自供电玉红贴的制备、药效物质分析及创面愈合研究

作     者：刘晖 

作者单位：长春中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：严铭铭

授予年度：2024年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：慢性创面 摩擦纳米发电机 药效物质 玉红膏 指纹图谱 

摘      要：目的:本研究基于经典名方玉红膏,以具有良好临床效果的长春中医药大学院内制剂玉红膏组方为研究对象,通过现代中药优化提取方法获得玉红膏提取物,进而采用现代制剂技术结合摩擦纳米发电机(triboelectric nanogenerator,TENG)制备技术制备自供电玉红贴,在此基础上,构建自供电玉红贴指纹图谱,分析其药效物质及作用靶点,并验证其药效及初步的作用机制,为使经典名方玉红膏赋以现代科学内涵提供探究方式,也为将其开发成现代中药复方外用制剂提供理论数据。 方法: 1玉红膏提取物制备工艺的优化 采用单因素结合响应面设计实验法,以绿原酸、阿魏酸、甘草苷等为评价指标,确定最佳提取工艺。 2自供电玉红贴成型性工艺研究 以最佳提取物为基础,通过单因素试验法确定最佳成型条件,结合红外光谱、扫描电镜及透皮给药试验验证玉红凝胶的质量与稳定性。 3自供电玉红贴指纹图谱的建立 采用高效液相法建立指纹图谱,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立自供电玉红贴指纹图谱,并采用主成分分析(principal component analysis,PCA)等多元统计分析方法,考察21批自供电玉红贴的质量差异。 4自供电玉红贴药效物质及作用靶点的分析研究 采用液质联用技术,检测并分析自供电玉红贴中的药效物质,通过分子对接技术揭示抗炎活性成分与核心靶点的结合情况。 5自供电玉红贴治疗慢性创面作用的研究 通过动物模型验证自供电玉红贴在炎症和创面愈合中的治疗效果,采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测炎症因子水平,揭示其调控细胞因子表达的作用机制。 结果: 1玉红膏提取物制备工艺的优化 最佳提取工艺为料液比1:10,提取时间80分钟,提取温度85℃,乙醇浓度83%。在此基础上制备三批玉红膏提取物进行验证,结果表明三批玉红膏提取物质量稳定、含量合格。 2自供电玉红贴成型性工艺研究 甲基丙烯酰化明胶(Gelatin Methacryloyl,Gel MA)交联度60%,提取物与基质比例1:5,聚(3,4-乙烯二氧噻吩)-聚苯乙烯磺酸(poly(3,4-ethylenedioxythiophene)-poly(styrenesulfonate),PEDOT/PSS)含量1.5%w/v时,成型性最佳。 3自供电玉红贴指纹图谱的建立 建立21批自供电玉红贴的指纹图谱,筛选出绿原酸、阿魏酸、甘草苷、欧前胡素四种差异性质量标志物,为控制自供电玉红贴的质量提供了实验依据。 4自供电玉红贴药效物质的研究 通过液质联用技术鉴定910个化学成分,共鉴定出910个化学成分,其中相似度大于90%的共有43个化合物。收集到自供电玉红贴治疗慢性创面核心靶点23个,主要作用于AKT1、EGFR、SRC、PTGS2四个核心靶点而发挥疗效。 5自供电玉红贴治疗慢性创面作用的研究 在炎症模型中表现出显著治疗效果,慢性创面恢复活性实验表明自供电玉红贴可促进创面愈合,通过ELISA法揭示其调控细胞因子表达。 结论:以玉红膏为基础成功制备自供电玉红贴。优化提取和成型工艺,建立指纹图谱,分析药效物质及靶点,为质量控制提供依据。液质联用技术揭示抗炎成分与核心靶点结合活性,初步认识作用机制。实验证实其在炎症模型中显著治疗效果,在慢性创面恢复方面表现卓越,促进愈合和血管生成。ELISA结果显示其抑制炎症因子分泌,揭示调控细胞因子表达机制。总体而言,自供电玉红贴具备优越的药效,为玉红膏现代化开发提供有力理论支持。