人参皂苷Rg1对孤独症模型鼠行为及海马神经元自噬水平的影响

作     者：杜美玲 

作者单位：佳木斯大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郭岚敏;姜志梅;庞伟;王菊莉;郭津

授予年度：2023年

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100205[医学-精神病与精神卫生学] 10[医学] 

主      题：孤独症 海马 自噬 神经元 人参皂苷Rg1 

摘      要：目的:研究不同剂量人参皂苷Rg1对孤独症模型鼠行为及海马神经元自噬水平的影响,并探究人参皂苷Rg1改善孤独症模型鼠异常行为的更优剂量。方法:选用健康成年清洁级Wistar大鼠,参照Schnider法,于模型组孕鼠孕12.5天时腹腔注射600 mg/kg丙戊酸钠(Sodium Valproate,VPA),产下仔鼠记为孤独症模型鼠;正常组孕鼠同时期腹腔注射同体积生理盐水,产下仔鼠记为正常组仔鼠。通过发育学与行为学检测模型鼠的发育与行为特征。P14时将模型鼠随机分为模型对照组(VPA组)、Rg1L组和Rg1H组,每组30只,Rg1L组每日腹腔注射20 mg/kg人参皂苷Rg1,Rg1H组同时期腹腔注射40 mg/kg人参皂苷Rg1,连续至P35。于P31-P35时采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,P35三箱实验检测社交能力,埋珠实验检测重复刻板行为,Y迷宫检测空间认知能力;HE染色观察四组仔鼠海马CA3区、DG区的病理变化;尼氏染色观察海马CA3区、DG区神经元功能状态;免疫荧光检测海马神经元与LC3蛋白的表达;免疫印迹技术检测海马P62与Beclin1蛋白的表达。结果:1.模型组仔鼠存在明显的生长发育异常,各节点的体重均显著低于正常组,方向趋向性检测与嗅觉寻巢所需时间延长,游泳实验得分降低。P21时,模型组仔鼠对社交气味的敏感性下降,重复刻板累计时间增加,社交能力下降,社交新奇性降低。P35时,模型组仔鼠脑重降低,水迷宫逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,空间认知能力低。2.与正常组仔鼠相比,模型组仔鼠海马CA3区和DG区神经细胞排列疏松、杂乱,细胞结构模糊,尼氏小体数量减少,神经元出现严重功能障碍;Neu N阳性细胞数量减少,LC3蛋白表达降低;海马P62蛋白表达升高,Beclin1蛋白表达降低。***1L组与Rg1H组仔鼠的体重与脑重增加,社交能力改善,学习记忆与空间认知能力提高,重复刻板行为减少,且改善程度与剂量呈正相关。***1L组与Rg1H组仔鼠海马CA3区和DG区神经细胞排列紧密,尼氏小体数量增加,神经功能改善;海马Neu N阳性细胞数量增加,LC3蛋白表达升高,神经元与LC3蛋白共定位程度提高;海马P62蛋白表达下降,Beclin1蛋白表达升高,且与Rg1L组相比,Rg1H组改善效果更加明显。结论:1.孤独症模型鼠海马神经元功能受损,LC3、Beclin1蛋白表达下降,P62蛋白表达升高;2.人参皂苷Rg1干预可以有效改善孤独症模型鼠的异常行为与海马神经元功能,促进LC3、Beclin1蛋白的表达,抑制P62蛋白的过表达;3.不同剂量的人参皂苷Rg1对孤独症模型鼠行为及海马神经元自噬水平的干预效果不同,40mg/kg效果优于20 mg/kg。