中药复配物对鸡产气荚膜梭菌坏死性肠炎治疗效果研究

作     者：陈科宇 

作者单位：四川农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张利;温国梁

授予年度：2023年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：产气荚膜梭菌 鸡坏死性肠炎 免疫调节 肠道健康 

摘      要：鸡坏死性肠炎是一种由产气荚膜梭菌感染所致的炎症性肠道疾病,产气荚膜梭菌通过在肠道内的定殖,导致肠道坏死,引起鸡腹泻,造成了家禽养殖业的极大经济损失。随着全球禁抗令的颁布,抗生素已经不可作为饲料添加剂防治鸡坏死性肠炎,而作为具有自己特色和优势的中药,引起了人们的关注,有报道显示不同中药提取物复配使用可提高抗菌效力。本研究以甘草提取物和黄芩提取物作为材料,并以不同浓度将二者提取物进行复配,得到中药复配物。探讨了甘草和黄芩复配物对产气荚膜梭菌的体外抑菌作用和体内治疗鸡坏死性肠炎的效果,同时利用高效液相色谱测定了甘草提取物和黄芩提取物的有效成分,对甘草提取物和黄芩提取物进行质量控制,旨在为中药治疗鸡坏死性肠炎提供理论依据。主要研究结果如下:1.甘草提取物对产气荚膜梭菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为8 mg/m L,对产气荚膜梭菌的最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)为32 mg/m L;黄芩提取物对产气荚膜梭菌的MIC为4 mg/m L,MBC为16 mg/m L;对甘草提取物和黄芩提取物有效成分进行含量测定,结果显示,甘草提取物中芹糖甘草苷的含量为3.09%,甘草苷的含量为2.81%,甘草素的含量为1.71%,甘草酸的含量为9.91%;黄芩提取物中黄芩苷的含量为6.41%,汉黄芩苷的含量为1.60%,黄芩素的含量为2.00%。且10个批次的甘草和黄芩提取物中同一有效成分无显著差异。2.当甘草提取物以1 mg/m L、黄芩提取物以0.5 mg/m L进行复配时即可抑制产气荚膜梭菌的生长,即为两者复配后的MIC,对产气荚膜梭菌表现为协同抑菌作用;当甘草提取物和黄芩提取物分别以8 mg/m L和8 mg/m L复配时,此为MBC;甘草和黄芩复配物通过破坏产气荚膜梭菌的细胞膜,导致蛋白质的外泄,引起细菌死亡。还可抑制细菌生物膜的形成,增加细胞表面疏水率,减少细菌黏附与正常生理代谢生长。3.在饲料中添加一定剂量中药复配物(1 000 mg/kg)可缓解由于产气荚膜梭菌定殖导致的鸡坏死性肠炎的临床症状,提高感染引起的生长性能降低(P0.05);提高鸡血清中免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白M(Ig M)、免疫球蛋白Y(Ig Y)含量(P0.05),缓解产气荚膜梭菌造成的鸡肠道结构损伤,保护肠道正常结构与功能;降低空肠中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)的含量,改善炎症反应;提高空肠中紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接跨膜蛋白1(Claudin-1)、黏蛋白2(MUC2)的含量,维护肠道完整性;影响盲肠微生物区系的Beta多样性,降低盲肠微生物区系门水平中变形菌门的丰度,减少有害细菌的定殖,提高属水平中栖粪杆菌属的丰度,有益于潜在益生菌的生长;降低瘤胃球菌属的丰度,减缓炎症反应;降低贺氏菌属的丰度,改善腹泻症状;降低梭菌属丰度,减少产气荚膜梭菌定殖,维持肠道健康水平。