统计学意义(P0.05)。 6、各组IL-6浓度分别为:空白对照组69.36±16.98 pg/ml,FS组146.19±35.60 pg/ml,CBD+FS组101.27±15.34 pg/ml,SB366791+FS组167.16±23.68 pg/ml,SB366791+C