酮症倾向2型糖尿病与初发2型糖尿病肠道菌群的差异性分析

作     者：闻晓强 

作者单位：内蒙古医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张洁

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：酮症倾向2型糖尿病 初发2型糖尿病 肠道菌群 差异性菌种 

摘      要：目的:1.采用肠道菌群多样性分析的方法揭示酮症倾向2型糖尿病(T2DM)患者肠道菌群的菌种构成,并了解酮症倾向T2DM与肠道菌群失衡的关系。2.与初发T2DM相比,酮症倾向T2DM主要是以酮症起病。鉴于二者不同的起病特点,本研究从肠道菌群角度分析二者之间的差异性菌种并明确酮症倾向T2DM的差异性菌种是否与酮症起病有相关性。3.明确初发T2DM与酮症倾向T2DM的差异性菌种与临床代谢指标之间的相关性。方法:纳入34例酮症倾向T2DM患者和34例初发T2DM患者,每名研究对象均严格按样本留取要求留取粪便样本。提取粪便样本DNA,扩增其16Sr RNA全长片段,并进行三代测序,即通过Pac Bio测序平台,利用单分子实时测序技术测序。最后通过生物信息学分析明确菌种组成,α、β多样性分析和显著性菌种差异性分析等。结果:1.一般临床资料显示:两组间年龄、性别、民族、体重指数(BMI)均无统计学差异(P0.05);两组之间甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白A1c(Hb A1c)均有统计学差异(P值分别是0.021、0.011、0.0001、0.00003)。2.16S r RNA基因测序结果:对68份粪便样本,通过单分子实时测序(SMRT Cell)的方法进行测序后,共获得851,377条CCS序列,每个样本至少产生7,909条CCS序列。在97.0%的相似度水平下,将Effective CCS序列进行聚类,获得351个OTU,666,563个序列条数。3.α、β多样性分析提示,两组间无统计学差异(P0.05),考虑两组间菌种多样性和丰度差异较小。*** Se分析主要反映两组间具有统计学差异的菌种。具体表现为酮症倾向T2DM组的差异性菌种Streptococcus＿parasanguinis、Veillonellaceae、Dialister＿invisus、Prevotellaceae、Prevotellacopri的丰度较初发T2DM明显升高(P值分别是0.0489、0.0031、0.0279、0.0305、0.0346)。5.酮症倾向T2DM组差异性菌种Veillonellaceae丰度与TG呈正相关,相关系数为0.267,具有统计学差异(P=0.028);Prevotellaceae及Prevotellacopri均与FPG、Hb A1c呈正相关,相关系数分别为0.294、0.260、0.337、0.295,均具有统计学差异(P值分别是0.015、0.032、0.005、0.015)。结论:1.与初发T2DM相比,酮症倾向T2DM的肠道菌群相对丰富,其肠道菌群的结构特征更容易导致酮体的生成及TG和TC的合成。由此推测酮症倾向T2DM的肠道差异性菌种可能是导致其酮症起病的原因之一,并且支持了酮症倾向T2DM患者比初发T2DM患者TG和TC水平明显增高的现象。2.酮症倾向T2DM组中显著增高的Veillonellaceae与TG呈正相关;Prevotellaceae、Prevotella＿copri与血糖呈正相关。支持了酮症倾向T2DM患者比初发T2DM患者FPG、Hb A1c、TG明显增高的结论。但是肠道菌群系统非常复杂,仅靠几种菌种无法做出确切结论,需要进一步深入研究。