质子泵抑制剂和特定肠道菌共同促进肝病进程的机制研究

作     者：邢路路 

作者单位：河南师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈卫华;王海磊

授予年度：2023年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：质子泵抑制剂 四氯化碳 肝硬化 肠道通透性 细菌易位 

摘      要：质子泵抑制剂(Proton pump inhibitors,PPI)是许多胃肠道疾病的关键药物,主要用于治疗消化道感染和肿瘤治疗过程中(比如放疗、化疗)引起的肠胃不适。自问世以来,因其效果显著、价格低廉,使用非常广泛,甚至到了滥用的程度。研究表明,有37-86%的肝硬化患者在使用质子泵抑制剂,其中34-74%在没有适应症状的情况下也在使用质子泵抑制剂。然而,近年来较多证据显示,PPI长期使用可能存在不良影响。比如,PPI被广泛应用于肝硬化患者,在根除肝硬化患者幽门螺旋杆菌及减少内镜治疗引起的并发症等方面有潜在好处,但是病人在患骨折、艰难梭菌感染自发性腹膜炎、肝性脑病等方面也存在着潜在的危害。PPI长期副作用的关联与机制目前还不清楚。但有研究表明,PPI服用能引起肠道菌群的显著变化,特别是已知口腔菌会在肠道中定植并丰度显著上升,包括唾液链球菌和韦荣球菌属。已知唾液链球菌属的丰度与肠道屏障功能和肠道炎症相关,韦荣球菌的属的丰度与肝脏疾病的严重程度相关;此外口腔菌在肠道中大量滋生也会与众多疾病风险有关。因此,PPI是否通过提高特定肠道菌属的丰度,从而引发肠道炎症,进而导致其长期使用的副作用,是非常值得研究的课题。而目前还没有对此的系统研究。本研究首先利用四氯化碳构建小鼠肝硬化模型,并在此期间对小鼠持续性灌胃奥美拉唑(PPI的一种常见药物)和受PPI影响最大的链球菌和韦荣球菌,最后收集小鼠粪便,血清以及器官组织样本,以检测粪便中细菌的丰度,肝损伤相关炎症因子以及组织病理变化情况。研究结果如下:(1)通过四氯化碳构建的小鼠肝损伤模型表现出显著效果,实验组小鼠谷丙转氨酶和谷草转氨酶的水平显著高于对照组,并且灌胃质子泵抑制剂和混菌的小鼠生化指标也明显高于单独灌胃质子泵抑制剂和混菌的小鼠。(2)小鼠盲肠内容物的RT-PCR结果显示与对照组相比实验组两种菌属的细菌丰度发生了变化,在质子泵抑制剂和混合细菌联合处理的小鼠中,细菌丰度显著上升。对小鼠结肠组织肠道通透性相关基因的检测发现,实验组相较于对照组肠道通透性相关蛋白表达下降,肠道屏障受损。(3)肝脏中的细菌总载量上升,表明由于肠道通透性增加,加速了细菌从肠道到肝的易位。(4)小鼠肝脏中与免疫相关的受体TLR-2和炎症相关因子表达上调。综上所述,通过小鼠肝硬化模型,证明了连续服用质子泵抑制剂(PPI)会加剧小鼠肝损伤;在链球菌和韦荣球菌存在时,肝损伤更为严重。在此过程中,肠道组织炎症因子上升,肠道通透性增加,导致肠内细菌加速向肝转移,并引起肝组织基因表达变化。本研究初步揭示了PPI使用加剧肝损伤的分子路径机制,以及肠道菌群在其中的重要作用。